| 摘要 | 第3-5页 |
| ABSTRACT | 第5-6页 |
| 缩略符号说明 | 第8-13页 |
| 第一章 绪论 | 第13-41页 |
| 1.1 镰刀菌毒素概述 | 第13-15页 |
| 1.1.1 污染危害 | 第13-14页 |
| 1.1.2 检测技术 | 第14-15页 |
| 1.2 核酸适配体 | 第15-21页 |
| 1.2.1 适配体的概述 | 第15-16页 |
| 1.2.2 适配体的优点 | 第16页 |
| 1.2.3 适配体的应用发展 | 第16-21页 |
| 1.3 SELEX技术 | 第21-27页 |
| 1.3.1 SELEX技术的原理与流程 | 第21-22页 |
| 1.3.2 SELEX技术的特点 | 第22页 |
| 1.3.3 SELEX技术的研究进展 | 第22-27页 |
| 1.4 无机纳米材料 | 第27-32页 |
| 1.4.1 磁性纳米颗粒及其应用 | 第27-28页 |
| 1.4.2 氧化石墨烯及其应用 | 第28-30页 |
| 1.4.3 纳米金及其应用 | 第30-32页 |
| 1.5 立题背景及意义 | 第32-33页 |
| 1.6 本论文主要研究内容 | 第33-34页 |
| 参考文献 | 第34-41页 |
| 第二章 玉米赤霉烯酮核酸适配体的筛选与分析应用 | 第41-59页 |
| 2.1 前言 | 第41-42页 |
| 2.2 实验材料与设备 | 第42-43页 |
| 2.2.1 主要材料与试剂 | 第42-43页 |
| 2.2.2 主要仪器和设备 | 第43页 |
| 2.3 实验方法 | 第43-47页 |
| 2.3.1 玉米赤霉烯酮的活化 | 第43页 |
| 2.3.2 玉米赤霉烯酮的固定 | 第43-44页 |
| 2.3.3 随机ssDNA文库的构建和单链文库的制备 | 第44页 |
| 2.3.4 体外筛选ZEN适配体 | 第44-46页 |
| 2.3.5 亲和力分析实验 | 第46页 |
| 2.3.6 特异性分析实验 | 第46页 |
| 2.3.7 保守序列及结合机理的分析 | 第46-47页 |
| 2.3.8 适配体Z8 在检测ZEN中的应用 | 第47页 |
| 2.4 结果与讨论 | 第47-56页 |
| 2.4.1 玉米赤霉烯酮肟化表征 | 第47-48页 |
| 2.4.2 靶标与磁珠偶联的表征 | 第48-49页 |
| 2.4.3 ZEN适配体的体外筛选 | 第49-51页 |
| 2.4.4 亲和力分析结果 | 第51-52页 |
| 2.4.5 特异性分析结果 | 第52-53页 |
| 2.4.6 保守序列及结合机理的分析结果 | 第53-54页 |
| 2.4.7 基于适配体特异捕获磁分离富集的ZEN检测方法及性能分析 | 第54-56页 |
| 2.5 本章小结 | 第56页 |
| 参考文献 | 第56-59页 |
| 第三章 特异识别伏马菌素B1核酸适配体的筛选与鉴定 | 第59-74页 |
| 3.1 前言 | 第59-60页 |
| 3.2 实验材料与设备 | 第60-61页 |
| 3.2.1 主要材料与试剂 | 第60页 |
| 3.2.2 主要仪器和设备 | 第60-61页 |
| 3.3 实验方法 | 第61-65页 |
| 3.3.1 次级ssDNA文库的制备 | 第61-62页 |
| 3.3.2 靶标FB1的固定 | 第62页 |
| 3.3.3 体外筛选FB1适配体 | 第62-64页 |
| 3.3.4 适配体序列分析 | 第64页 |
| 3.3.5 亲和力与特异性分析实验 | 第64-65页 |
| 3.3.6 结合机理研究 | 第65页 |
| 3.4 结果与讨论 | 第65-72页 |
| 3.4.1 次级单链文库制备表征 | 第65-66页 |
| 3.4.2 靶标FB1固定的表征 | 第66页 |
| 3.4.3 FB1适配体的体外筛选 | 第66-67页 |
| 3.4.4 FB1适配体序列分析结果 | 第67-69页 |
| 3.4.5 亲和力与特异性分析结果 | 第69-70页 |
| 3.4.6 结合机理研究 | 第70-72页 |
| 3.4.7 与已发表的FB1适配体对比分析 | 第72页 |
| 3.5 本章小结 | 第72页 |
| 参考文献 | 第72-74页 |
| 第四章 基于适配体特异识别的电化学阻抗谱检测伏马菌素B1 | 第74-85页 |
| 4.1 前言 | 第74-75页 |
| 4.2 实验材料与设备 | 第75页 |
| 4.2.1 主要材料与试剂 | 第75页 |
| 4.2.2 主要仪器和设备 | 第75页 |
| 4.3 实验方法 | 第75-77页 |
