| 摘要 | 第7-8页 |
| ABSTRACT | 第8页 |
| 第一章 绪论 | 第9-20页 |
| 1 国内外柑橘病害的发生及防治 | 第9-14页 |
| 1.1 柑橘病害的发生 | 第9-11页 |
| 1.1.1 柑橘主要病害 | 第9-10页 |
| 1.1.2 柑橘青绿霉发病症状 | 第10页 |
| 1.1.3 柑橘青绿霉侵染特性 | 第10-11页 |
| 1.1.4 影响柑橘果实发病的因素 | 第11页 |
| 1.2 柑橘病害防治主措施 | 第11-14页 |
| 1.2.1 化学防治 | 第12-13页 |
| 1.2.2 物理防治 | 第13页 |
| 1.2.3 生物防治 | 第13-14页 |
| 2 大型真菌在植物病害防治中的作用 | 第14-17页 |
| 2.1 大型真菌抑菌活性成分的研究 | 第15-16页 |
| 2.2 大型真菌液体发酵方法的研究状况 | 第16-17页 |
| 3 研究目的和意义 | 第17-19页 |
| 4 技术路线图 | 第19-20页 |
| 第二章 裸脚菇属菌发酵液抑菌活性及对柑橘青绿霉病的抑制作用 | 第20-32页 |
| 1 材料与方法 | 第20-23页 |
| 1.1 材料 | 第20-21页 |
| 1.1.1 供试菌株 | 第20页 |
| 1.1.2 培养基 | 第20页 |
| 1.1.3 仪器 | 第20-21页 |
| 1.2 方法 | 第21-23页 |
| 1.2.1 菌株的活化 | 第21页 |
| 1.2.2 菌液的制备 | 第21-22页 |
| 1.2.2.1 意大利、指状青霉菌吸光值-孢子数曲线的建立 | 第21页 |
| 1.2.2.2 菌悬液的制备 | 第21-22页 |
| 1.2.3 裸脚菇属大型真菌的液体摇瓶发酵 | 第22页 |
| 1.2.4 菌株发酵液活性物质的萃取制备 | 第22页 |
| 1.2.5 抑菌谱测定 | 第22页 |
| 1.2.6 抑制青绿霉菌丝的MIC和MFC的测定 | 第22-23页 |
| 1.2.7 发酵液活性物对青绿霉孢子萌发的影响 | 第23页 |
| 1.2.8 发酵液活性物对病原菌丝形态的影响 | 第23页 |
| 1.2.9 数据统计分析 | 第23页 |
| 2 结果与分析 | 第23-31页 |
| 2.1 发酵液抑制多种病原菌的活性 | 第23-28页 |
| 2.2 抑制青绿霉孢子萌发的作用 | 第28页 |
| 2.3 抑制青绿霉菌菌丝的MIC和MFC | 第28-30页 |
| 2.4 对意大利青霉菌丝形态的影响 | 第30-31页 |
| 3 小结与讨论 | 第31-32页 |
| 第三章 裸脚菇属菌株产活性物的液体发酵工艺 | 第32-57页 |
| 1 材料与方法 | 第32-37页 |
| 1.1 材料 | 第32-33页 |
| 1.1.1 供试菌株 | 第32页 |
| 1.1.2 培养基 | 第32页 |
| 1.1.3 仪器 | 第32-33页 |
| 1.2 方法 | 第33-37页 |
| 1.2.1 菌株的种子液培养 | 第33页 |
| 1.2.2 菌丝干重及发酵液抑菌活性的测定 | 第33页 |
| 1.2.3 裸脚菇属菌株摇瓶发酵工艺优化 | 第33-35页 |
| 1.2.3.1 碳、氮源的选择优化 | 第33-34页 |
| 1.2.3.2 维生素和植物生长调节剂的添加优化 | 第34页 |
| 1.2.3.3 发酵条件优化 | 第34页 |
| 1.2.3.3.1 装液量的优化 | 第34页 |
| 1.2.3.3.2 发酵初始p H的优化 | 第34页 |
| 1.2.3.3.3 接种量的优化 | 第34页 |
| 1.2.3.3.4 发酵温度的优化 | 第34页 |
| 1.2.3.3.5 发酵周期 | 第34页 |
| 1.2.3.4 Plackett-Burman设计试验 | 第34-35页 |
| 1.2.3.5 最陡爬坡设计试验 | 第35页 |
| 1.2.3.6 Box-Behnken设计试验 | 第35页 |
| 1.2.3.7 模型验证 | 第35页 |
| 1.2.4 发酵罐放大培养及其产活性物质的动力学 | 第35-37页 |
