| 摘要 | 第6-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第17-34页 |
| 1.1 食物过敏概述 | 第17-24页 |
| 1.1.1 超敏反应的分类及特点 | 第17-18页 |
| 1.1.2 食物过敏反应及其机制 | 第18-19页 |
| 1.1.3 食物过敏原 | 第19-21页 |
| 1.1.3.1 主要的动物性食物过敏原 | 第20页 |
| 1.1.3.2 主要的植物性食物过敏原 | 第20-21页 |
| 1.1.3.3 转基因食品以及食品添加剂 | 第21页 |
| 1.1.4 国内外食物过敏现状 | 第21-22页 |
| 1.1.5 国内外食物过敏安全管理及致敏标识现状 | 第22-24页 |
| 1.2 大豆致敏蛋白的种类及危害 | 第24-27页 |
| 1.2.1 Glycinin | 第25-26页 |
| 1.2.2 β-conglycinin | 第26页 |
| 1.2.3 大豆致敏蛋白的危害 | 第26-27页 |
| 1.3 大豆致敏蛋白检测技术研究进展 | 第27-31页 |
| 1.3.1 色谱和质谱分析法 | 第28页 |
| 1.3.2 聚合酶链式反应法 | 第28-29页 |
| 1.3.3 免疫印迹试验 | 第29页 |
| 1.3.4 放射或酶联过敏原吸附抑制试验 | 第29-30页 |
| 1.3.5 酶联免疫吸附试验 | 第30-31页 |
| 1.4 本研究的目的及意义 | 第31-32页 |
| 1.5 本研究的主要内容和技术路线 | 第32-34页 |
| 1.5.1 本研究的主要内容 | 第32-33页 |
| 1.5.2 本研究的技术路线 | 第33-34页 |
| 第二章 Glycinin和 β-conglycinin兔源多克隆抗体的制备及其免疫学特性鉴定 | 第34-46页 |
| 2.1 材料和仪器 | 第34-36页 |
| 2.1.1 试剂 | 第34-35页 |
| 2.1.2 溶液 | 第35-36页 |
| 2.1.3 实验动物 | 第36页 |
| 2.1.4 仪器设备 | 第36页 |
| 2.2 方法 | 第36-40页 |
| 2.2.1 等电点沉淀法分离glycinin和 β-conglycinin | 第36-37页 |
| 2.2.2 Glycinin和 β-conglycinin的纯度分析 | 第37页 |
| 2.2.3 Glycinin和 β-conglycinin兔源p Ab的制备 | 第37-38页 |
| 2.2.3.1 动物免疫程序 | 第37-38页 |
| 2.2.3.2 动物采血方法 | 第38页 |
| 2.2.3.3 兔源p Ab的纯化 | 第38页 |
| 2.2.4 Glycinin和 β-conglycinin兔源p Ab的免疫学特性鉴定 | 第38-40页 |
| 2.2.4.1 间接ELISA测定兔源p Ab效价 | 第39页 |
| 2.2.4.2 间接竞争ELISA鉴定兔源p Ab敏感性 | 第39页 |
| 2.2.4.3 兔源p Ab特异性鉴定 | 第39-40页 |
| 2.3 结果与分析 | 第40-43页 |
| 2.3.1 Glycinin和 β-conglycinin的分离与纯度分析 | 第40页 |
| 2.3.2 Glycinin和 β-conglycinin兔源p Ab效价 | 第40-41页 |
| 2.3.3 Glycinin和 β-conglycinin兔源p Ab敏感性 | 第41-42页 |
| 2.3.4 Glycinin和 β-conglycinin兔源p Ab特异性 | 第42-43页 |
| 2.4 讨论 | 第43-45页 |
| 2.4.1 关于glycinin和 β-conglycinin分离与鉴定 | 第43-44页 |
| 2.4.2 关于免疫原的制备以及免疫方式的选择 | 第44页 |
| 2.4.3 关于glycinin和 β-conglycinin兔源p Ab的免疫学特性鉴定 | 第44-45页 |
| 2.5 小结 | 第45-46页 |
| 第三章 Glycinin和 β-conglycinin鼠源单克隆抗体的制备及其免疫学特性鉴定 | 第46-69页 |
| 3.1 材料和仪器 | 第46-48页 |
| 3.1.1 试剂 | 第46-47页 |
| 3.1.2 溶液 | 第47-48页 |
| 3.1.3 实验动物与骨髓瘤细胞 | 第48页 |
| 3.1.4 仪器设备 | 第48页 |
| 3.2 方法 | 第48-54页 |
| 3.2.1 Glycinin和 β-conglycinin鼠源多克隆抗血清的制备 | 第48-49页 |
| 3.2.2 Glycinin和 β-conglycinin鼠源多克隆抗血清的免疫学特性鉴定 | 第49页 |
