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生物法对玉米秸秆降解的研究及阿魏酸酯酶的耐热性改造

摘要第9-10页
ABSTRACT第10-11页
第1章 绪论第12-20页
    1.1 植物纤维性农业废弃物作为饲料应用概况第12-13页
    1.2 植物纤维性农业废弃物处理的方式第13-15页
        1.2.1 物理法第13页
        1.2.2 化学法第13-14页
        1.2.3 生物处理第14页
        1.2.4 植物纤维性农业废弃物的降解菌及酶第14-15页
    1.3 阿魏酸酯酶对植物纤维性农业废弃物的降解第15-16页
    1.4 阿魏酸酯酶与其他纤维素降解酶之间的协同作用第16-18页
        1.4.1 阿魏酸酯酶与纤维素酶的协同作用第16-17页
        1.4.2 阿魏酸酯酶与木聚糖酶之间的的协同作用第17页
        1.4.3 阿魏酸酯酶与其他降解酶的协同作用第17-18页
    1.5 研究的目的和意义第18页
    1.6 研究的主要内容第18-20页
第2章 混合菌液发酵组合条件的优化第20-32页
    2.1 材料与方法第20-21页
        2.1.1 主要仪器第20页
        2.1.2 菌种与材料第20-21页
        2.1.3 培养基第21页
    2.2 方法第21-23页
        2.2.1 四株菌之间的拮抗作用第21页
        2.2.2 混合菌液添加顺序对玉米秸秆降解效果的影响第21页
        2.2.3 混合菌液发酵温度对玉米秸秆降解效果的影响第21页
        2.2.4 混合菌液发酵pH对玉米秸秆降解效果的影响第21-22页
        2.2.5 混合菌液发酵固液比对玉米秸秆降解效果的影响第22页
        2.2.6 混合菌液接种量对玉米秸秆降解效果的影响第22页
        2.2.7 正交试验确定混合菌液对玉米秸秆的最适发酵条件第22页
        2.2.8 纤维素、半纤维素和木质素的测定第22-23页
        2.2.9 傅里叶红外光谱分析第23页
        2.2.10 还原糖含量的测定第23页
    2.3 结果与分析第23-30页
        2.3.1 四株菌之间的拮抗第23-24页
        2.3.2 三株菌的添加顺序第24-25页
        2.3.3 混合菌液处理秸秆的温度优化第25-26页
        2.3.4 混合菌液处理秸秆的pH优化第26页
        2.3.5 混合菌液处理秸秆的固液比优化第26-27页
        2.3.6 混合菌液接种量对玉米秸秆降解效果的影响第27-28页
        2.3.7 正交试验确定混合菌液对玉米秸秆的最适发酵条件第28-29页
        2.3.8 纤维降解率第29-30页
        2.3.9 傅里叶红外光谱分析第30页
    2.4 本章小结第30-32页
第3章 酶协同处理玉米秸秆制备饲料第32-44页
    3.1 材料与方法第32页
        3.1.1 主要仪器第32页
        3.1.2 酶与材料第32页
        3.1.3 培养基第32页
    3.2 方法第32-35页
        3.2.1 阿魏酸酯酶A添加量的优化第32-33页
        3.2.2 纤维素酶添加量的优化第33页
        3.2.3 漆酶添加量的优化第33页
        3.2.4 酶协同发酵玉米秸秆制备饲料的温度优化第33页
        3.2.5 酶协同发酵玉米秸秆制备饲料的pH优化第33页
        3.2.6 酶协同发酵玉米秸秆制备饲料的固液比优化第33-34页
        3.2.7 金属离子对酶协同发酵玉米秸秆制备饲料的影响第34页
        3.2.8 酶协同发酵玉米秸秆制备饲料的正交试验筛选最佳发酵条件第34页
        3.2.9 纤维素、半纤维素和木质素的测定第34页
        3.2.10 傅里叶红外光谱分析第34-35页
        3.2.11 还原糖含量的测定第35页
    3.3 结果与分析第35-42页
        3.3.1 阿魏酸酯酶A添加量的优化第35页
        3.3.2 纤维素酶添加量的优化第35-36页
        3.3.3 漆酶添加量的优化第36-37页
        3.3.4 温度对酶协同发酵玉米秸秆制备饲料的影响第37-38页
        3.3.5 pH对酶协同发酵玉米秸秆制备饲料的影响第38页
        3.3.6 固液比对酶协同发酵玉米秸秆制备饲料的影响第38-39页
        3.3.7 金属离子对酶协同发酵玉米秸秆制备饲料的影响第39-40页
        3.3.8 正交试验确定最佳发酵条件第40-41页
        3.3.9 纤维素、半纤维和木质素含量的测定第41-42页
        3.3.10 傅里叶红外扫描第42页
    3.4 本章小结第42-44页
第4章 定点突变改善阿魏酸酯酶A的耐热性第44-66页
    4.1 实验材料第44-47页
        4.1.1 主要仪器第44-45页
        4.1.2 菌种和质粒第45页
        4.1.3 主要的工具酶、引物和试剂第45页
        4.1.4 培养基第45-47页
    4.2 试验方法第47-56页
        4.2.1 重组毕赤酵母总基因组DNA的提取与阿魏酸酯酶A基因克隆第47-49页
        4.2.2 阿魏酸酯酶A突变基因的获得第49-50页
        4.2.3 突变基因的全长片段与载体PMD19-T的连接、转化第50-52页
        4.2.4 定点突变的阿魏酸酯酶A表达载体pPIC9k-FAE的构建第52-54页
        4.2.5 重组表达载体pPIC9k-FAE的线性化第54-55页
        4.2.6 pPIC9k-FAE重组表达载体电转化毕赤酵母GS115第55-56页
        4.2.7 定点突变的重组阿魏酸酯酶最适作用温度和热稳定性研究第56页
    4.3 实验结果第56-64页
        4.3.1 重组毕赤酵母总基因组DNA的提取及阿魏酸酯酶A基因的克隆第56-57页
        4.3.2 阿魏酸酯酶A突变基因的获得第57-58页
        4.3.3 突变基因的全程片段与PMD19-T载体的连接及转化大肠杆菌DH5α第58-60页
        4.3.4 定点突变的阿魏酸酯酶A表达载体pPIC9K-FAE的构建第60-61页
        4.3.5 表达载体pPIC9K-FAE的线性化第61-62页
        4.3.6 pPIC9K-FAE重组表达载体电转化毕赤酵母GS115第62页
        4.3.7 定点突变的重组阿魏酸酯酶A的最适作用温度和热稳定性研究第62-64页
    4.4 本章小结第64-66页
第5章 全文总结与展望第66-68页
    5.1 结论第66页
    5.2 展望第66-68页
参考文献第68-74页
致谢第74-76页
在学期间主要科研成果第76页

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