摘要 | 第3-4页 |
Abstract | 第4页 |
第一章 前言 | 第7-17页 |
1.1 DHA概述 | 第7-8页 |
1.1.1 DHA结构 | 第7页 |
1.1.2 DHA生理功能 | 第7-8页 |
1.2 DHA的国内外研究现状 | 第8-13页 |
1.2.1 DHA的来源 | 第8-9页 |
1.2.2 DHA的生产菌株 | 第9-10页 |
1.2.3 DHA的生物合成途径 | 第10-12页 |
1.2.4 培养方式对产油微生物生产DHA的影响 | 第12页 |
1.2.5 DHA的市场前景 | 第12-13页 |
1.3 微生物胞内蛋白提取的研究概况 | 第13-14页 |
1.3.1 微生物细胞破碎方法 | 第13-14页 |
1.3.2 微生物胞内蛋白分离提取 | 第14页 |
1.3.3 产油微生物胞内蛋白分离提取 | 第14页 |
1.4 质谱鉴定技术 | 第14-16页 |
1.4.1 蛋白质组学质谱仪 | 第14-15页 |
1.4.2 肽质量指纹图谱 | 第15-16页 |
1.4.3 质谱未来改进方向 | 第16页 |
1.5 本论文的主要研究内容 | 第16-17页 |
第二章 材料与方法 | 第17-23页 |
2.1 主要试剂 | 第17页 |
2.2 设备与仪器 | 第17页 |
2.3 实验菌株 | 第17页 |
2.4 培养基 | 第17-18页 |
2.5 实验方法 | 第18-23页 |
2.5.1 Schizochytrium sp.S31发酵培养 | 第18页 |
2.5.2 细胞浓度、葡萄糖浓度和氨基氮浓度的测定 | 第18页 |
2.5.3 胞内油脂提取及浓度测定 | 第18-20页 |
2.5.4 呼吸参数的测定及计算 | 第20页 |
2.5.5 胞内蛋白样品的提取方法 | 第20-21页 |
2.5.6 胞内关键酶酶活测定方法 | 第21-22页 |
2.5.7 SDS-PAGE | 第22页 |
2.5.8 质谱鉴定方法 | 第22-23页 |
第三章 结果与讨论 | 第23-39页 |
3.1 Schizochytrium sp.S31生产DHA底物流加策略及呼吸特性分析 | 第23-28页 |
3.1.1 不同碳氮比下的DHA发酵性能比较 | 第23-24页 |
3.1.2 分批补料培养、底物间歇流加条件下的DHA发酵性能 | 第24-26页 |
3.1.3 碳源浓度恒定条件下的DHA发酵性能 | 第26-27页 |
3.1.4 发酵过程中总油脂/生物量和DHA/总油脂变化比较 | 第27页 |
3.1.5 DHA积累与CO2释放相关性分析 | 第27-28页 |
3.2 Schizochytrium sp.S31胞内蛋白提取方法 | 第28-32页 |
3.2.1 细胞破碎方法比较 | 第28-30页 |
3.2.2 蛋白粗提液中脂质的去除 | 第30页 |
3.2.3 不同发酵阶段细胞样品胞内蛋白的提取 | 第30-32页 |
3.3 Schizochytrium sp.S31胞内DHA合成关键酶活性分析 | 第32-34页 |
3.4 Schizochytrium sp.S31胞内蛋白质差异表达研究 | 第34-39页 |
3.4.1 Schizochytrium sp.S31不同发酵阶段蛋白表达差异分析 | 第34-36页 |
3.4.2 差异表达蛋白条带质谱分析 | 第36-39页 |
主要结论与展望 | 第39-40页 |
主要结论 | 第39页 |
展望 | 第39-40页 |
致谢 | 第40-41页 |
参考文献 | 第41-47页 |
附录 | 第47页 |
附录:作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第47页 |