| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-12页 |
| 缩略词 | 第12-13页 |
| 第一章 绪论 | 第13-20页 |
| ·几丁质 | 第13-14页 |
| ·几丁质酶 | 第14-18页 |
| ·几丁质酶简介 | 第14-15页 |
| ·几丁质酶分类 | 第15-17页 |
| ·几丁质酶的特点 | 第17页 |
| ·几丁质酶酶活的测定方法 | 第17页 |
| ·几丁质酶的生产 | 第17-18页 |
| ·几丁质酶的应用 | 第18页 |
| ·立题依据与研究内容 | 第18-20页 |
| 第二章 几丁质酶高产菌株的分离、筛选及鉴定 | 第20-30页 |
| ·引言 | 第20页 |
| ·材料与方法 | 第20-23页 |
| ·材料 | 第20页 |
| ·仪器 | 第20页 |
| ·化学试剂 | 第20-21页 |
| ·培养基 | 第21页 |
| ·方法 | 第21-23页 |
| ·结果分析 | 第23-28页 |
| ·几丁质酶合成菌株的分离、筛选 | 第23-24页 |
| ·菌株C. meiyuanensis SYBC-H1 的鉴定 | 第24-27页 |
| ·C. meiyuanensis SYBC-H1 几丁质酶的合成进程 | 第27-28页 |
| ·讨论 | 第28-30页 |
| 第三章 菌株SYBC-H1 液态发酵几丁质酶合成条件优化 | 第30-46页 |
| ·引言 | 第30页 |
| ·材料与方法 | 第30-32页 |
| ·菌种 | 第30页 |
| ·仪器 | 第30-31页 |
| ·化学试剂 | 第31页 |
| ·培养基 | 第31页 |
| ·方法 | 第31-32页 |
| ·C. meiyuanensis SYBC-H1 几丁质酶合成罐上发酵实验 | 第32页 |
| ·结果分析 | 第32-44页 |
| ·单因素对C. meiyuanensis SYBC-H1 几丁质酶合成的影响 | 第32-34页 |
| ·Plackett-Burman 实验设计 | 第34-36页 |
| ·接种量，装液量，菌龄及表面活性剂对SYBC-H1 产酶的影响 | 第36-37页 |
| ·几种关键因子对菌株几丁质酶合成的影响 | 第37-38页 |
| ·优化产酶培养基组成的中心组合实验（CCD） | 第38-40页 |
| ·培养基优化结果 | 第40页 |
| ·产酶条件的优化 | 第40-43页 |
| ·C. meiyuanensis SYBC-H1 合成罐上发酵试验 | 第43-44页 |
| ·讨论 | 第44-46页 |
| 第四章 SYBC-H1 几丁质酶的分离纯化及酶学性质研究 | 第46-55页 |
| ·引言 | 第46页 |
| ·材料与方法 | 第46-48页 |
| ·材料 | 第46页 |
| ·仪器 | 第46页 |
| ·化学试剂 | 第46页 |
| ·培养基 | 第46-47页 |
| ·方法 | 第47-48页 |
| ·结果分析 | 第48-54页 |
| ·几丁质酶的同工酶谱 | 第48-49页 |
| ·几丁质酶的纯化 | 第49-51页 |
| ·几丁质酶的分子量 | 第51页 |
| ·几丁质酶的酶学性质 | 第51-52页 |
| ·几丁质酶的稳定性 | 第52-54页 |
| ·几丁质酶动力学研究 | 第54页 |
| ·讨论 | 第54-55页 |
| 第五章 SYBC-H1 几丁质酶合成生理机制研究 | 第55-71页 |
| ·引言 | 第55页 |
| ·材料与方法 | 第55-59页 |
| ·材料 | 第55页 |
| ·仪器 | 第55-56页 |
| ·化学试剂 | 第56页 |
| ·培养基 | 第56页 |
| ·方法 | 第56-59页 |
| ·结果分析 | 第59-68页 |
| ·C. meiyuanensis SYBC-H1 的发酵产几丁质酶进程 | 第59页 |
| ·蛋白质含量变化 | 第59页 |
