| 摘要 | 第3-5页 |
| ABSTRACT | 第5-6页 |
| 缩略语表 | 第7-12页 |
| 第1章 引言 | 第12-21页 |
| 1.1 牛乳过敏 | 第12-15页 |
| 1.1.1 牛乳过敏原机理 | 第12页 |
| 1.1.2 牛乳过敏原及危害 | 第12-13页 |
| 1.1.3 牛乳α-乳白蛋白 | 第13-15页 |
| 1.2 矿物质对食物过敏原结构和稳定性的影响 | 第15-18页 |
| 1.2.1 矿物质对食物过敏原结构的影响 | 第15-16页 |
| 1.2.2 金属离子对食物过敏原稳定性的影响 | 第16-17页 |
| 1.2.3 不同条件下金属离子对食品过敏原的影响 | 第17-18页 |
| 1.3 食物过敏原致敏性的评价 | 第18-19页 |
| 1.3.1 血清学检测抗体的方法 | 第18页 |
| 1.3.2 体外细胞学检测方法 | 第18-19页 |
| 1.4 立题背景与研究内容 | 第19-21页 |
| 1.4.1 立题背景 | 第19-20页 |
| 1.4.2 研究内容 | 第20-21页 |
| 第2章 钙离子结合牛乳α-乳白蛋白条件优化 | 第21-32页 |
| 2.1 引言 | 第21页 |
| 2.2 实验材料与方法 | 第21-24页 |
| 2.2.1 实验材料 | 第21-22页 |
| 2.2.2 主要仪器设备 | 第22页 |
| 2.2.3 实验方法 | 第22-24页 |
| 2.2.3.1 溶液配制 | 第22-23页 |
| 2.2.3.2 牛乳α-乳白蛋白的制备 | 第23页 |
| 2.2.3.3 样品测定方法 | 第23-24页 |
| 2.3 结果分析 | 第24-30页 |
| 2.3.1 牛乳α-乳白蛋白的纯化 | 第24-26页 |
| 2.3.2 纯化后的牛乳α-乳白蛋白去除钙离子 | 第26页 |
| 2.3.3 钙离子结合牛乳α-乳白蛋白条件优化 | 第26-30页 |
| 2.3.3.1 单因素分析 | 第26-27页 |
| 2.3.3.2 多因素分析 | 第27-30页 |
| 2.4 讨论 | 第30-31页 |
| 2.4.1 钙离子的测定方法 | 第30-31页 |
| 2.4.2 影响钙离子结合蛋白的参数 | 第31页 |
| 2.5 小结 | 第31-32页 |
| 第3章 钙离子对牛乳α-乳白蛋白结构与免疫特性的影响 | 第32-49页 |
| 3.1 引言 | 第32页 |
| 3.2 实验材料与方法 | 第32-39页 |
| 3.2.1 实验材料 | 第32-33页 |
| 3.2.2 设备 | 第33页 |
| 3.2.3 实验方法 | 第33-39页 |
| 3.2.3.1 溶液配制 | 第33-34页 |
| 3.2.3.2 圆二色光谱分析 | 第34-35页 |
| 3.2.3.3 紫外可见光谱分析 | 第35页 |
| 3.2.3.4 内源性荧光光谱分析 | 第35页 |
| 3.2.3.5 外源性荧光光谱分析 | 第35页 |
| 3.2.3.6 体外模拟胃肠道消化 | 第35页 |
| 3.2.3.7 Tricine-SDS-PAGE电泳 | 第35-36页 |
| 3.2.3.8 IgG结合能力检测 | 第36-37页 |
| 3.2.3.9 IgE结合能力检测 | 第37-39页 |
| 3.2.3.10 数据统计分析 | 第39页 |
| 3.3 结果分析 | 第39-46页 |
| 3.3.1 钙离子结合牛乳α-乳白蛋白的圆二色光谱 | 第39-40页 |
| 3.3.2 钙离子结合牛乳α-乳白蛋白的紫外光谱分析 | 第40页 |
| 3.3.3 钙离子结合牛乳α-乳白蛋白的内源性荧光光谱分析 | 第40-41页 |
| 3.3.4 钙离子结合牛乳α-乳白蛋白的外源性荧光光谱分析 | 第41-42页 |
| 3.3.5 钙离子结合牛乳α-乳白蛋白胃肠消化的电泳图谱 | 第42-43页 |
| 3.3.6 钙离子结合牛乳α-乳白蛋白的IgG结合能力 | 第43-45页 |
| 3.3.7 钙离子结合牛乳α-乳白蛋白的IgE结合能力 | 第45-46页 |
| 3.4 讨论 | 第46-47页 |
| 3.4.1 钙离子对牛乳α-乳白蛋白构象和抗体结合能力的影响 | 第46-47页 |
| 3.4.2 钙离子对牛乳α-乳白蛋白消化稳定性的影响 | 第47页 |
| 3.5 小结 | 第47-49页 |
| 第4章 基于KU812细胞株脱颗粒模型评价钙结合牛乳α-乳白蛋的致敏性 | 第49-59页 |
| 4.1 引言 | 第49页 |
| 4.2 实验材料与方法 | 第49-53页 |
| 4.2.1 实验材料 | 第49-50页 |
| 4.2.2 设备 | 第50页 |
| 4.2.3 实验方法 | 第50-53页 |
| 4.2.3.1 溶液配制 | 第50页 |
| 4.2.3.2 牛乳过敏患者血清池的构建 | 第50-51页 |
| 4.2.3.3 KU812细胞的传代培养 | 第51页 |
| 4.2.3.4 KU812细胞的冻存与复苏 | 第51页 |
| 4.2.3.5 IgE介导的KU812细胞体外活化实验 | 第51页 |
| 4.2.3.6 β-HEX含量的检测 | 第51-52页 |
| 4.2.3.7 组胺含量的检测 | 第52页 |
| 4.2.3.8 IL-6(TNF-γ)含量的检测 | 第52页 |
| 4.2.3.9 胞内钙离子定性检测 | 第52-53页 |
| 4.2.3.10 数据统计分析 | 第53页 |
| 4.3 结果分析 | 第53-57页 |
| 4.3.1 过敏原诱导KU812的β-HEX含量变化 | 第53-54页 |
| 4.3.2 过敏原诱导的KU812组胺释放 | 第54-55页 |
| 4.3.3 过敏原诱导KU812细胞TNF-γ释放 | 第55-56页 |
| 4.3.4 过敏原诱导KU812细胞IL-6释放 | 第56-57页 |
| 4.3.5 细胞内钙离子表达量的变化 | 第57页 |
| 4.4 讨论 | 第57-58页 |
| 4.5 小结 | 第58-59页 |
| 第5章 结论和展望 | 第59-61页 |
| 5.1 结论 | 第59页 |
| 5.2 创新点 | 第59页 |
| 5.3 展望 | 第59-61页 |
| 致谢 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-68页 |
| 攻读硕士期间的研究成果 | 第68页 |
