| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-10页 |
| 1 前言 | 第10-22页 |
| ·中性蛋白酶研究概述 | 第10-13页 |
| ·中性蛋白酶的来源 | 第10页 |
| ·中性蛋白酶的性质 | 第10-11页 |
| ·中性蛋白酶的应用 | 第11-13页 |
| ·中性蛋白酶的生产 | 第13-16页 |
| ·发酵菌种改造 | 第13-14页 |
| ·发酵条件优化 | 第14-16页 |
| ·代谢组学研究 | 第16-20页 |
| ·代谢组学概述 | 第16-17页 |
| ·代谢组学的分析方法 | 第17-19页 |
| ·微生物代谢组学研究样品前处理的方法 | 第19-20页 |
| ·本课题研究意义与研究内容 | 第20-22页 |
| ·本课题研究意义 | 第20-21页 |
| ·本课题的研究内容 | 第21-22页 |
| 2 材料与方法 | 第22-32页 |
| ·材料 | 第22-26页 |
| ·菌种 | 第22页 |
| ·培养基 | 第22页 |
| ·试剂 | 第22-23页 |
| ·仪器 | 第23-24页 |
| ·溶液 | 第24-26页 |
| ·数据分析软件 | 第26页 |
| ·实验方法 | 第26-32页 |
| ·枯草芽胞杆菌代谢组样品前处理方法的比较 | 第26-28页 |
| ·GC-MS分析 | 第28页 |
| ·代谢物鉴定、定量和统计学分析 | 第28-29页 |
| ·分析方法重复性的考察 | 第29页 |
| ·中性蛋白酶酶活力的测定 | 第29-30页 |
| ·菌体生长曲线的测定 | 第30页 |
| ·LB培养基摇瓶清液发酵产中性蛋白酶 | 第30页 |
| ·工业培养基发酵罐发酵产中性蛋白酶 | 第30-31页 |
| ·胞内样品的制备和代谢组分析 | 第31页 |
| ·胞外样品的制备和代谢组分析 | 第31页 |
| ·摇瓶发酵验证实验 | 第31-32页 |
| 3 结果与讨论 | 第32-62页 |
| ·枯草芽胞杆菌代谢组分析方法的建立 | 第32-42页 |
| ·不同淬灭剂效果的比较 | 第33-36页 |
| ·不同细胞破碎方法效果的比较 | 第36-38页 |
| ·衍生时间对代谢物分析结果的影响 | 第38-39页 |
| ·枯草芽胞杆菌代谢组学分析方法的确定 | 第39-40页 |
| ·分析方法重复性的考察 | 第40-42页 |
| ·小结 | 第42页 |
| ·LB培养基摇瓶发酵产中性蛋白酶过程的分析 | 第42-50页 |
| ·发酵过程细胞生长量的变化 | 第43页 |
| ·发酵过程中酶活力的动态变化 | 第43页 |
| ·发酵过程中胞内代谢物的动态变化分析 | 第43-46页 |
| ·发酵过程中胞外代谢物的动态变化分析 | 第46-50页 |
| ·小结 | 第50页 |
| ·工业培养基发酵生产中性蛋白酶过程中代谢物动态变化研究 | 第50-56页 |
| ·发酵过程细胞生长曲线的测定 | 第50页 |
| ·发酵过程酶活力变化的测定 | 第50-51页 |
| ·发酵过程中胞内代谢物的动态变化分析 | 第51页 |
| ·发酵过程中胞外代谢物的动态变化分析 | 第51-55页 |
| ·小结 | 第55-56页 |
| ·发酵过程中氨基酸供需平衡性的分析及发酵验证 | 第56-62页 |
| ·发酵过程中氨基酸供需平衡性的分析 | 第56-57页 |
| ·赖氨酸的添加对中性蛋白酶发酵产酶活性的影响 | 第57-59页 |
| ·蛋氨酸的添加对中性蛋白酶发酵产酶活力的影响 | 第59-60页 |
| ·组氨酸的添加对中性蛋白酶发酵产酶活力的影响 | 第60页 |
| ·谷氨酸的添加对中性蛋白酶发酵产酶活性的影响 | 第60-61页 |
| ·小结 | 第61-62页 |
| 4 结论 | 第62-63页 |
| 5 展望 | 第63-64页 |
| 6 参考文献 | 第64-70页 |
| 7 攻读硕士学位期间论文发表情况 | 第70-71页 |
| 8 致谢 | 第71页 |