| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 第1章 绪论 | 第11-23页 |
| 1.1 谷氨酰胺转氨酶的简介 | 第11-14页 |
| 1.1.1 谷氨酰胺转氨酶的催化机理 | 第11-12页 |
| 1.1.2 谷氨酰胺转氨酶的主要来源 | 第12-13页 |
| 1.1.3 MTG的结构特征与活化机制 | 第13-14页 |
| 1.2 微生物谷氨酰胺转氨酶的生产研究进展 | 第14-17页 |
| 1.2.1 传统微生物发酵生产MTG | 第14-15页 |
| 1.2.2 基因工程法生产MTG | 第15-16页 |
| 1.2.3 MTG生产菌株的诱变选育 | 第16-17页 |
| 1.3 微生物谷氨酰胺转氨酶的应用 | 第17-18页 |
| 1.3.1 微生物谷氨酰胺转氨酶在食品领域中的应用 | 第17页 |
| 1.3.2 微生物谷氨酰胺转氨酶在其它领域中的应用 | 第17-18页 |
| 1.4 常压室温等离子体诱变育种技术的简介 | 第18-21页 |
| 1.4.1 ARTP诱变育种技术简介 | 第18-19页 |
| 1.4.2 ARTP与微生物的作用机理 | 第19页 |
| 1.4.3 ARTP诱变育种技术的应用 | 第19-21页 |
| 1.5 本课题研究意义 | 第21-22页 |
| 1.6 本课题主要研究内容 | 第22-23页 |
| 第2章 出发菌株的产酶特征及SmTGase酶原基因的重组表达 | 第23-38页 |
| 2.1 引言 | 第23页 |
| 2.2 实验材料 | 第23-25页 |
| 2.2.1 主要试剂 | 第23-24页 |
| 2.2.2 实验仪器 | 第24页 |
| 2.2.3 菌株与培养基 | 第24-25页 |
| 2.3 实验方法 | 第25-32页 |
| 2.3.1 茂源链霉菌的培养 | 第25-26页 |
| 2.3.2 茂源链霉菌的保藏 | 第26页 |
| 2.3.3 SmTGase的酶活测定 | 第26-27页 |
| 2.3.4 S.mobaraense ECU7480的5-L发酵 | 第27页 |
| 2.3.5 S.mobaraense ECU7480中SmTGase酶原基因的克隆表达 | 第27-30页 |
| 2.3.6 重组酶pro-SmTGase的纯化及动力学参数测定 | 第30-32页 |
| 2.4 实验结果及讨论 | 第32-37页 |
| 2.4.1 S.mobaraense ECU7480发酵产酶特征 | 第32-34页 |
| 2.4.2 S.mobaraense ECU7480中SmTGase酶原基因的克隆表达 | 第34-37页 |
| 2.5 本章小结 | 第37-38页 |
| 第3章 ARTP迭代诱变选育SmTGase高产菌株 | 第38-50页 |
| 3.1 引言 | 第38页 |
| 3.2 实验材料 | 第38页 |
| 3.2.1 主要试剂 | 第38页 |
| 3.2.2 实验仪器 | 第38页 |
| 3.3 实验方法 | 第38-40页 |
| 3.3.1 ARTP诱变实验 | 第38-39页 |
| 3.3.2 诱变菌株的初筛 | 第39-40页 |
| 3.3.3 S. mobaraense突变株的摇瓶发酵复筛及验证 | 第40页 |
| 3.3.4 突变株遗传稳定性的考察 | 第40页 |
| 3.4 实验结果及讨论 | 第40-48页 |
| 3.4.1 初筛方法的建立 | 第40-43页 |
| 3.4.2 ARTP诱变处理时间的确定 | 第43页 |
| 3.4.3 八轮ARTP迭代诱变初筛结果 | 第43-46页 |
| 3.4.4 突变株的摇瓶发酵 | 第46-47页 |
| 3.4.5 SmTGase高产突变株的遗传稳定性 | 第47-48页 |
| 3.5 本章小结 | 第48-50页 |
| 第4章 突变株中SmTGase酶原基因的序列比对及表达水平分析 | 第50-59页 |
| 4.1 引言 | 第50页 |
| 4.2 实验材料 | 第50-51页 |
| 4.2.1 主要试剂 | 第50页 |
| 4.2.2 实验仪器 | 第50-51页 |
| 4.2.3 菌株、质粒与培养基 | 第51页 |
| 4.3 实验方法 | 第51-54页 |
| 4.3.1 突变株SmTGase酶原基因的克隆与序列比对 | 第51-52页 |
| 4.3.2 SmTGase酶原基因表达水平的分析 | 第52-54页 |
| 4.4 实验结果及讨论 | 第54-57页 |
| 4.4.1 SmTGase酶原基因的克隆与序列比对 | 第54-55页 |
| 4.4.2 SmTGase酶原基因的表达水平分析 | 第55-57页 |
| 4.5 本章小结 | 第57-59页 |
| 结论与展望 | 第59-61页 |
| 一. 全文总结 | 第59-60页 |
| 二. 本文创新点 | 第60页 |
| 三. 展望 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-69页 |
| 硕士在读期间撰写的论文和专利 | 第69-70页 |
| 致谢 | 第70-71页 |
