| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-14页 |
| 第一章 前言 | 第14-23页 |
| ·粮食中真菌毒素及其污染现状 | 第14页 |
| ·玉米赤霉烯酮简介 | 第14-16页 |
| ·ZEN检测方法 | 第16页 |
| ·ZEN去除方法 | 第16-18页 |
| ·物理方法 | 第16-17页 |
| ·化学方法 | 第17页 |
| ·生物方法 | 第17-18页 |
| ·巴斯德毕赤酵母(PICHIA PASTORSI)表达系统 | 第18-19页 |
| ·巴斯德毕赤酵母表达系统简介 | 第18-19页 |
| ·巴斯德毕赤酵母表达菌株和表现型 | 第19页 |
| ·影响巴斯德毕赤酵母外源蛋白高效表达的发酵条件 | 第19-21页 |
| ·培养基的影响 | 第19页 |
| ·温度的影响 | 第19-20页 |
| ·PH值影响 | 第20页 |
| ·碳源、氮源的影响 | 第20页 |
| ·诱导前菌体密度的影响 | 第20-21页 |
| ·溶氧的影响 | 第21页 |
| ·毕赤酵母发酵策略 | 第21页 |
| ·研究目的和意义 | 第21-23页 |
| 第二章 玉米赤霉烯酮降解工程菌ZPR6、NZPP11的优化及高效表达 | 第23-35页 |
| ·试验材料 | 第23-26页 |
| ·菌种与培养基贮存液 | 第23页 |
| ·培养基 | 第23-24页 |
| ·所需试剂及其配制 | 第24-25页 |
| ·主要仪器设备 | 第25-26页 |
| ·试验方法 | 第26-29页 |
| ·细菌ZPR6诱导表达 | 第26页 |
| ·诱导表达产物纯化 | 第26-27页 |
| ·表达产物的SDS-PAGE检测 | 第27页 |
| ·纯化酶液ZEN降解实验 | 第27-28页 |
| ·纯化酶液降解产物HPLC-MS分析 | 第28页 |
| ·毕赤酵母NZPP11诱导表达 | 第28页 |
| ·粗酶液TCA浓缩及浓缩产物的SDS-PAGE检测 | 第28页 |
| ·粗酶液降解ZEN实验 | 第28-29页 |
| ·结果与分析 | 第29-34页 |
| ·细菌ZPR6表达降解酶蛋白的SDS-PAGE电泳检测 | 第29页 |
| ·细菌工程菌ZPR6纯化酶液降解实验 | 第29-31页 |
| ·降解产物质谱解析 | 第31-32页 |
| ·毕赤酵母NZPP11表达蛋白的SDS-PAGE电泳检测 | 第32-33页 |
| ·毕赤酵母NZPP11粗酶液降解实验 | 第33-34页 |
| ·本章小结 | 第34-35页 |
| 第三章 玉米赤霉烯酮降解酶ZLHY6活性影响因素研究 | 第35-40页 |
| ·试验材料 | 第35页 |
| ·菌种与培养基 | 第35页 |
| ·实验菌种 | 第35页 |
| ·培养基 | 第35页 |
| ·所需试剂 | 第35页 |
| ·主要仪器设备 | 第35页 |
| ·试验方法 | 第35-36页 |
| ·重组细菌ZPR6的诱导表达及降解酶纯化 | 第35页 |
| ·ZEN降解率的测定 | 第35页 |
| ·温度对降解酶活性的影响 | 第35-36页 |
| ·最适反应温度 | 第36页 |
| ·PH对降解酶活性的影响 | 第36页 |
| ·金属离子对酶活性的影响 | 第36页 |
| ·结果与分析 | 第36-39页 |
| ·温度对降解酶活性的影响 | 第36-37页 |
| ·最适反应温度 | 第37页 |
| ·PH值对降解酶活性的影响 | 第37-38页 |
| ·金属离子对降解酶活性的影响 | 第38-39页 |
| ·讨论 | 第39页 |
| ·温度对降解酶的影响 | 第39页 |
| ·PH值对降解酶的影响 | 第39页 |
| ·金属离子对降解酶的影响 | 第39页 |
| ·本章小结 | 第39-40页 |
| 第四章 毕赤酵母工程菌NZPP11菌体密度优化 | 第40-50页 |
| ·试验材料 | 第40页 |
| ·供试菌株 | 第40页 |
| ·培养基和主要仪器 | 第40页 |
| ·菌株NZPP11菌体密度优化所需试剂 | 第40页 |
| ·试验方法 | 第40-41页 |
| ·毕赤酵母NZPP11生长曲线测定 | 第40-41页 |
| ·利用PLACKETT-BURMAN法筛选影响毕赤酵母生长的重要因素 | 第41页 |
| ·最陡爬坡实验 | 第41页 |
| ·响应面分析法 | 第41页 |
| ·模型验证实验 | 第41页 |
| ·结果与分析 | 第41-48页 |
| ·毕赤酵母NZPP11生长曲线 | 第41-42页 |
| ·PLACKETT-BURMAN法筛选影响毕赤酵母生长的重要因素 | 第42-44页 |
| ·最陡爬坡实验 | 第44页 |
| ·响应面分析确定最大响应值 | 第44-48页 |
| ·模型验证试验 | 第48页 |
| ·讨论 | 第48-49页 |
| ·本章小结 | 第49-50页 |
| 第五章 玉米赤霉烯酮降解酶应用初步研究 | 第50-63页 |
| ·试验材料 | 第50页 |
| ·供试菌株 | 第50页 |
| ·培养基和耗材 | 第50页 |
| ·所需试剂和材料 | 第50页 |
| ·主要仪器设备 | 第50页 |
| ·试验方法 | 第50-52页 |
| ·不同乙醇浓度对降解酶活性的影响 | 第50-51页 |
| ·酸性环境对降解酶活性的影响 | 第51页 |
| ·样品免疫层析亲和柱处理方法 | 第51-52页 |
| ·玉米醪中ZEN降解试验 | 第52页 |
| ·不同处理方式对玉米醪中ZEN降解效果的影响 | 第52页 |
| ·酒糟蛋白(DDGS)中ZEN的降解试验 | 第52页 |
| ·湿酒糟(DDG)中ZEN分布状况以及蒸馏酒中ZEN残留研究 | 第52页 |
| ·低温对降解酶活性影响的研究 | 第52页 |
| ·结果与分析 | 第52-62页 |
| ·ZEN校正曲线 | 第52-53页 |
| ·不同乙醇浓度对降解酶活性的影响 | 第53-55页 |
| ·酸性环境对降解酶活性的影响 | 第55-56页 |
| ·玉米醪中ZEN降解试验 | 第56-58页 |
| ·不同处理方式对玉米醪中ZEN降解效果的影响 | 第58-59页 |
| ·DDGS中ZEN的降解试验和DDG中ZEN分布状况 | 第59-61页 |
| ·低温对降解酶活性影响的研究 | 第61-62页 |
| ·讨论 | 第62页 |
| ·本章小结 | 第62-63页 |
| 全文结论 | 第63-64页 |
| 参考文献 | 第64-68页 |
| 致谢 | 第68-69页 |
| 附录 | 第69-71页 |
| 个人简历 | 第71页 |
