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嗜热厌氧乙醇杆菌Thermoanaerobacter ethanolicus JW200α-葡萄糖苷酶的研究

摘要第1-4页
Abstract第4-7页
第一章 绪论第7-15页
   ·α-葡萄糖苷酶的简介第7-12页
     ·α-葡萄糖苷酶的来源第7页
     ·α-葡萄糖苷酶的性质第7-8页
     ·α-葡萄糖苷酶的分类第8-11页
     ·嗜热性的α-葡萄糖苷酶第11页
     ·α-葡萄糖苷酶的催化机理与催化位点第11-12页
   ·α-葡萄糖苷酶的研究进展第12-13页
   ·α-葡萄糖苷酶的应用第13-14页
     ·生产低聚异麦芽糖第13页
     ·在啤酒酿造中的应用第13-14页
     ·其它方面的应用第14页
   ·立题背景及研究内容第14-15页
第二章 材料与方法第15-23页
   ·材料第15-16页
     ·菌株与质粒第15页
     ·培养基与溶液第15页
     ·主要试剂第15-16页
     ·主要仪器与设备第16页
   ·方法第16-23页
     ·T. ethanolicus JW200 的培养第16-17页
     ·T. ethanolicus JW200 基因组 DNA 的提取第17页
     ·制备 E. coli 电转化感受态细胞第17页
     ·重组质粒 pHsh-AGL-UD 的构建与测序第17-19页
     ·重组表达质粒 pHsh-AGL 和 pTrc99A-AGL 的构建第19-20页
     ·重组菌α-葡萄糖苷酶的诱导表达及粗酶液的制备第20-21页
     ·重组α-葡萄糖苷酶酶活的测定第21页
     ·重组α-葡萄糖苷酶的纯化第21-22页
     ·HPLC 检测低聚异麦芽糖成分第22页
     ·麦芽糖浓度对转糖苷反应的影响第22-23页
第三章 结果与讨论第23-40页
   ·目的基因 PCR 扩增与基因序列分析第23-25页
   ·重组表达质粒的构建第25-26页
   ·α-葡萄糖苷酶在 E. coli 中的诱导表达第26-27页
   ·诱导条件对重组菌株 E.coli JM109/pTrc99A-AGL 酶表达的影响第27-29页
   ·重组α-葡萄糖苷酶的纯化第29-31页
     ·DEAE-Sephrose Fast Flow 阴离子交换柱层析第29-30页
     ·分子筛层析第30页
     ·重组α-葡萄糖苷酶纯化总进程第30-31页
   ·重组α-葡萄糖苷酶的性质研究第31-35页
     ·α-葡萄糖苷酶最适温度第31-32页
     ·α-葡萄糖苷酶最适 pH 和 pH 稳定性第32页
     ·α-葡萄糖苷酶的热稳定性第32-33页
     ·α-葡萄糖苷酶的底物专一性第33页
     ·金属离子与表面活性剂对重组酶酶活的影响第33-34页
     ·重组α-葡萄糖苷酶米氏常数 Km 的测定第34-35页
   ·重组α-葡萄糖苷酶转化麦芽糖生产低聚异麦芽糖第35-40页
     ·重组酶的最佳转糖苷反应温度第35-36页
     ·10%麦芽糖底物的转糖苷效果第36页
     ·20%麦芽糖底物的转糖苷效果第36-37页
     ·40%麦芽糖底物的转糖苷效果第37-38页
     ·重组酶转糖苷能力的初步分析第38-40页
主要结论第40-41页
致谢第41-42页
参考文献第42-48页
附录:作者在攻读硕士学位期间发表的论文第48页

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