| 3.2.2.1 多克隆抗血清的效价测定 | 第49页 |
| 3.2.2.2 多克隆抗血清的敏感性鉴定 | 第49页 |
| 3.2.3 Glycinin和 β-conglycinin鼠源m Ab杂交瘤细胞株的建立 | 第49-52页 |
| 3.2.3.1 细胞融合所用小鼠的选择与超免 | 第49-50页 |
| 3.2.3.2 小鼠NS0骨髓瘤细胞的培养 | 第50页 |
| 3.2.3.3 小鼠脾细胞的分离 | 第50页 |
| 3.2.3.4 细胞融合过程及细胞培养 | 第50-51页 |
| 3.2.3.5 饲养细胞（腹腔巨噬细胞）的制备 | 第51页 |
| 3.2.3.6 杂交瘤细胞阳性孔的筛选和克隆 | 第51-52页 |
| 3.2.4 Glycinin和 β-conglycinin鼠源m Ab的大量制备 | 第52页 |
| 3.2.5 Glycinin和 β-conglycinin鼠源m Ab的免疫学特性鉴定 | 第52-54页 |
| 3.2.5.1 亚型鉴定 | 第52-53页 |
| 3.2.5.2 效价测定 | 第53页 |
| 3.2.5.3 敏感性鉴定 | 第53页 |
| 3.2.5.4 亲和常数测定 | 第53页 |
| 3.2.5.5 特异性鉴定 | 第53-54页 |
| 3.3 结果与分析 | 第54-65页 |
| 3.3.1 Glycinin和 β-conglycinin鼠源多抗血清效价测定 | 第54-55页 |
| 3.3.2 Glycinin和 β-conglycinin鼠源多克隆抗血清敏感性鉴定 | 第55-56页 |
| 3.3.3 Glycinin和 β-conglycinin鼠源m Ab杂交瘤细胞株的建立 | 第56-58页 |
| 3.3.4 Glycinin鼠源m Ab的免疫学特性鉴定 | 第58-61页 |
| 3.3.4.1 Glycinin鼠源m Ab亚型 | 第58-59页 |
| 3.3.4.2 Glycinin鼠源m Ab效价 | 第59页 |
| 3.3.4.3 Glycinin鼠源m Ab敏感性 | 第59-60页 |
| 3.3.4.4 Glycinin鼠源m Ab亲和常数 | 第60页 |
| 3.3.4.5 Glycinin鼠源m Ab特异性 | 第60-61页 |
| 3.3.5 β-conglycinin鼠源m Ab的免疫学特性鉴定 | 第61-65页 |
| 3.3.5.1 β-conglycinin鼠源m Ab的亚型 | 第61-62页 |
| 3.3.5.2 β-conglycinin鼠源m Ab效价 | 第62页 |
| 3.3.5.3 β-conglycinin鼠源m Ab敏感性 | 第62-63页 |
| 3.3.5.4 β-conglycinin鼠源m Ab亲和常数 | 第63-64页 |
| 3.3.5.5 β-conglycinin鼠源m Ab特异性 | 第64-65页 |
| 3.4 讨论 | 第65-68页 |
| 3.4.1 关于BALB/c小鼠的免疫及融合前超免 | 第65-66页 |
| 3.4.2 关于细胞融合过程及阳性杂交瘤细胞筛选 | 第66-67页 |
| 3.4.3 关于glycinin和 β-conglycinin鼠源m Ab的大量制备 | 第67页 |
| 3.4.4 关于glycinin和 β-conglycinin鼠源m Ab的免疫学特性鉴定 | 第67-68页 |
| 3.5 小结 | 第68-69页 |
| 第四章 双抗体夹心ELISA检测试剂盒的研制及其特性鉴定 | 第69-83页 |
| 4.1 材料和仪器 | 第69-70页 |
| 4.1.1 试剂 | 第69页 |
| 4.1.2 溶液 | 第69-70页 |
| 4.1.3 仪器设备 | 第70页 |
| 4.2 方法 | 第70-72页 |
| 4.2.1 Glycinin和 β-conglycinin双抗体夹心ELISA检测方法的建立 | 第70-71页 |
| 4.2.1.1 双抗体夹心ELISA检测方法基本操作步骤 | 第70页 |
| 4.2.1.2 捕获抗体包被浓度以及检测抗体工作浓度的优化 | 第70-71页 |
| 4.2.1.3 样品与捕获抗体反应时间的优化 | 第71页 |
| 4.2.2 双抗体夹心ELISA检测试剂盒的装配 | 第71页 |
| 4.2.3 双抗体夹心ELISA检测试剂盒标准曲线的绘制与结果判定 | 第71页 |
| 4.2.4 双抗体夹心ELISA检测试剂盒的特性鉴定 | 第71-72页 |
| 4.2.4.1 检测限鉴定 | 第71-72页 |
| 4.2.4.2 准确度和精密度鉴定 | 第72页 |
| 4.2.4.3 特异性鉴定 | 第72页 |
