| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4页 |
| 第一章 绪论 | 第7-14页 |
| 1.1 脂肪酶非水相催化 | 第7-9页 |
| 1.1.1 脂肪酶和非水相催化概述 | 第7-8页 |
| 1.1.2 脂肪酶非水相催化的应用 | 第8-9页 |
| 1.1.3 脂肪酶非水相催化存在的问题 | 第9页 |
| 1.2 提高脂肪酶非水相催化活性的方法 | 第9-10页 |
| 1.2.1 添加辅助剂 | 第9-10页 |
| 1.2.2 酶的固定化 | 第10页 |
| 1.2.3 改善有机溶剂中酶的溶解性 | 第10页 |
| 1.3 华根霉脂肪酶研究基础 | 第10-12页 |
| 1.3.1 野生型华根霉脂肪酶研究 | 第10-11页 |
| 1.3.2 华根霉脂肪酶基因的克隆及异源表达 | 第11-12页 |
| 1.3.3 包涵体复性概述 | 第12页 |
| 1.4 研究的意义和主要内容 | 第12-14页 |
| 1.4.1 研究的意义 | 第12页 |
| 1.4.2 研究的主要内容 | 第12-14页 |
| 第二章 材料与方法 | 第14-21页 |
| 2.1 实验材料 | 第14-16页 |
| 2.1.1 菌株与质粒 | 第14页 |
| 2.1.2 实验仪器 | 第14页 |
| 2.1.3 实验试剂 | 第14-15页 |
| 2.1.4 培养基与相关溶液 | 第15-16页 |
| 2.2 实验方法 | 第16-21页 |
| 2.2.1 华根霉菌体培养与收集 | 第16页 |
| 2.2.2 野生型华根霉脂肪酶的提取 | 第16页 |
| 2.2.3 构建mRCL的大肠杆菌原核表达系统 | 第16-18页 |
| 2.2.4 重组mRCL的发酵及诱导表达 | 第18页 |
| 2.2.5 重组mRCL包涵体制备、溶解及纯化 | 第18页 |
| 2.2.6 华根霉脂肪酶的透析复性 | 第18-19页 |
| 2.2.7 脂肪酶与添加剂的冻干处理 | 第19页 |
| 2.2.8 脂肪酶酶活测定 | 第19页 |
| 2.2.9 脂肪酶催化己酸乙酯和油酸乙酯的合成 | 第19页 |
| 2.2.10 气相色谱(GC)分析 | 第19-21页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第21-39页 |
| 3.1 表面活性剂对r27RCL酯合成活性的激活作用研究 | 第21-29页 |
| 3.1.1 r27RCL酯合成活性的分析 | 第21-22页 |
| 3.1.2 表面活性剂对r27RCL酯合成活性的影响 | 第22-23页 |
| 3.1.3 DDM添加量对r27RCL酯合成活性的影响 | 第23-25页 |
| 3.1.4 pH对DDM激活效果的影响 | 第25-26页 |
| 3.1.5 无机盐对DDM激活效果的影响 | 第26-29页 |
| 3.2 mRCL包涵体体外复性及酯合成活性的激活研究 | 第29-36页 |
| 3.2.1 mRCL表达载体构建与重组质粒鉴定 | 第29-30页 |
| 3.2.2 重组mRCL诱导表达结果 | 第30-31页 |
| 3.2.3 mRCL表达条件优化 | 第31-33页 |
| 3.2.4 重组mRCL包涵体的分离、溶解和纯化 | 第33-34页 |
| 3.2.5 重组mRCL的透析复性 | 第34-35页 |
| 3.2.6 表面活性剂对华根霉脂肪酶复性过程的影响 | 第35-36页 |
| 3.3 DDM激活的r27RCL催化酯合成反应的应用 | 第36-39页 |
| 3.3.1 有机介质中催化风味物质己酸乙酯的合成 | 第37页 |
| 3.3.2 无溶剂体系中催化生物柴油油酸乙酯的合成 | 第37-39页 |
| 主要结论与展望 | 第39-41页 |
| 主要结论 | 第39页 |
| 展望 | 第39-41页 |
| 致谢 | 第41-42页 |
| 参考文献 | 第42-48页 |
| 附录：作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第48页 |
