摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-7页 |
第一章 绪论 | 第7-15页 |
·α-葡萄糖苷酶的简介 | 第7-12页 |
·α-葡萄糖苷酶的来源 | 第7页 |
·α-葡萄糖苷酶的性质 | 第7-8页 |
·α-葡萄糖苷酶的分类 | 第8-11页 |
·嗜热性的α-葡萄糖苷酶 | 第11页 |
·α-葡萄糖苷酶的催化机理与催化位点 | 第11-12页 |
·α-葡萄糖苷酶的研究进展 | 第12-13页 |
·α-葡萄糖苷酶的应用 | 第13-14页 |
·生产低聚异麦芽糖 | 第13页 |
·在啤酒酿造中的应用 | 第13-14页 |
·其它方面的应用 | 第14页 |
·立题背景及研究内容 | 第14-15页 |
第二章 材料与方法 | 第15-23页 |
·材料 | 第15-16页 |
·菌株与质粒 | 第15页 |
·培养基与溶液 | 第15页 |
·主要试剂 | 第15-16页 |
·主要仪器与设备 | 第16页 |
·方法 | 第16-23页 |
·T. ethanolicus JW200 的培养 | 第16-17页 |
·T. ethanolicus JW200 基因组 DNA 的提取 | 第17页 |
·制备 E. coli 电转化感受态细胞 | 第17页 |
·重组质粒 pHsh-AGL-UD 的构建与测序 | 第17-19页 |
·重组表达质粒 pHsh-AGL 和 pTrc99A-AGL 的构建 | 第19-20页 |
·重组菌α-葡萄糖苷酶的诱导表达及粗酶液的制备 | 第20-21页 |
·重组α-葡萄糖苷酶酶活的测定 | 第21页 |
·重组α-葡萄糖苷酶的纯化 | 第21-22页 |
·HPLC 检测低聚异麦芽糖成分 | 第22页 |
·麦芽糖浓度对转糖苷反应的影响 | 第22-23页 |
第三章 结果与讨论 | 第23-40页 |
·目的基因 PCR 扩增与基因序列分析 | 第23-25页 |
·重组表达质粒的构建 | 第25-26页 |
·α-葡萄糖苷酶在 E. coli 中的诱导表达 | 第26-27页 |
·诱导条件对重组菌株 E.coli JM109/pTrc99A-AGL 酶表达的影响 | 第27-29页 |
·重组α-葡萄糖苷酶的纯化 | 第29-31页 |
·DEAE-Sephrose Fast Flow 阴离子交换柱层析 | 第29-30页 |
·分子筛层析 | 第30页 |
·重组α-葡萄糖苷酶纯化总进程 | 第30-31页 |
·重组α-葡萄糖苷酶的性质研究 | 第31-35页 |
·α-葡萄糖苷酶最适温度 | 第31-32页 |
·α-葡萄糖苷酶最适 pH 和 pH 稳定性 | 第32页 |
·α-葡萄糖苷酶的热稳定性 | 第32-33页 |
·α-葡萄糖苷酶的底物专一性 | 第33页 |
·金属离子与表面活性剂对重组酶酶活的影响 | 第33-34页 |
·重组α-葡萄糖苷酶米氏常数 Km 的测定 | 第34-35页 |
·重组α-葡萄糖苷酶转化麦芽糖生产低聚异麦芽糖 | 第35-40页 |
·重组酶的最佳转糖苷反应温度 | 第35-36页 |
·10%麦芽糖底物的转糖苷效果 | 第36页 |
·20%麦芽糖底物的转糖苷效果 | 第36-37页 |
·40%麦芽糖底物的转糖苷效果 | 第37-38页 |
·重组酶转糖苷能力的初步分析 | 第38-40页 |
主要结论 | 第40-41页 |
致谢 | 第41-42页 |
参考文献 | 第42-48页 |
附录:作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第48页 |