| 缩略词表 | 第3-4页 |
| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 第一章 绪论 | 第11-26页 |
| 1.1 透明质酸简介及其应用 | 第11-18页 |
| 1.1.1 透明质酸的微生物合成 | 第12-14页 |
| 1.1.2 影响链球菌透明质酸发酵的关键因素 | 第14-16页 |
| 1.1.3 透明质酸分子量与用途 | 第16页 |
| 1.1.4 其它合成透明质酸的微生物 | 第16-17页 |
| 1.1.5 微生物发酵透明质酸研究的难题 | 第17-18页 |
| 1.1.6 透明质酸水解酶分类及功能 | 第18页 |
| 1.2 颤藻血红蛋白简介及其应用 | 第18-19页 |
| 1.3 乳酸克鲁维酵母表达系统简介 | 第19-24页 |
| 1.3.1 乳酸克鲁维酵母简介 | 第19-20页 |
| 1.3.2 乳酸克鲁维酵母分泌表达系统的特点 | 第20-21页 |
| 1.3.3 乳酸克鲁维酵母表达系统的遗传特征 | 第21-24页 |
| 1.4 研究意义 | 第24-26页 |
| 第二章 兽疫链球菌的遗传工程菌株改造 | 第26-43页 |
| 2.1 引言 | 第26-27页 |
| 2.2 材料与方法 | 第27-34页 |
| 2.2.1 兽疫链球菌 | 第27页 |
| 2.2.2 大肠杆菌 | 第27页 |
| 2.2.3 质粒 | 第27-28页 |
| 2.2.4 培养基 | 第28页 |
| 2.2.5 菌体的培养 | 第28-29页 |
| 2.2.6 兽疫链球菌DNA提取 | 第29页 |
| 2.2.7 PCR与质粒构建 | 第29-34页 |
| （1）大肠杆菌感受态制备及转化 | 第29页 |
| （2）兽疫链球菌载体构建 | 第29-34页 |
| 2.2.8 兽疫链球菌电击转化感受态制备及转化 | 第34页 |
| 2.3 实验结果 | 第34-43页 |
| 2.3.1 锌离子诱导共表达HasA可以促进低分子量透明质酸的合成 | 第34-37页 |
| 2.3.2 锌离子诱导共表达 Has A 可以促进低分子量透明质酸的合成 | 第37-43页 |
| 2.3.2.1 锌离子诱导表达HasA菌株的构建 | 第37-38页 |
| 2.3.2.2 锌离子诱导表达两个透明质酸合成相关酶菌株的构建 | 第38-40页 |
| 2.3.2.3 锌离子诱导表达三个透明质酸合成相关酶菌株的构建 | 第40-43页 |
| 第三章 兽疫链球菌的菌株诱变及筛选 | 第43-50页 |
| 3.1 引言 | 第43页 |
| 3.2 材料与方法 | 第43-46页 |
| 3.2.1 兽疫链球菌 | 第43-44页 |
| 3.2.2 培养基 | 第44页 |
| 3.2.3 菌体的培养 | 第44页 |
| 3.2.4 NTG诱变及突变菌株的筛选 | 第44-45页 |
| 3.2.5 透明质酸含量与分子量检测 | 第45页 |
| 3.2.6 透明质酸分离与纯化 | 第45-46页 |
| 3.3 实验结果 | 第46-50页 |
| 3.3.1 NTG诱变利福平筛选可以有效提升透明质酸发酵产量以及降低透明质酸分子量 | 第46-50页 |
| 3.3.1.1 NTG诱变及利福平筛选获得了高NOX酶活的突变菌株SZ042 | 第46页 |
| 3.3.1.2 SZ042发酵特性分析 | 第46-50页 |
| 第四章 兽疫链球菌发酵条件优化 | 第50-70页 |
| 4.1 引言 | 第50-51页 |
| 4.2 材料与方法 | 第51页 |
| 4.2.1 兽疫链球菌 | 第51页 |
| 4.2.2 菌体的培养 | 第51页 |
| 4.2.3 培养基 | 第51页 |
| 4.3 实验结果 | 第51-70页 |
| 4.3.1 重组表达颤藻血红蛋白对发酵过程的影响 | 第51-55页 |
| 4.3.2 重组表达颤藻血红蛋白兽疫链球菌发酵过程的优化 | 第55-58页 |
| 4.3.3 SZ042透明质酸发酵条件优化 | 第58-62页 |
| 4.3.4 锌离子诱导表达HasA菌株的发酵特性分析与发酵条件优化 | 第62-66页 |
| 4.3.5 锌离子诱导表达两个透明质酸合成相关酶菌株的发酵特性分析 | 第66-67页 |
| 4.3.6 锌离子诱导表达三个透明质酸合成相关酶菌株的发酵特性分析与发酵条件优化 | 第67-70页 |
| 第五章 超低分子量透明质酸发酵工艺研究 | 第70-91页 |
| 5.1 引言 | 第70-71页 |
| 5.2 材料与方法 | 第71-75页 |
| 5.2.1 兽疫链球菌 | 第71页 |
| 5.2.2 大肠杆菌 | 第71页 |
| 5.2.3 乳酸克鲁维酵母 | 第71页 |
| 5.2.4 质粒 | 第71-72页 |
| 5.2.5 培养基 | 第72页 |
| 5.2.6 菌体的培养 | 第72-73页 |
| 5.2.7 乳酸克鲁维酵母表达载体构建 | 第73-74页 |
| 5.2.8 乳酸克鲁维酵母电击转化感受态制备及转化 | 第74页 |
| 5.2.9 透明质酸含量与分子量检测 | 第74页 |
| 5.2.10 透明质酸分离与纯化 | 第74-75页 |
| 5.3 实验结果 | 第75-91页 |
| 5.3.1 透明质酸酶表达 | 第75-81页 |
| 5.3.2 高效制备低分子量透明质酸工艺 | 第81-82页 |
| 5.3.3 高效恒化发酵低分子量透明质酸工艺摸索 | 第82-91页 |
| 第六章 结论与展望 | 第91-93页 |
| 参考文献 | 第93-103页 |
| 在学期间的研究成果 | 第103-104页 |
| 致谢 | 第104页 |