| 4.2.4.4 稳定性鉴定 | 第72页 |
| 4.3 结果与分析 | 第72-78页 |
| 4.3.1 双抗体夹心ELISA检测方法的建立 | 第72-74页 |
| 4.3.1.1 捕获抗体包被浓度以及检测抗体工作浓度的确定 | 第72-73页 |
| 4.3.1.2 样品与捕获抗体的反应时间 | 第73-74页 |
| 4.3.2 双抗体夹心ELISA检测试剂盒的检测流程 | 第74-75页 |
| 4.3.3 双抗体夹心ELISA检测试剂盒的标准曲线 | 第75页 |
| 4.3.4 双抗体夹心ELISA检测试剂盒的特性鉴定结果 | 第75-78页 |
| 4.3.4.1 检测限 | 第75-76页 |
| 4.3.4.2 准确度和精密度 | 第76-77页 |
| 4.3.4.3 特异性 | 第77-78页 |
| 4.3.4.4 稳定性 | 第78页 |
| 4.4 讨论 | 第78-81页 |
| 4.4.1 关于ELISA检测试剂盒的模式选择 | 第78-79页 |
| 4.4.2 关于捕获抗体和检测抗体的选择和优化 | 第79-80页 |
| 4.4.3 关于试剂盒的显色系统 | 第80-81页 |
| 4.4.4 关于试剂盒的特性鉴定 | 第81页 |
| 4.5 小结 | 第81-83页 |
| 第五章 胶体金免疫层析快速检测试纸的研制及其特性鉴定 | 第83-103页 |
| 5.1 材料和仪器 | 第83-85页 |
| 5.1.1 试剂材料 | 第83-84页 |
| 5.1.2 溶液 | 第84页 |
| 5.1.3 仪器设备 | 第84-85页 |
| 5.2 方法 | 第85-90页 |
| 5.2.1 胶体金纳米颗粒的制备 | 第85页 |
| 5.2.2 胶体金纳米颗粒的特性鉴定 | 第85-86页 |
| 5.2.2.1 裸眼观察 | 第85页 |
| 5.2.2.2 分光光度法 | 第85页 |
| 5.2.2.3 透射电镜扫描法 | 第85-86页 |
| 5.2.3 胶体金标记m Ab的制备 | 第86页 |
| 5.2.3.1 待标记m Ab的前处理 | 第86页 |
| 5.2.3.2 待标记m Ab最佳标记量的确定 | 第86页 |
| 5.2.3.3 胶体金标记m Ab | 第86页 |
| 5.2.4 结合垫的制备 | 第86-87页 |
| 5.2.5 样品垫与吸水垫的制备 | 第87页 |
| 5.2.6 NC膜的制备 | 第87页 |
| 5.2.7 胶体金免疫层析试纸的装配 | 第87-88页 |
| 5.2.8 胶体金免疫层析试纸的检测原理 | 第88页 |
| 5.2.9 胶体金免疫层析试纸检测方法的建立 | 第88-89页 |
| 5.2.9.1 目测半定量检测方法 | 第88-89页 |
| 5.2.9.2 读条仪机读定量检测方法 | 第89页 |
| 5.2.10胶体金免疫层析试纸的性能鉴定 | 第89-90页 |
| 5.2.10.1 检测限鉴定 | 第89页 |
| 5.2.10.2 准确度鉴定 | 第89-90页 |
| 5.2.10.3 特异性鉴定 | 第90页 |
| 5.2.10.4 重复性和稳定性鉴定 | 第90页 |
| 5.3 结果与分析 | 第90-98页 |
| 5.3.1 胶体金纳米颗粒的特性 | 第90-91页 |
| 5.3.2 待标记m Ab的最佳标记量 | 第91-92页 |
| 5.3.3 胶体金免疫层析试纸性能鉴定结果 | 第92-98页 |
| 5.3.3.1 目测半定量检测限 | 第92-93页 |
| 5.3.3.2 机读定量检测限 | 第93-96页 |
| 5.3.3.3 准确度 | 第96-97页 |
| 5.3.3.4 特异性 | 第97页 |
| 5.3.3.5 重复性和稳定性 | 第97-98页 |
| 5.4 讨论 | 第98-102页 |
| 5.4.1 关于制备胶体金纳米颗粒的注意事项 | 第98-99页 |
| 5.4.2 关于胶体金纳米颗粒的粒径大小 | 第99-100页 |
| 5.4.3 关于胶体金纳米颗粒标记m Ab的制备 | 第100页 |
| 5.4.4 关于NC膜的选择 | 第100-101页 |
| 5.4.5 关于试纸检测原理及其检测模式选择 | 第101页 |
| 5.4.6 关于试纸的特性鉴定 | 第101-102页 |
| 5.5 小结 | 第102-103页 |
| 第六章 结论、创新点及展望 | 第103-105页 |
| 6.1 研究结论 | 第103页 |
| 6.2 创新点 | 第103-104页 |
| 6.3 展望 | 第104-105页 |
| 参考文献 | 第105-114页 |
| 缩略词 | 第114-117页 |
| 致谢 | 第117-119页 |
| 作者简介 | 第119-120页 |
