| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-9页 |
| 第一章 绪论 | 第9-17页 |
| ·γ-谷氨酰胺转肽酶(GGT)的概述 | 第9-11页 |
| ·GGT的来源及分布 | 第9页 |
| ·GGT的催化特性 | 第9-10页 |
| ·GGT的结构 | 第10页 |
| ·GGT的制备 | 第10-11页 |
| ·GGT的应用前景 | 第11页 |
| ·L-茶氨酸概述 | 第11-15页 |
| ·L-茶氨酸的分布 | 第11-12页 |
| ·L-茶氨酸的理化特性 | 第12页 |
| ·L-茶氨酸的作用及应用前景 | 第12-14页 |
| ·L-茶氨酸的制备方法 | 第14-15页 |
| ·本课题立题依据和意义 | 第15-16页 |
| ·本课题主要研究内容 | 第16-17页 |
| 第二章 材料和方法 | 第17-24页 |
| ·实验材料 | 第17-18页 |
| ·菌种和质粒 | 第17页 |
| ·主要试剂 | 第17页 |
| ·主要仪器 | 第17页 |
| ·培养基 | 第17-18页 |
| ·实验方法 | 第18-22页 |
| ·粗酶液制备 | 第18页 |
| ·重组E. coli/BL21(DE3)-ggt的 3 L罐高密度发酵培养 | 第18-19页 |
| ·B. brevis pSVEB-ggt表达载体的构建 | 第19-21页 |
| ·GGT补料法合成L-茶氨酸的工艺 | 第21页 |
| ·L-茶氨酸纯化工艺 | 第21-22页 |
| ·分析方法 | 第22-24页 |
| ·GGT酶活力测定 | 第22页 |
| ·细胞光密度(OD600)的测定 | 第22页 |
| ·蛋白浓度的测定 | 第22-23页 |
| ·SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE) | 第23页 |
| ·L-茶氨酸的检测 | 第23-24页 |
| 第三章 结果和讨论 | 第24-49页 |
| ·重组大肠杆菌 3 L罐生产GGT工艺优化与酶学定性 | 第24-31页 |
| ·诱导温度对GGT生产的影响 | 第24-26页 |
| ·乳糖流加速率对 GGT 生产的影响 | 第26-27页 |
| ·甘氨酸浓度对GGT生产的影响 | 第27-29页 |
| ·重组GGT的分离纯化 | 第29-30页 |
| ·重组GGT的酶学定性 | 第30-31页 |
| ·GGT在B. brevis中的表达 | 第31-37页 |
| ·B. brevis重组表达载体pSVEB-ggt的构建 | 第32页 |
| ·重组菌B. brevis/pSVEB-ggt的构建与培养 | 第32-33页 |
| ·重组菌B. brevis/pSVEB-ggt的摇瓶发酵优化 | 第33-37页 |
| ·重组菌B. brevis/pSVEB-ggt的 3 L罐发酵研究 | 第37页 |
| ·补料法合成L-茶氨酸的工艺优化 | 第37-44页 |
| ·酶转化生产L-茶氨酸补料初始条件的确定 | 第38-40页 |
| ·酶转化生产L-茶氨酸恒速补料策略研究 | 第40-42页 |
| ·酶转化生产L-茶氨酸变速补料策略研究 | 第42-43页 |
| ·不同补料工艺的比较研究 | 第43-44页 |
| ·L-茶氨酸的分离纯化 | 第44-49页 |
| ·活性炭预处理 | 第44页 |
| ·离子交换工艺 | 第44-48页 |
| ·L-茶氨酸的结晶 | 第48-49页 |
| 主要结论与展望 | 第49-51页 |
| 致谢 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-57页 |
| 附录: 作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第57页 |
