摘要 | 第4-5页 |
ABSTRACT | 第5页 |
1 前言 | 第9-18页 |
1.1 玉米赤霉烯酮概述 | 第9-13页 |
1.1.1 玉米赤霉烯酮的理化性质 | 第9页 |
1.1.2 玉米赤霉烯酮的毒性 | 第9页 |
1.1.3 玉米赤霉烯酮的污染与食品安全 | 第9-10页 |
1.1.4 玉米赤霉烯酮的限量 | 第10页 |
1.1.5 玉米赤霉烯酮的研究进展 | 第10-13页 |
1.2 单克隆抗体技术 | 第13-14页 |
1.2.1 单克隆抗体技术及其创新 | 第13-14页 |
1.2.2 单克隆抗体的应用 | 第14页 |
1.3 上转换标记免疫层析检测技术 | 第14-16页 |
1.3.1 免疫层析技术 | 第14-15页 |
1.3.2 上转换荧光材料 | 第15-16页 |
1.3.3 上转换标记免疫层析技术 | 第16页 |
1.4 论文研究的目的及意义 | 第16-17页 |
1.5 论文研究内容 | 第17-18页 |
2 材料与方法 | 第18-32页 |
2.1 实验材料 | 第18-22页 |
2.1.1 药品及试剂 | 第18-19页 |
2.1.2 主要仪器及设备 | 第19-20页 |
2.1.3 实验动物和细胞 | 第20页 |
2.1.4 常用溶液的配制 | 第20-22页 |
2.2 实验方法 | 第22-32页 |
2.2.1 玉米赤霉烯酮完全抗原的合成 | 第22-23页 |
2.2.2 玉米赤霉烯酮单克隆抗体的制备 | 第23-26页 |
2.2.3 基于单克隆抗体的玉米赤霉烯酮间接竞争ELISA的建立 | 第26-27页 |
2.2.4 基于单克隆抗体的玉米赤霉烯酮直接竞争ELISA的建立 | 第27-28页 |
2.2.5 实际样品的检测 | 第28页 |
2.2.6 仪器分析法确证 | 第28-29页 |
2.2.7 上转换荧光标记免疫层析试纸条方法的建立 | 第29-31页 |
2.2.8 上转换荧光标记免疫层析试纸条检出限的确定 | 第31页 |
2.2.9 上转换荧光标记免疫层析试纸条特异性的确定 | 第31页 |
2.2.10 上转换荧光标记免疫层析试纸条实际样品的检测 | 第31页 |
2.2.11 上转换荧光标记免疫层析试纸条稳定性实验 | 第31-32页 |
3 结果与讨论 | 第32-47页 |
3.1 玉米赤霉烯酮半抗原的表征 | 第32页 |
3.2 玉米赤霉烯酮免疫原及包被原的合成及表征 | 第32-33页 |
3.3 抗体制备 | 第33-35页 |
3.3.1 小鼠抗血清测定结果 | 第33-34页 |
3.3.2 细胞融合与筛选 | 第34页 |
3.3.3 腹水纯化及亚型鉴定 | 第34-35页 |
3.4 基于单克隆抗体的玉米赤霉烯酮间接竞争ELISA的建立 | 第35-38页 |
3.4.1 包被抗原和抗体稀释倍数的优化 | 第35页 |
3.4.2 封闭液的优化 | 第35-36页 |
3.4.3 标准品与抗体稀释液pH的优化 | 第36页 |
3.4.4 甲醇对间接竞争ELISA反应的影响 | 第36-37页 |
3.4.5 间接竞争ELISA标准曲线 | 第37页 |
3.4.6 方法特异性的测定 | 第37-38页 |
3.5 基于单克隆抗体的玉米赤霉烯酮直接竞争ELISA的建立 | 第38-40页 |
3.5.1 抗体和酶标抗原稀释倍数的优化 | 第38页 |
3.5.2 封闭液的优化 | 第38页 |
3.5.3 标准品与酶标抗原稀释液pH的优化 | 第38-39页 |
3.5.4 直接竞争ELISA标准曲线 | 第39页 |
3.5.5 方法特异性的测定 | 第39-40页 |
3.6 样品处理及添加回收实验 | 第40页 |
3.7 仪器分析方法确证 | 第40-41页 |
3.7.1 HPLC-MS/MS标准曲线的建立 | 第40-41页 |
3.7.2 添加回收率的测定 | 第41页 |
3.8 上转换荧光标记免疫层析方法的建立 | 第41-47页 |
3.8.1 上转换荧光材料特性鉴定结果 | 第41-43页 |
3.8.2 上转换荧光材料与抗体偶联比例的优化 | 第43页 |
3.8.3 上转换荧光标记免疫层析试纸条工作条件的优化 | 第43-44页 |
3.8.4 上转换荧光标记免疫层析试纸条的检出限 | 第44-45页 |
3.8.5 上转换荧光标记免疫层析试纸条的特异性 | 第45页 |
3.8.6 上转换荧光标记免疫层析试纸条实际样品的测定 | 第45-46页 |
3.8.7 上转换荧光标记免疫层析试纸条的稳定性 | 第46-47页 |
4 结论 | 第47-48页 |
5 展望 | 第48-49页 |
6 参考文献 | 第49-56页 |
7 攻读硕士学位期间发表论文情况 | 第56-57页 |
8 致谢 | 第57页 |