产纤维素酶解淀粉芽孢杆菌Tx26的筛选及基因在大肠杆菌中的表达
| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 缩略词表(Abbreviation) | 第10-11页 |
| 1 前言 | 第11-19页 |
| ·问题的提出 | 第11页 |
| ·研究背景 | 第11-18页 |
| ·纤维素的结构 | 第11-12页 |
| ·纤维素的分解 | 第12-13页 |
| ·纤维素的物理分解 | 第12-13页 |
| ·纤维素的化学分解 | 第13页 |
| ·纤维素酶的研究进展 | 第13-16页 |
| ·纤维素酶的定义 | 第13-14页 |
| ·纤维素酶的结构 | 第14-15页 |
| ·纤维素酶的作用机制 | 第15页 |
| ·纤维素酶的微生物来源 | 第15-16页 |
| ·纤维素酶高产微生物的选育研究进展 | 第16-17页 |
| ·纤维素酶产生菌的分子生物学研究进展 | 第17页 |
| ·纤维素酶的应用 | 第17-18页 |
| ·研究内容 | 第18-19页 |
| 2 材料与方法 | 第19-31页 |
| ·菌种的筛选与鉴定 | 第19-23页 |
| ·材料 | 第19-20页 |
| ·菌源 | 第19页 |
| ·主要仪器 | 第19-20页 |
| ·培养基 | 第20页 |
| ·主要试剂及缓冲液 | 第20页 |
| ·方法 | 第20-21页 |
| ·固体培养基初筛 | 第20-21页 |
| ·摇瓶发酵复筛 | 第21页 |
| ·粗酶液的制备 | 第21页 |
| ·内切葡聚糖酶的活力测定 | 第21页 |
| ·菌种鉴定 | 第21-23页 |
| ·形态鉴定 | 第21页 |
| ·总DNA的抽提 | 第21-22页 |
| ·16S rRNA基因分析 | 第22-23页 |
| ·纤维素降解菌产酶影响因素分析 | 第23-24页 |
| ·培养时间对产酶的影响 | 第23页 |
| ·培养温度对产酶的影响 | 第23页 |
| ·碳源对产酶的影响 | 第23页 |
| ·氮源对产酶的影响 | 第23页 |
| ·培养基初始pH对产酶的影响 | 第23页 |
| ·通气量对产酶的影响 | 第23-24页 |
| ·内切葡聚糖酶的克隆、表达和酶学性质初步分析 | 第24-31页 |
| ·材料 | 第24-26页 |
| ·实验方法 | 第26-31页 |
| ·内切葡聚糖酶基因表达片断的扩增 | 第26页 |
| ·PCR产物的纯化 | 第26-27页 |
| ·内切葡聚糖酶基因的克隆 | 第27-29页 |
| ·β-内切葡聚糖酶基因的诱导表达 | 第29页 |
| ·重组菌的SDS-PAGE电泳分析 | 第29页 |
| ·酶反应条件的初步研究 | 第29-31页 |
| 3 结果与分析 | 第31-43页 |
| ·菌株的分离、筛选 | 第31-32页 |
| ·菌种的鉴定 | 第32页 |
| ·培养条件对产酶的影响 | 第32-35页 |
| ·培养时间对产酶的影响 | 第32页 |
| ·培养温度对产酶的影响 | 第32-33页 |
| ·碳源对产酶的影响 | 第33-34页 |
| ·氮源对产酶的影响 | 第34页 |
| ·培养基初始pH对产酶的影响 | 第34-35页 |
| ·通气量对产酶的影响 | 第35页 |
| ·β-1，4-内切葡聚糖酶基因的扩增 | 第35-36页 |
| ·阳性克隆的筛选及鉴定 | 第36页 |
| ·重组质粒在大肠杆菌BL21中的诱导表达 | 第36页 |
| ·重组表达蛋白的SDS-PAGE分析 | 第36-37页 |
| ·酶学性质初步研究 | 第37-41页 |
| ·温度对酶活的影响 | 第37-38页 |
| ·pH值对酶活的影响 | 第38-39页 |
| ·酶液的温度耐受性 | 第39页 |
| ·酶液的pH耐受性 | 第39-40页 |
| ·金属离子对酶活的影响 | 第40-41页 |
| ·重组菌与出发菌β-内切葡聚糖酶酶学性质比较 | 第41页 |
| ·同源性分析 | 第41-43页 |
| 4 讨论 | 第43-46页 |
| ·酶活的测定 | 第43页 |
| ·培养条件对产酶的影响 | 第43-44页 |
| ·β-内切葡聚糖酶的表达 | 第44-45页 |
| ·酶学性质的初步研究 | 第45页 |
| ·展望 | 第45-46页 |
| 5 结论 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-52页 |
| 附录 | 第52-53页 |
| 致谢 | 第53页 |
