| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 第一章 绪论 | 第9-14页 |
| 1.1 环β-1,2-葡聚糖的概述 | 第9-10页 |
| 1.1.1 环β-1,2-葡聚糖的结构及理化性质 | 第9-10页 |
| 1.1.2 环β-1,2-葡聚糖的功能及应用 | 第10页 |
| 1.2 环状β-1,2-葡聚糖的合成体系 | 第10-11页 |
| 1.3 多糖的提取纯化及结构鉴定 | 第11-12页 |
| 1.4 立题背景及意义 | 第12页 |
| 1.5 本课题的主要研究内容 | 第12-14页 |
| 第二章 材料与方法 | 第14-24页 |
| 2.1 实验材料 | 第14-15页 |
| 2.1.1 菌株来源 | 第14页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第14-15页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第15页 |
| 2.2 发酵培养方法 | 第15-16页 |
| 2.2.1 培养基 | 第15页 |
| 2.2.2 培养方法 | 第15-16页 |
| 2.2.3 7L反应器发酵方法 | 第16页 |
| 2.3 分析方法 | 第16-17页 |
| 2.3.1 细胞浓度的测定 | 第16页 |
| 2.3.2 环葡聚糖含量的测定 | 第16页 |
| 2.3.3 TLC法 | 第16页 |
| 2.3.4 甘露醇含量的测定 | 第16-17页 |
| 2.3.5 谷氨酸含量的测定 | 第17页 |
| 2.3.6 蛋白浓度测定 | 第17页 |
| 2.3.7 发酵颜色测定 | 第17页 |
| 2.4 提取纯化方法 | 第17-19页 |
| 2.4.1 乙醇分级沉淀 | 第17-18页 |
| 2.4.2 HPLC法分离多糖 | 第18-19页 |
| 2.4.3 凝胶色谱法 | 第19页 |
| 2.4.4 SPE制备法 | 第19页 |
| 2.5 多糖结构鉴定方法 | 第19-20页 |
| 2.5.1 MALDI-TOFMS测定方法 | 第19页 |
| 2.5.2 单糖组成分析法 | 第19-20页 |
| 2.5.3 FTIR测定方法 | 第20页 |
| 2.5.4 ESI-CIDMS/MS测定方法 | 第20页 |
| 2.5.5 NMR测定方法 | 第20页 |
| 2.6 关于胞内差异蛋白的二位电泳操作 | 第20-24页 |
| 2.6.1 二维凝胶电泳(2-DE)蛋白样品制备 | 第20-21页 |
| 2.6.2 主要溶液配方 | 第21页 |
| 2.6.3 二维凝胶电泳(2-DE)蛋白样品制备 | 第21-22页 |
| 2.6.4 2-DE操作方法 | 第22-24页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第24-55页 |
| 3.1 环葡聚糖发酵条件的优化 | 第24-33页 |
| 3.1.1 放射型根瘤菌的生长特性 | 第24-25页 |
| 3.1.2 培养基成分的优化 | 第25-28页 |
| 3.1.3 培养条件的优化 | 第28-29页 |
| 3.1.4 Plackett-Burman试验设计 | 第29-30页 |
| 3.1.5 Central Composite Design试验设计 | 第30-33页 |
| 3.1.6 验证实验 | 第33页 |
| 3.2 环葡聚糖发酵过程中发酵颜色控制策略 | 第33-39页 |
| 3.2.1 谷氨酸浓度对细胞浓度和色素形成的影响 | 第33-34页 |
| 3.2.2 摇瓶水平不同氮、碳源补料流加策略对细胞浓度和色素形成的影响 | 第34-35页 |
| 3.2.3 7L生物反应器条件下发酵过程图 | 第35-36页 |
| 3.2.4 pH调控对发酵过程的影响 | 第36-38页 |
| 3.2.5 pH两阶段调控结合溶氧控制策略强化环葡聚糖合成 | 第38-39页 |
| 3.3 发酵多糖的分级提取纯化以及制备 | 第39-43页 |
| 3.3.1 乙醇分级沉淀法 | 第39-40页 |
| 3.3.2 HPLC法分离沉淀 | 第40-41页 |
| 3.3.3 凝胶色谱制备法 | 第41页 |
| 3.3.4 SPE制备法 | 第41-42页 |
| 3.3.5 HPLC法分级制备组分Ⅰ | 第42-43页 |
| 3.4 沉淀2的结构表征 | 第43-50页 |
| 3.4.1 单糖组成分析 | 第43-44页 |
| 3.4.2 MALDI–TOFMS检测组分Ⅰ和组分Ⅱ的分子量 | 第44页 |
| 3.4.3 FTIR鉴定组分Ⅰ和组分Ⅱ的结构 | 第44-45页 |
| 3.4.4 组分Ⅰ的结构鉴定 | 第45-48页 |
| 3.4.5 组分Ⅱ的结构鉴定 | 第48-50页 |
| 3.5 目标多糖的胞外分泌的初探 | 第50-55页 |
| 3.5.1 TLC相对定量分析环葡聚糖 | 第50页 |
| 3.5.2 不同氮源模式对发酵影响的比较 | 第50-53页 |
| 3.5.3 以NaNO_3与谷氨酸为不同氮源发酵的细菌胞内差异蛋白比对 | 第53-55页 |
| 主要结论与展望 | 第55-57页 |
| 主要结论 | 第55页 |
| 展望 | 第55-57页 |
| 致谢 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-63页 |
| 附录：作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第63页 |
