一株高效利用木糖产D-乳酸大肠杆菌工程菌的构建及其发酵研究
| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 目录 | 第7-11页 |
| 第1章 前言 | 第11-22页 |
| ·D-乳酸的理化性质、用途 | 第11-12页 |
| ·乳酸的理化性质 | 第11-12页 |
| ·D-乳酸的用途 | 第12页 |
| ·D-乳酸的工业化生产方法 | 第12-13页 |
| ·化学合成方法 | 第12-13页 |
| ·微生物发酵法 | 第13页 |
| ·基因工程技术在D-乳酸生产菌株中的研究进展 | 第13-16页 |
| ·D-乳酸大肠杆菌研究进展 | 第14-15页 |
| ·其他D-乳酸菌研究进展 | 第15-16页 |
| ·发酵工艺的优化 | 第16-19页 |
| ·发酵原料的选择 | 第16-17页 |
| ·发酵过程的优化 | 第17-18页 |
| ·发酵动力学的研究 | 第18-19页 |
| ·D-乳酸的市场份额及市场展望 | 第19页 |
| ·本论文研究的目的和意义 | 第19-20页 |
| ·本论文的研究内容 | 第20-22页 |
| 第2章 利用木糖产D-乳酸大肠杆菌工程菌的构建 | 第22-37页 |
| ·引言 | 第22-23页 |
| ·实验材料 | 第23-27页 |
| ·菌株、质粒及引物 | 第23-24页 |
| ·实验溶液 | 第24页 |
| ·实验试剂 | 第24-25页 |
| ·培养基 | 第25-26页 |
| ·实验仪器 | 第26-27页 |
| ·实验方法 | 第27-32页 |
| ·出发菌株的活化 | 第27页 |
| ·大肠杆菌WL204/ p KD46 的制备 | 第27页 |
| ·敲除片段的制备 | 第27-29页 |
| ·扩增片段在WL204/p KD46 的电转化 | 第29页 |
| ·重组菌株LHY01 的鉴定 | 第29-30页 |
| ·E.coli W的ldh A的扩增 | 第30-31页 |
| ·ldh A基因染色体的插入 | 第31页 |
| ·重组菌株LHY010 的验证 | 第31页 |
| ·厌氧驯化实验 | 第31-32页 |
| ·发酵产物的检测 | 第32页 |
| ·实验结果 | 第32-36页 |
| ·重组菌LHY01 的构建及鉴定 | 第32-33页 |
| ·大肠杆菌W的ldh A基因扩增 | 第33-34页 |
| ·重组菌LHY010 的构建及鉴定 | 第34-35页 |
| ·重组菌的厌氧驯化 | 第35-36页 |
| ·结论 | 第36-37页 |
| 第3章 响应面优化重组菌利用木糖发酵条件 | 第37-49页 |
| ·引言 | 第37页 |
| ·实验材料 | 第37-38页 |
| ·菌种 | 第37页 |
| ·实验溶液 | 第37页 |
| ·实验试剂 | 第37-38页 |
| ·培养基 | 第38页 |
| ·试验仪器 | 第38页 |
| ·实验方法 | 第38-40页 |
| ·菌种培养 | 第38-39页 |
| ·单因素优化实验 | 第39-40页 |
| ·响应面实验设计 | 第40页 |
| ·发酵产物的检测方法 | 第40页 |
| ·结果与分析 | 第40-48页 |
| ·CaCO_3 对发酵产D-乳酸的影响 | 第40-41页 |
| ·转速对发酵产D-乳酸的影响 | 第41-42页 |
| ·温度对发酵产D-乳酸的影响 | 第42页 |
| ·接种量对发酵产D-乳酸的影响 | 第42-43页 |
| ·Fe~(2+)浓度对发酵产D-乳酸的影响 | 第43-44页 |
| ·Mg~(2+)对发酵产D-乳酸的影响 | 第44页 |
| ·响应面优化D-乳酸发酵 | 第44-48页 |
| ·结论 | 第48-49页 |
| 第4章 重组菌利用木糖及混合糖发酵研究 | 第49-56页 |
| ·引言 | 第49页 |
| ·实验材料 | 第49-50页 |
| ·菌种 | 第49页 |
| ·实验溶液 | 第49页 |
| ·实验试剂 | 第49页 |
| ·培养基 | 第49页 |
| ·实验仪器 | 第49-50页 |
| ·实验方法 | 第50-51页 |
| ·菌种培养 | 第50页 |
| ·木糖及混合糖发酵条件的处理 | 第50页 |
| ·发酵产物分析方法 | 第50-51页 |
| ·结果与分析 | 第51-55页 |
| ·利用葡萄糖发酵 | 第51-52页 |
| ·利用木糖发酵 | 第52-53页 |
| ·利用混合糖发酵 | 第53-54页 |
| ·木糖和混合糖发酵的对比 | 第54-55页 |
| ·结论 | 第55-56页 |
| 第5章 重组菌利用木糖的发酵动力学研究 | 第56-65页 |
| ·引言 | 第56页 |
| ·实验材料 | 第56-57页 |
| ·菌种 | 第56页 |
| ·实验溶液 | 第56-57页 |
| ·实验试剂 | 第57页 |
| ·培养基 | 第57页 |
| ·实验仪器 | 第57页 |
| ·实验方法 | 第57-58页 |
| ·菌种培养 | 第57页 |
| ·利用 10%木糖发酵条件处理 | 第57-58页 |
| ·发酵产物分析方法 | 第58页 |
| ·结果与分析 | 第58-63页 |
| ·工程菌动力学模型建立 | 第58-60页 |
| ·动力学模型参数求解 | 第60页 |
| ·模型拟合曲线 | 第60-62页 |
| ·乳酸动力学模型的讨论 | 第62-63页 |
| ·结论 | 第63-65页 |
| 第6章 总结与展望 | 第65-67页 |
| ·结论 | 第65-66页 |
| ·创新点 | 第66页 |
| ·展望 | 第66-67页 |
| 参考文献 | 第67-73页 |
| 致谢 | 第73-74页 |
| 附录 | 第7页 |
