| 摘要 | 第4-7页 |
| abstract | 第7-9页 |
| 第一章 引言 | 第13-20页 |
| 1.1 兽用抗生素的使用现状 | 第13-14页 |
| 1.2 耐药菌污染现状 | 第14-15页 |
| 1.3 耐药基因污染现状 | 第15-16页 |
| 1.4 耐药菌耐药机制 | 第16-17页 |
| 1.4.1 整合子耐药机制 | 第16-17页 |
| 1.4.2 质粒介导的耐药机制 | 第17页 |
| 1.5 食物链在耐药菌传播过程中的作用 | 第17-18页 |
| 1.6 非致病菌与HGT | 第18-19页 |
| 1.7 本文创新点 | 第19页 |
| 1.8 研究技术路线 | 第19-20页 |
| 第二章 耐药菌分布以及多药表型分析 | 第20-31页 |
| 2.1 实验材料与设备 | 第20-22页 |
| 2.1.1 主要仪器和设备 | 第20-21页 |
| 2.1.2 试剂与耗材 | 第21-22页 |
| 2.2 试验方法 | 第22-23页 |
| 2.2.1 样品采集与前处理 | 第22页 |
| 2.2.2 耐药菌分离培养 | 第22-23页 |
| 2.2.3 多重耐药菌分离 | 第23页 |
| 2.3 结果与分析 | 第23-29页 |
| 2.3.1 耐药菌计数 | 第23-28页 |
| 2.3.1.1 市售鸡肉和可食内脏耐药菌分布 | 第23-28页 |
| 2.3.2 多耐药表型分析 | 第28-29页 |
| 2.4 本章小结 | 第29-31页 |
| 第三章 耐药基因阳性菌株获得 | 第31-38页 |
| 3.1 实验材料与设备 | 第31-32页 |
| 3.1.1 主要仪器和设备 | 第31页 |
| 3.1.2 试剂与耗材 | 第31-32页 |
| 3.2 试验方法 | 第32-35页 |
| 3.2.1 目的片段的PCR扩增 | 第32-33页 |
| 3.2.2 PCR产物回收 | 第33-34页 |
| 3.2.3 基因片段与克隆载体的连接 | 第34页 |
| 3.2.4 重组质粒转化 | 第34页 |
| 3.2.5 质粒提取 | 第34-35页 |
| 3.2.6 阳性克隆鉴定 | 第35页 |
| 3.3 试验结果 | 第35-38页 |
| 第四章 鸡肉及相关样品中耐药基因筛查及菌种测序分析 | 第38-54页 |
| 4.1 实验材料与设备 | 第38-39页 |
| 4.1.1 主要仪器和设备 | 第38页 |
| 4.1.2 试剂与耗材 | 第38-39页 |
| 4.2 试验方法 | 第39-41页 |
| 4.2.1 试验流程 | 第39页 |
| 4.2.1.1 第二章鸡肉、胃、肠道、饲料、粪便样品中分离到的多重耐单菌落 | 第39页 |
| 4.2.1.1 含有3个以上耐药基因的耐药菌后续试验 | 第39页 |
| 4.2.2 单菌落DNA的提取 | 第39页 |
| 4.2.3 第一类整合酶基因intI与耐药基因的筛查 | 第39-40页 |
| 4.2.4 药敏试验 | 第40-41页 |
| 4.2.5 菌种鉴定 | 第41页 |
| 4.3 试验结果 | 第41-53页 |
| 4.3.1 耐药基因筛查结果 | 第41-42页 |
| 4.3.2 耐药菌的耐药基因、MIC与菌种鉴定 | 第42-53页 |
| 4.4 本章小结 | 第53-54页 |
| 第五章 耐药基因的定位 | 第54-61页 |
| 5.1 实验材料与设备 | 第54-55页 |
| 5.1.1 主要仪器和设备 | 第54页 |
| 5.1.2 试剂与耗材 | 第54-55页 |
| 5.2 试验方法 | 第55-59页 |
| 5.2.1 碱裂解法提取质粒 | 第55-56页 |
| 5.2.2 质粒PCR | 第56页 |
| 5.2.3 耐药基因Sonthern杂交 | 第56-59页 |
| 5.2.3.1 地高辛标记的杂交探针的制备 | 第56-57页 |
| 5.2.2.2 Southern杂交 | 第57-59页 |
| 5.3 试验结果 | 第59-60页 |
| 5.3.1 质粒耐药基因分布 | 第59-60页 |
| 5.3.2 Southern杂交结果 | 第60页 |
| 5.4 本章小结 | 第60-61页 |
| 总结与展望 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-70页 |
| 致谢 | 第70-71页 |
| 研究生期间所获成果 | 第71页 |
