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原料乳中两种病原菌双重PCR检测方法的建立与应用

摘要第1-5页
Abstract第5-10页
图表目录第10-11页
本论文常用中英文缩写词第11-12页
文献综述第12-17页
引言第17-18页
1 材料与方法第18-24页
   ·材料第18-19页
     ·实验菌株第18页
     ·主要培养基与试剂第18页
     ·实验动物第18页
     ·常用培养基及溶液配制第18-19页
       ·Baird-Parker培养基第18页
       ·50×TAE缓冲液(贮存液)第18页
       ·EB溶液第18页
       ·1.2%琼脂糖凝胶第18页
       ·50% Na2EDTA溶液第18-19页
     ·主要仪器第19页
   ·方法第19-24页
     ·金黄色葡萄球菌单一PCR检测方法的建立第19-20页
       ·DNA模板提取第19页
       ·引物的设计与合成第19页
       ·PCR扩增体系与循环条件的优化第19页
       ·特异性测定第19-20页
     ·致病性大肠杆菌单一PCR检测方法的建立第20页
       ·DNA模板提取第20页
       ·引物的设计与合成第20页
       ·PCR扩增体系与循环条件的优化第20页
       ·特异性测定第20页
     ·双重PCR检测方法的条件优化与建立第20-21页
       ·双重PCR检测方法的建立与条件优化第20-21页
       ·特异性测定第21页
       ·敏感性测定第21页
     ·人工模拟样品中两种病原菌的双重PCR检测第21页
       ·原料乳的人工污染第21页
       ·人工污染乳的过滤第21页
       ·人工污染乳的双重PCR检测第21页
     ·原料乳及乳制品中两种病原菌污染情况的检测第21-24页
       ·样品的采集与保存第21-22页
       ·原料乳中两种病原菌的双重PCR检测第22页
         ·原料乳DNA模板制备第22页
         ·双重PCR检测第22页
       ·原料乳中两种病原菌的分离与鉴定第22-23页
         ·金黄色葡萄球菌的分离和鉴定第22页
         ·致病性大肠杆菌的分离和鉴定第22页
         ·大肠杆菌的致病性检测第22-23页
       ·市售乳制品中两种病原菌的双重PCR检测第23-24页
2 结果与分析第24-38页
   ·金黄色葡萄球菌单一PCR检测方法的建立第24-25页
   ·致病性大肠杆菌单一PCR检测方法的建立第25-26页
   ·双重PCR检测方法的条件优化与建立第26-29页
     ·双重PCR检测方法的建立与条件优化第26-28页
     ·特异性测定第28-29页
     ·敏感性测定第29页
   ·人工模拟样品中两种病原菌的双重PCR检测第29-30页
   ·原料乳及乳制品中两种病原菌污染情况的检测第30-38页
     ·原料乳中两种病原菌的双重PCR检测结果第30-33页
     ·原料乳中两种病原菌的分离鉴定结果第33-34页
       ·金黄色葡萄菌的分离鉴定结果第33页
       ·致病性大肠杆菌的分离鉴定第33-34页
     ·双重PCR检测方法和国标法的比较第34-36页
     ·乳制品中两种病原菌的双重PCR检测结果第36-38页
3 讨论第38-42页
   ·双重PCR检测方法的条件优化第38页
   ·原料乳中DNA模板提取方法第38-39页
   ·双重PCR检测方法的灵敏性与准确性第39-40页
   ·原料乳及市售乳制品中两种病原菌的污染情况第40-42页
4 结论第42-43页
参考文献第43-50页
致谢第50-51页
作者简介第51页

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