| 1.2.4.1 发酵液还原糖含量的DNS法测定 | 第36页 |
| 1.2.4.2 氨基氮含量的测定 | 第36-37页 |
| 1.2.4.3 发酵液次级代谢产物的HPLC法检测 | 第37页 |
| 1.2.5 数据统计分析 | 第37页 |
| 2 结果与分析 | 第37-56页 |
| 2.1 液体摇瓶发酵碳、氮源的选择 | 第37-38页 |
| 2.2 维生素对液体摇瓶发酵的影响 | 第38-39页 |
| 2.2.1 维生素B_6 | 第38页 |
| 2.2.2 维生素B_1 | 第38-39页 |
| 2.3 植物生长调节剂对液体摇瓶发酵的影响 | 第39-42页 |
| 2.3.1 吲哚乙酸IAA | 第39页 |
| 2.3.2 吲哚丁酸IBA | 第39-40页 |
| 2.3.3 萘乙酸NAA | 第40-41页 |
| 2.3.4 细胞分裂素 6-BA | 第41页 |
| 2.3.5 赤霉素GA | 第41-42页 |
| 2.4 发酵条件对液体摇瓶发酵的影响 | 第42-45页 |
| 2.4.1 装液量 | 第42页 |
| 2.4.2 初始pH | 第42-43页 |
| 2.4.3 接种量 | 第43-44页 |
| 2.4.4 发酵温度 | 第44页 |
| 2.4.5 发酵周期 | 第44-45页 |
| 2.5 产活性物质的摇瓶发酵工艺 | 第45-50页 |
| 2.5.1 Plackett-Burman显著因素的确定 | 第45-46页 |
| 2.5.2 最陡爬坡显著因素水平的确定 | 第46-47页 |
| 2.5.3 Box-Behnken响应面分析及最优培养条件的确定 | 第47-49页 |
| 2.5.4 最优摇瓶发酵工艺的验证 | 第49-50页 |
| 2.6 15L发酵罐放大发酵 | 第50-56页 |
| 2.6.1 葡萄糖标准曲线 | 第50-51页 |
| 2.6.2 发酵液中还原糖与氨基氮含量的变化 | 第51-52页 |
| 2.6.3 发酵液中DO与p H含量的变化 | 第52-53页 |
| 2.6.4 发酵液中菌丝生物量和病原抑制率的动态变化 | 第53-54页 |
| 2.6.5 所产活性物质种类和含量的动态变化 | 第54-56页 |
| 3 小结与讨论 | 第56-57页 |
| 第四章 裸脚菇属菌株发酵所产抑菌活性物质的分离纯化 | 第57-64页 |
| 1 材料与方法 | 第57-59页 |
| 1.1 材料 | 第57-58页 |
| 1.1.1 供试菌株 | 第57页 |
| 1.1.2 培养基 | 第57页 |
| 1.1.3 试剂 | 第57页 |
| 1.1.4 仪器 | 第57-58页 |
| 1.2 方法 | 第58-59页 |
| 1.2.1 发酵液的预处理 | 第58页 |
| 1.2.2 活性物质的萃取 | 第58页 |
| 1.2.3 萃取物的硅胶柱层析 | 第58-59页 |
| 1.2.4 活性物质的硅胶板制备和半制备液相纯化 | 第59页 |
| 1.2.5 活性物质的HPLC检测 | 第59页 |
| 1.2.6 抑制柑橘青绿霉菌菌丝生长的抑菌率测定 | 第59页 |
| 2 结果与分析 | 第59-63页 |
| 2.1 不同极性溶剂对发酵液活性物质的萃取效果 | 第59-60页 |
| 2.2 发酵液乙酸乙酯萃取物硅胶柱层析后的活性组分 | 第60-61页 |
| 2.2.1 乙酸乙酯萃取物组分第一次层析分离及抑菌活性 | 第60-61页 |
| 2.2.2 乙酸乙酯萃取物组分第二次层析分离及抑菌活性 | 第61页 |
| 2.3 硅胶板制备和半制备液相纯化的活性成分 | 第61-62页 |
| 2.4 活性成分的纯度和抑制柑橘青绿霉菌菌丝生长的活性 | 第62-63页 |
| 3 小结与讨论 | 第63-64页 |
| 第五章 结论与展望 | 第64-65页 |
| 1 结论 | 第64页 |
| 2 展望 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-70页 |
| 致谢 | 第70-71页 |
| 攻读硕士学位期间发表的论文 | 第71-72页 |
| 附录 | 第72-74页 |
