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基于单克隆抗体的玉米赤霉烯酮检测方法研究

摘要第4-5页
ABSTRACT第5页
1 前言第9-18页
    1.1 玉米赤霉烯酮概述第9-13页
        1.1.1 玉米赤霉烯酮的理化性质第9页
        1.1.2 玉米赤霉烯酮的毒性第9页
        1.1.3 玉米赤霉烯酮的污染与食品安全第9-10页
        1.1.4 玉米赤霉烯酮的限量第10页
        1.1.5 玉米赤霉烯酮的研究进展第10-13页
    1.2 单克隆抗体技术第13-14页
        1.2.1 单克隆抗体技术及其创新第13-14页
        1.2.2 单克隆抗体的应用第14页
    1.3 上转换标记免疫层析检测技术第14-16页
        1.3.1 免疫层析技术第14-15页
        1.3.2 上转换荧光材料第15-16页
        1.3.3 上转换标记免疫层析技术第16页
    1.4 论文研究的目的及意义第16-17页
    1.5 论文研究内容第17-18页
2 材料与方法第18-32页
    2.1 实验材料第18-22页
        2.1.1 药品及试剂第18-19页
        2.1.2 主要仪器及设备第19-20页
        2.1.3 实验动物和细胞第20页
        2.1.4 常用溶液的配制第20-22页
    2.2 实验方法第22-32页
        2.2.1 玉米赤霉烯酮完全抗原的合成第22-23页
        2.2.2 玉米赤霉烯酮单克隆抗体的制备第23-26页
        2.2.3 基于单克隆抗体的玉米赤霉烯酮间接竞争ELISA的建立第26-27页
        2.2.4 基于单克隆抗体的玉米赤霉烯酮直接竞争ELISA的建立第27-28页
        2.2.5 实际样品的检测第28页
        2.2.6 仪器分析法确证第28-29页
        2.2.7 上转换荧光标记免疫层析试纸条方法的建立第29-31页
        2.2.8 上转换荧光标记免疫层析试纸条检出限的确定第31页
        2.2.9 上转换荧光标记免疫层析试纸条特异性的确定第31页
        2.2.10 上转换荧光标记免疫层析试纸条实际样品的检测第31页
        2.2.11 上转换荧光标记免疫层析试纸条稳定性实验第31-32页
3 结果与讨论第32-47页
    3.1 玉米赤霉烯酮半抗原的表征第32页
    3.2 玉米赤霉烯酮免疫原及包被原的合成及表征第32-33页
    3.3 抗体制备第33-35页
        3.3.1 小鼠抗血清测定结果第33-34页
        3.3.2 细胞融合与筛选第34页
        3.3.3 腹水纯化及亚型鉴定第34-35页
    3.4 基于单克隆抗体的玉米赤霉烯酮间接竞争ELISA的建立第35-38页
        3.4.1 包被抗原和抗体稀释倍数的优化第35页
        3.4.2 封闭液的优化第35-36页
        3.4.3 标准品与抗体稀释液pH的优化第36页
        3.4.4 甲醇对间接竞争ELISA反应的影响第36-37页
        3.4.5 间接竞争ELISA标准曲线第37页
        3.4.6 方法特异性的测定第37-38页
    3.5 基于单克隆抗体的玉米赤霉烯酮直接竞争ELISA的建立第38-40页
        3.5.1 抗体和酶标抗原稀释倍数的优化第38页
        3.5.2 封闭液的优化第38页
        3.5.3 标准品与酶标抗原稀释液pH的优化第38-39页
        3.5.4 直接竞争ELISA标准曲线第39页
        3.5.5 方法特异性的测定第39-40页
    3.6 样品处理及添加回收实验第40页
    3.7 仪器分析方法确证第40-41页
        3.7.1 HPLC-MS/MS标准曲线的建立第40-41页
        3.7.2 添加回收率的测定第41页
    3.8 上转换荧光标记免疫层析方法的建立第41-47页
        3.8.1 上转换荧光材料特性鉴定结果第41-43页
        3.8.2 上转换荧光材料与抗体偶联比例的优化第43页
        3.8.3 上转换荧光标记免疫层析试纸条工作条件的优化第43-44页
        3.8.4 上转换荧光标记免疫层析试纸条的检出限第44-45页
        3.8.5 上转换荧光标记免疫层析试纸条的特异性第45页
        3.8.6 上转换荧光标记免疫层析试纸条实际样品的测定第45-46页
        3.8.7 上转换荧光标记免疫层析试纸条的稳定性第46-47页
4 结论第47-48页
5 展望第48-49页
6 参考文献第49-56页
7 攻读硕士学位期间发表论文情况第56-57页
8 致谢第57页

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