| ·菌体量的变化 | 第59-60页 |
| ·pH 值的变化 | 第60-61页 |
| ·谷胱甘肽过氧化物酶活性的变化 | 第61页 |
| ·过氧化氢酶活性的变化 | 第61-62页 |
| ·T-AOC 的变化 | 第62页 |
| ·维生素C 含量的变化 | 第62-63页 |
| ·抑制羟自由基能力的变化 | 第63页 |
| ·丙二醛含量的变化 | 第63-64页 |
| ·超氧化歧化酶活性的变化 | 第64页 |
| ·H_2O_2 含量的变化 | 第64页 |
| ·ATP 含量的变化 | 第64页 |
| ·巯基含量的变化 | 第64-65页 |
| ·抗超氧阴离子自由基的变化 | 第65-66页 |
| ·葡萄糖、果糖浓度对几丁质酶合成的影响 | 第66页 |
| ·ABC 转运系统基因的PCR 扩增产物分析 | 第66-68页 |
| ·ABC 转运系统反转录产物电泳分析 | 第68页 |
| ·讨论 | 第68-71页 |
| 第六章 SYBC-H1 几丁质酶基因的克隆与表达 | 第71-82页 |
| ·引言 | 第71页 |
| ·材料与方法 | 第71-74页 |
| ·菌株与载体 | 第71页 |
| ·仪器 | 第71-72页 |
| ·酶与化学试剂 | 第72页 |
| ·培养基 | 第72页 |
| ·方法 | 第72-74页 |
| ·结果分析 | 第74-80页 |
| ·几丁质酶基因的克隆 | 第74-76页 |
| ·几丁质酶基因的BLAST 同源性分析 | 第76页 |
| ·几丁质酶基因序列与蛋白序列的聚类分析 | 第76-77页 |
| ·几丁质酶的三级结构预测 | 第77-78页 |
| ·重组质粒pET28a-CHI2 的构建及转化子的验证 | 第78-79页 |
| ·几丁质酶基因在大肠杆菌E.coli BL21 中的表达 | 第79-80页 |
| ·讨论 | 第80-82页 |
| 第七章 SYBC-H1 几丁质酶水解几丁质的研究 | 第82-89页 |
| ·引言 | 第82页 |
| ·材料与方法 | 第82-84页 |
| ·实验材料 | 第82页 |
| ·仪器 | 第82页 |
| ·化学试剂 | 第82页 |
| ·培养基 | 第82-83页 |
| ·方法 | 第83-84页 |
| ·结果分析 | 第84-88页 |
| ·水解产物的高效液相色谱（HPLC）及质谱（MS）鉴定 | 第84-85页 |
| ·几丁质粉的粒径对几丁质酶水解几丁质的影响 | 第85页 |
| ·β-巯基乙醇对几丁质酶水解几丁质的影响 | 第85页 |
| ·转速对几丁质酶水解几丁质的影响 | 第85-86页 |
| ·金属离子对几丁质酶水解几丁质的影响 | 第86-87页 |
| ·pH、温度对几丁质酶水解几丁质的影响及水解进程曲线 | 第87-88页 |
| ·讨论 | 第88-89页 |
| 第八章 主要结论与展望 | 第89-92页 |
| 主要结论 | 第89-90页 |
| 展望 | 第90-92页 |
| 论文主要创新点 | 第92-93页 |
| 致谢 | 第93-95页 |
| 参考文献 | 第95-108页 |
| 附录1 C. meiyuanensis SYBC-H1几丁质酶CHI1基因序列 | 第108-109页 |
| 附录2 C. meiyuanensis SYBC-H1几丁质酶CHI2 基因序列 | 第109-110页 |
| 附录3 C. meiyuanensis SYBC-H1 ATP 酶基因序列 | 第110-111页 |
| 附录4 C. meiyuanensis SYBC-H1 细胞间周质糖结合蛋白基因序列 | 第111-112页 |
| 附录5 C. meiyuanensis SYBC-H1 氨基糖苷转运蛋白基因序列 | 第112-113页 |
| 附录6 C. meiyuanensis SYBC-H1 16S rRNA 基因序列 | 第113-114页 |
| 附录： 作者在攻读博士期间发表论文 | 第114页 |