| 4.3.1 修饰电极的制备 | 第75-76页 |
| 4.3.2 修饰电极的表征 | 第76页 |
| 4.3.3 孵育时间的优化 | 第76页 |
| 4.3.4 电化学阻抗谱测量 | 第76页 |
| 4.3.5 加标回收率测试 | 第76-77页 |
| 4.4 结果与讨论 | 第77-82页 |
| 4.4.1 基于适配体特异识别的电化学阻抗谱检测FB1方法原理 | 第77页 |
| 4.4.2 电化学适感器组装的表征 | 第77-79页 |
| 4.4.3 孵育时间的优化 | 第79页 |
| 4.4.4 电化学阻抗检测FB1标准曲线的绘制 | 第79-81页 |
| 4.4.5 基于适配体建立的FB1检测方法对比 | 第81页 |
| 4.4.6 特异性和重复性评价 | 第81-82页 |
| 4.4.7 实际样品加标回收率测试 | 第82页 |
| 4.5 本章小结 | 第82-83页 |
| 参考文献 | 第83-85页 |
| 第五章 非固定GO-SELEX筛选T-2 毒素核酸适配体的研究 | 第85-98页 |
| 5.1 前言 | 第85-86页 |
| 5.2 实验材料与设备 | 第86-87页 |
| 5.2.1 主要材料与试剂 | 第86-87页 |
| 5.2.2 主要仪器和设备 | 第87页 |
| 5.2.3 随机ssDNA文库和引物的构建 | 第87页 |
| 5.3 实验方法 | 第87-90页 |
| 5.3.1 特殊结合缓冲液的优化 | 第87-88页 |
| 5.3.2 体外筛选T-2 毒素适配体 | 第88-89页 |
| 5.3.3 富集文库的克隆、测序与序列分析 | 第89页 |
| 5.3.4 亲和力分析实验 | 第89-90页 |
| 5.3.5 特异性分析实验 | 第90页 |
| 5.3.6 圆二色谱（CD）分析实验 | 第90页 |
| 5.4 结果与讨论 | 第90-96页 |
| 5.4.1 特殊结合缓冲液的确定 | 第90-91页 |
| 5.4.2 T-2 毒素适配体的体外筛选 | 第91页 |
| 5.4.3 克隆结果表征 | 第91-92页 |
| 5.4.4 候选适配体的初级表征 | 第92-94页 |
| 4.4.5 解离常数与亲和力测定结果 | 第94页 |
| 5.4.6 特异性分析结果 | 第94-95页 |
| 5.4.7 T-2 毒素与适配体Seq.16 的结合机理 | 第95-96页 |
| 5.5 本章小结 | 第96页 |
| 参考文献 | 第96-98页 |
| 第六章 基于适配体分离-乙酰胆碱酯酶抑制的T-2 毒素可视化检测方法研究 | 第98-111页 |
| 6.1 前言 | 第98-99页 |
| 6.2 实验材料与设备 | 第99-100页 |
| 6.2.1 主要材料与试剂 | 第99页 |
| 6.2.2 主要仪器和设备 | 第99-100页 |
| 6.3 实验方法 | 第100-102页 |
| 6.3.1 金纳米颗粒的制备与表征 | 第100页 |
| 6.3.2 硫代胆碱诱导纳米金聚集的特异性实验 | 第100页 |
| 6.3.3 纳米金及底物ATC工作浓度的优化 | 第100页 |
| 6.3.4 目标物T-2 毒素对AChE酶的抑制作用研究 | 第100-101页 |
| 6.3.5 制备适配体功能化的捕获探针 | 第101页 |
| 6.3.6 基于适配体分离-AChE抑制的纳米金比色法检测T-2 毒素 | 第101页 |
| 6.3.7 实际样品加标回收率测试 | 第101-102页 |
| 6.4 结果与讨论 | 第102-109页 |
| 6.4.1 基于适配体分离-乙酰胆碱酯酶抑制的T-2 毒素可视化检测方法原理 | 第102-103页 |
| 6.4.2 纳米金的表征及浓度计算 | 第103-104页 |
| 6.4.3 硫代胆碱诱导纳米金聚集的特异性 | 第104页 |
| 6.4.4 纳米金及底物ATC工作浓度的确定 | 第104-105页 |
| 6.4.5 T-2 毒素抑制AChE酶活性的表征 | 第105-106页 |
| 6.4.6 适配体功能化捕获探针的表征 | 第106-107页 |
| 6.4.7 可视化检测T-2 毒素新方法的性能分析 | 第107-109页 |
| 6.4.8 与已报道的T-2 毒素检测方法比对 | 第109页 |
| 6.5 本章小结 | 第109页 |
| 参考文献 | 第109-111页 |
| 主要结论与展望 | 第111-113页 |
| 主要结论 | 第111-112页 |
| 展望 | 第112-113页 |
| 本论文创新点 | 第113-114页 |
| 致谢 | 第114-116页 |
| 附录: 作者在攻读博士学位期间发表的论文 | 第116页 |
