| 致谢 | 第3-4页 |
| 摘要 | 第4-5页 |
| abstract | 第5-6页 |
| 前言 | 第9-10页 |
| 第一章 绪论 | 第10-19页 |
| 1.1 黄酮类化合物简介 | 第10-11页 |
| 1.1.1 黄酮类化合物结构及生物活性 | 第10页 |
| 1.1.2 生物法合成的黄酮类化合物 | 第10-11页 |
| 1.2 生松素简介 | 第11-12页 |
| 1.2.1 生松素的结构与天然来源 | 第11页 |
| 1.2.2 生松素的性质与功能 | 第11-12页 |
| 1.3 生松素的制备合成研究现状 | 第12-15页 |
| 1.3.1 生松素的生产方式 | 第12页 |
| 1.3.2 生物法合成生松素 | 第12-15页 |
| 1.4 生物法合成生松素的现状和趋势 | 第15-17页 |
| 1.4.1 生物法合成生松素的途径构建 | 第15-16页 |
| 1.4.2 生物法合成生松素的辅因子调控 | 第16-17页 |
| 1.4.3 生物法合成生松素的发酵控制 | 第17页 |
| 1.5 研究目的和研究内容 | 第17-19页 |
| 第二章 单菌发酵合成生松素的菌株构建及发酵条件研究 | 第19-36页 |
| 2.1 前言 | 第19页 |
| 2.2 材料 | 第19-22页 |
| 2.2.1 菌株和质粒 | 第19-20页 |
| 2.2.2 培养基 | 第20-21页 |
| 2.2.3 仪器和设备 | 第21页 |
| 2.2.4 试剂 | 第21-22页 |
| 2.2.5 相关引物 | 第22页 |
| 2.3 实验方法 | 第22-26页 |
| 2.3.1 从头合成生松素途径的菌株构建 | 第22-25页 |
| 2.3.2 菌株培养条件 | 第25-26页 |
| 2.3.3 分析方法 | 第26页 |
| 2.4 结果与讨论 | 第26-35页 |
| 2.4.1 从头合成生松素途径的菌株构建 | 第26-33页 |
| 2.4.2 重组菌株E.coliphe03利用葡萄糖发酵产生松素条件优化 | 第33-35页 |
| 2.5 本章小结 | 第35-36页 |
| 第三章 混菌发酵合成生松素的菌株构建及过程耦合 | 第36-48页 |
| 3.1 前言 | 第36页 |
| 3.2 材料 | 第36-38页 |
| 3.2.1 菌株和质粒 | 第36-37页 |
| 3.2.2 培养基 | 第37页 |
| 3.2.3 相关引物 | 第37页 |
| 3.2.4 产物检测方法 | 第37-38页 |
| 3.3 实验方法 | 第38页 |
| 3.3.1 苯丙氨酸至生松素模块途径构建和重组菌株E.coliBL4的构建 | 第38页 |
| 3.3.2 肉桂酸至生松素模块途径构建和重组菌株E.coliBL3的构建 | 第38页 |
| 3.3.3 菌株培养条件 | 第38页 |
| 3.4 结果与讨论 | 第38-47页 |
| 3.4.1 苯丙氨酸至生松素模块途径构建及生松素制备 | 第38-42页 |
| 3.4.2 肉桂酸至生松素模块途径构建及生松素制备 | 第42-44页 |
| 3.4.3 以葡萄糖为底物混菌发酵生产生松素的过程耦合 | 第44-47页 |
| 3.5 本章小结 | 第47-48页 |
| 第四章 改造丙二酰辅酶A途径强化生松素合成 | 第48-59页 |
| 4.1 前言 | 第48页 |
| 4.2 材料 | 第48-49页 |
| 4.2.1 菌株和质粒 | 第48-49页 |
| 4.2.2 培养基 | 第49页 |
| 4.2.3 分子生物学操作 | 第49页 |
| 4.2.4 菌株培养条件 | 第49页 |
| 4.2.5 产物检测方法 | 第49页 |
| 4.3 实验方法 | 第49-52页 |
| 4.3.1 RNA的提取 | 第49-50页 |
| 4.3.2 gDNA的去除和cDNA的合成 | 第50-51页 |
| 4.3.3 普通PCR实验 | 第51页 |
| 4.3.4 qPCR反应 | 第51-52页 |
| 4.4 结果与讨论 | 第52-58页 |
| 4.4.1 外源添加浅蓝菌素对生松素合成的影响 | 第52-55页 |
| 4.4.2 重组菌株E.coliBL32的构建及其发酵 | 第55-56页 |
| 4.4.3 MatB和MatC的过表达对生松素合成途径基因的影响 | 第56-58页 |
| 4.5 本章小结 | 第58-59页 |
| 第五章 结论与展望 | 第59-61页 |
| 5.1 主要结论 | 第59-60页 |
| 5.2 展望 | 第60-61页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-68页 |
