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放射型根瘤菌产环β-1,2-葡聚糖的合成过程优化

摘要第3-4页
Abstract第4-5页
第一章 绪论第9-14页
    1.1 环β-1,2-葡聚糖的概述第9-10页
        1.1.1 环β-1,2-葡聚糖的结构及理化性质第9-10页
        1.1.2 环β-1,2-葡聚糖的功能及应用第10页
    1.2 环状β-1,2-葡聚糖的合成体系第10-11页
    1.3 多糖的提取纯化及结构鉴定第11-12页
    1.4 立题背景及意义第12页
    1.5 本课题的主要研究内容第12-14页
第二章 材料与方法第14-24页
    2.1 实验材料第14-15页
        2.1.1 菌株来源第14页
        2.1.2 主要试剂第14-15页
        2.1.3 主要仪器第15页
    2.2 发酵培养方法第15-16页
        2.2.1 培养基第15页
        2.2.2 培养方法第15-16页
        2.2.3 7L反应器发酵方法第16页
    2.3 分析方法第16-17页
        2.3.1 细胞浓度的测定第16页
        2.3.2 环葡聚糖含量的测定第16页
        2.3.3 TLC法第16页
        2.3.4 甘露醇含量的测定第16-17页
        2.3.5 谷氨酸含量的测定第17页
        2.3.6 蛋白浓度测定第17页
        2.3.7 发酵颜色测定第17页
    2.4 提取纯化方法第17-19页
        2.4.1 乙醇分级沉淀第17-18页
        2.4.2 HPLC法分离多糖第18-19页
        2.4.3 凝胶色谱法第19页
        2.4.4 SPE制备法第19页
    2.5 多糖结构鉴定方法第19-20页
        2.5.1 MALDI-TOFMS测定方法第19页
        2.5.2 单糖组成分析法第19-20页
        2.5.3 FTIR测定方法第20页
        2.5.4 ESI-CIDMS/MS测定方法第20页
        2.5.5 NMR测定方法第20页
    2.6 关于胞内差异蛋白的二位电泳操作第20-24页
        2.6.1 二维凝胶电泳(2-DE)蛋白样品制备第20-21页
        2.6.2 主要溶液配方第21页
        2.6.3 二维凝胶电泳(2-DE)蛋白样品制备第21-22页
        2.6.4 2-DE操作方法第22-24页
第三章 结果与讨论第24-55页
    3.1 环葡聚糖发酵条件的优化第24-33页
        3.1.1 放射型根瘤菌的生长特性第24-25页
        3.1.2 培养基成分的优化第25-28页
        3.1.3 培养条件的优化第28-29页
        3.1.4 Plackett-Burman试验设计第29-30页
        3.1.5 Central Composite Design试验设计第30-33页
        3.1.6 验证实验第33页
    3.2 环葡聚糖发酵过程中发酵颜色控制策略第33-39页
        3.2.1 谷氨酸浓度对细胞浓度和色素形成的影响第33-34页
        3.2.2 摇瓶水平不同氮、碳源补料流加策略对细胞浓度和色素形成的影响第34-35页
        3.2.3 7L生物反应器条件下发酵过程图第35-36页
        3.2.4 pH调控对发酵过程的影响第36-38页
        3.2.5 pH两阶段调控结合溶氧控制策略强化环葡聚糖合成第38-39页
    3.3 发酵多糖的分级提取纯化以及制备第39-43页
        3.3.1 乙醇分级沉淀法第39-40页
        3.3.2 HPLC法分离沉淀第40-41页
        3.3.3 凝胶色谱制备法第41页
        3.3.4 SPE制备法第41-42页
        3.3.5 HPLC法分级制备组分Ⅰ第42-43页
    3.4 沉淀2的结构表征第43-50页
        3.4.1 单糖组成分析第43-44页
        3.4.2 MALDI–TOFMS检测组分Ⅰ和组分Ⅱ的分子量第44页
        3.4.3 FTIR鉴定组分Ⅰ和组分Ⅱ的结构第44-45页
        3.4.4 组分Ⅰ的结构鉴定第45-48页
        3.4.5 组分Ⅱ的结构鉴定第48-50页
    3.5 目标多糖的胞外分泌的初探第50-55页
        3.5.1 TLC相对定量分析环葡聚糖第50页
        3.5.2 不同氮源模式对发酵影响的比较第50-53页
        3.5.3 以NaNO_3与谷氨酸为不同氮源发酵的细菌胞内差异蛋白比对第53-55页
主要结论与展望第55-57页
    主要结论第55页
    展望第55-57页
致谢第57-58页
参考文献第58-63页
附录:作者在攻读硕士学位期间发表的论文第63页

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