首页--工业技术论文--化学工业论文--其他化学工业论文--发酵工业论文--酶制剂(酵素)论文

黑曲霉多糖单加氧酶的克隆表达与协同性研究

摘要第4-5页
ABSTRACT第5-6页
1 前言第10-19页
    1.1 木质纤维素第10-11页
        1.1.1 纤维素第10-11页
        1.1.2 半纤维素第11页
        1.1.3 木质素第11页
    1.2 木质纤维素降解酶第11-13页
        1.2.1 纤维素酶第11-12页
        1.2.2 半纤维素酶第12页
        1.2.3 木质素酶第12页
        1.2.4 木质纤维素降解中的辅助蛋白第12-13页
    1.3 裂解性多糖单加氧酶(LPMO)第13-16页
        1.3.1 AA9第14-15页
        1.3.2 AA10第15-16页
        1.3.3 AA11和AA13第16页
    1.4 蛋白结构功能域的研究第16页
    1.5 蛋白质的N-糖基化第16-17页
    1.6 课题的立题背景和研究内容第17-19页
        1.6.1 立题背景第17页
        1.6.2 研究内容第17-19页
2 材料和方法第19-34页
    2.1 实验材料第19-22页
        2.1.1 菌株和质粒第19页
        2.1.2 主要仪器第19页
        2.1.3 主要试剂第19-20页
        2.1.4 常用培养基和主要溶液第20-22页
    2.2 实验方法第22-30页
        2.2.1 黑曲霉的活化培养与总RNA提取第22页
        2.2.2 RNA反转录第22页
        2.2.3 目的基因的获得第22-24页
        2.2.4 重组质粒的构建第24页
        2.2.5 毕赤酵母的转化与诱导表达第24-25页
        2.2.6 目的蛋白的纯化与分析第25-26页
        2.2.7 协同活性研究第26-27页
        2.2.8 AnLPM015g的生物信息学分析第27页
        2.2.9 结构域对协同性的影响第27-28页
        2.2.10 N-糖基化对AnLPM015g协同性的影响第28-30页
    2.3 分析方法第30-34页
        2.3.1 还原糖测定第30-31页
        2.3.2 蛋白的SDS-PAGE分析第31页
        2.3.3 蛋白质含量测定第31-32页
        2.3.4 协同度分析第32-33页
        2.3.5 MALDI-TOF/TOF分析第33-34页
3 结果与讨论第34-65页
    3.1 黑曲霉AA9的克隆表达第34-38页
        3.1.1 黑曲霉总RNA的提取第34页
        3.1.2 目的基因的克隆第34-35页
        3.1.3 重组载体的构建与验证第35-36页
        3.1.4 毕赤酵母的转化与验证第36-37页
        3.1.5 目的基因的诱导表达及表达产物分析纯化第37-38页
        3.1.6 小结第38页
    3.2 酶解与协同活性研究第38-53页
        3.2.1 底物的特异性分析第38页
        3.2.2 产物分析第38-40页
        3.2.3 AnLPM014g和AnLPM015g与纤维素酶的协同性研究第40-43页
        3.2.4 AnLPM014g和AnLPM015g与木聚糖酶的协同性研究第43-46页
        3.2.5 协同活性影响因素研究第46-52页
        3.2.6 小结第52-53页
    3.3 结构域对AnLPM015g协同性的影响第53-58页
        3.3.1 AnLPM015g一级和二级结构预测第53-54页
        3.3.2 CBM域缺失的AnLPM015g基因的获取第54页
        3.3.3 重组质粒的构建与验证第54页
        3.3.4 重组毕赤酵母的验证第54-55页
        3.3.5 重组毕赤酵母的诱导表达第55-56页
        3.3.6 结构域对AnLPM015g与纤维素酶协同性的影响第56-58页
        3.3.7 小结第58页
    3.4 N-糖基化位点突变对AnLPM015g协同性的影响第58-65页
        3.4.1 糖基化位点预测第58页
        3.4.2 去糖基化第58-59页
        3.4.3 N-糖基化位点突变的An15g04900基因的获取第59-60页
        3.4.4 重组质粒的构建第60-61页
        3.4.5 毕赤酵母的转化与验证第61页
        3.4.6 重组毕赤酵母的诱导表达第61-62页
        3.4.7 N-糖基化位点对AnLPM015g与纤维素酶协同性的影响第62-64页
        3.4.8 小结第64-65页
4 结论第65-66页
    4.1 全文总结第65页
    4.2 论文的创新点第65页
    4.3 论文的不足之处第65-66页
5 展望第66-67页
6 参考文献第67-76页
7 攻读硕士学位期间发表论文第76-77页
8 致谢第77页

论文共77页,点击 下载论文
上一篇:高山被孢霉合成花生四烯酸油脂的调控研究
下一篇:链霉菌TD-1中生物色素的提取纯化工艺及应用研究