| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 1 引言 | 第10-20页 |
| 1.1 溶菌酶的相关研究 | 第10-15页 |
| 1.2 动物乳腺生物反应器和牛奶人乳化 | 第15-18页 |
| 1.2.1 动物乳腺生物反应器的研究 | 第15-16页 |
| 1.2.2 牛奶人乳化的研究 | 第16-18页 |
| 1.3 本研究的目的、意义及主要内容 | 第18-20页 |
| 2 材料与方法 | 第20-33页 |
| 2.1 实验材料 | 第20-23页 |
| 2.2 实验方法 | 第23-33页 |
| 3 pMarblgprobianhlyts 表达结构转基因小鼠的研究 | 第33-47页 |
| 3.1 pMarblgprobianhlyts 表达结构的构建 | 第33-41页 |
| 3.1.1 构建方案及技术路线 | 第33-34页 |
| 3.1.2 提取含人溶菌酶序列的 pMCSɑs1HLYbghp-neo 质粒 | 第34页 |
| 3.1.3 人溶菌酶序列的 PCR 扩增 | 第34-35页 |
| 3.1.4 人溶菌酶序列的克隆及鉴定 | 第35页 |
| 3.1.5 pMarBLGprobiants 表达载体的构建及鉴定 | 第35-40页 |
| 3.1.6 方向鉴定 | 第40-41页 |
| 3.2 转基因小鼠的制备及鉴定 | 第41-47页 |
| 3.2.1 pMarBLGprobianhlyts 表达结构的酶切回收及检测 | 第41-42页 |
| 3.2.2 显微注射 | 第42页 |
| 3.2.3 PCR 鉴定转基因小鼠 | 第42-43页 |
| 3.2.4 转基因小鼠的遗传检测 | 第43-44页 |
| 3.2.5 Western blot 检测转基因小鼠 | 第44-45页 |
| 3.2.6 转基因小鼠的酶活检测 | 第45-47页 |
| 4 pMarBLGpro2bianhlyts 表达结构转基因小鼠的研究 | 第47-58页 |
| 4.1 pMarBLGpro2bianhlyts 表达结构的构建 | 第47-52页 |
| 4.1.1 构建方案及技术路线 | 第47-48页 |
| 4.1.2 pMarBLGpro2biants 表达载体的构建及鉴定 | 第48-51页 |
| 4.1.3 方向鉴定 | 第51-52页 |
| 4.2 转基因小鼠的制备及鉴定 | 第52-58页 |
| 4.2.1 pMarBLGpro2bianhlyts 表达结构的酶切回收及检测 | 第52-53页 |
| 4.2.2 显微注射 | 第53页 |
| 4.2.3 PCR 鉴定转基因小鼠 | 第53-54页 |
| 4.2.4 转基因小鼠的遗传检测 | 第54-55页 |
| 4.2.5 Western blot 检测转基因小鼠 | 第55-56页 |
| 4.2.6 转基因小鼠的酶活检测 | 第56-58页 |
| 5 讨论 | 第58-60页 |
| 5.1 构建载体时的一些注意事项 | 第58-59页 |
| 5.2 长序列的扩增和连接 | 第59页 |
| 5.3 人溶菌酶的表达 | 第59-60页 |
| 6 结论 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-67页 |
| 作者简历 | 第67-68页 |
| 致谢 | 第68-69页 |
