| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 缩略符号说明 | 第8-13页 |
| 第一章 绪论 | 第13-32页 |
| ·食源性致病菌及其检测技术现状 | 第13-15页 |
| ·微生物检测法 | 第14页 |
| ·仪器分析法 | 第14页 |
| ·分子生物学方法 | 第14页 |
| ·免疫学方法 | 第14-15页 |
| ·寡核苷酸适配体 | 第15-27页 |
| ·寡核苷酸适配体的起源 | 第15-16页 |
| ·寡核苷酸适配体的特点 | 第16页 |
| ·寡核苷酸适配体与抗体相比的优势 | 第16-17页 |
| ·寡核苷酸适配体的筛选方法 | 第17-22页 |
| ·寡核苷酸适配体的应用 | 第22-27页 |
| ·纳米技术 | 第27-29页 |
| ·半导体量子点及其应用 | 第27-28页 |
| ·上转换荧光纳米材料及其应用 | 第28-29页 |
| ·磁性纳米材料及其应用 | 第29页 |
| ·立题背景及意义 | 第29-30页 |
| ·本论文主要研究内容 | 第30-32页 |
| 第二章 特异性识别副溶血性弧菌寡核苷酸适配体的筛选 | 第32-44页 |
| ·前言 | 第32-33页 |
| ·材料与设备 | 第33页 |
| ·主要试剂与材料 | 第33页 |
| ·主要仪器与设备 | 第33页 |
| ·随机单链 DNA（ssDNA）文库和引物的构建 | 第33页 |
| ·实验方法 | 第33-35页 |
| ·菌种的处理 | 第33-34页 |
| ·副溶血性弧菌适配体的筛选 | 第34-35页 |
| ·结果与讨论 | 第35-43页 |
| ·PCR 条件优化 | 第35-36页 |
| ·筛选轮数的优化 | 第36-37页 |
| ·序列分析 | 第37-38页 |
| ·亲和力分析 | 第38-40页 |
| ·特异性分析 | 第40-41页 |
| ·解离常数的计算 | 第41-42页 |
| ·保守序列分析 | 第42-43页 |
| ·本章小结 | 第43-44页 |
| 第三章 特异性识别鼠伤寒沙门氏菌寡核苷酸适配体的筛选及应用 | 第44-59页 |
| ·前言 | 第44-45页 |
| ·材料与设备 | 第45-46页 |
| ·主要试剂与材料 | 第45页 |
| ·主要仪器与设备 | 第45页 |
| ·随机单链 DNA（ssDNA）文库和引物的构建 | 第45-46页 |
| ·实验方法 | 第46-47页 |
| ·菌种的处理 | 第46页 |
| ·特异性识别鼠伤寒沙门氏菌的寡核苷酸适配体的筛选 | 第46页 |
| ·氨基化修饰的 Fe_3O_4磁性纳米颗粒的制备 | 第46页 |
| ·亲和素包被的磁性材料的制备 | 第46页 |
| ·适配体功能化的磁性材料的制备 | 第46页 |
| ·基于适配体目标物的检测 | 第46-47页 |
| ·结果讨论 | 第47-58页 |
| ·适配体筛选的主要步骤 | 第47-48页 |
| ·适配体筛选轮数优化 | 第48页 |
| ·序列分析 | 第48-49页 |
| ·亲和力分析 | 第49-51页 |
| ·特异性分析 | 第51-52页 |
| ·解离常数的计算 | 第52-53页 |
| ·保守序列分析 | 第53-54页 |
| ·基于适配体识别荧光分析法检测鼠伤寒沙门氏菌 | 第54-55页 |
| ·磁性纳米材料表征 | 第55-56页 |
| ·亲和素包被的磁性纳米材料的表征 | 第56-57页 |
| ·分析检测 | 第57-58页 |
| ·本章小结 | 第58-59页 |
| 第四章 基于双色上转换荧光标记-磁分离适配体识别同时检测两种食源性致病菌 | 第59-75页 |
| ·前言 | 第59-60页 |
| ·材料与设备 | 第60页 |
| ·主要试剂与材料 | 第60页 |
| ·主要仪器与设备 | 第60页 |
| ·实验方法 | 第60-62页 |
| ·菌种的活化与处理 | 第60-61页 |
| ·NaYF_4:Yb/Er, NaYF_4:Yb/Tm 上转换材料的制备 | 第61页 |
| ·NaYF_4:Yb/Er, NaYF_4:Yb/Tm 上转换材料的表面修饰 | 第61页 |
| ·氨基化修饰的 Fe_3O_4磁性纳米颗粒的制备 | 第61页 |
| ·亲和素包被的上转换材料和磁性材料的制备 | 第61-62页 |
| ·适配体功能化的上转换材料和磁性材料的制备 | 第62页 |
| ·目标物的检测 | 第62页 |
| ·实际样品检测 | 第62页 |
| ·结果与讨论 | 第62-74页 |
| ·分析与方法的原理 | 第62-63页 |
| ·所制备上转换纳米材料的表征 | 第63-68页 |
| ·亲和素包被的上转换纳米材料和磁性材料的表征 | 第68页 |
| ·适配体浓度的优化 | 第68-69页 |
| ·适配体修饰的磁性纳米材料添加量的优化 | 第69-70页 |
| ·反应时间的优化 | 第70-71页 |
| ·特异性研究 | 第71-72页 |
| ·同时检测两种致病菌及性能分析 | 第72-74页 |
| ·本章小结 | 第74-75页 |
| 第五章 基于适配体识别-量子点标记技术的流式细胞术同时检测两种致病菌 | 第75-85页 |
| ·前言 | 第75-76页 |
| ·材料与设备 | 第76页 |
| ·主要试剂与材料 | 第76页 |
| ·主要仪器与设备 | 第76页 |
| ·实验方法 | 第76-77页 |
| ·菌种的活化与处理 | 第76页 |
| ·CdTe 荧光量子点的合成 | 第76-77页 |
| ·制备量子点标记的核酸适配体探针 | 第77页 |
| ·结果与讨论 | 第77-84页 |
| ·基于适配体识别-量子点标记技术的流式细胞术同时检测两种致病菌的检测原理 | 第77-79页 |
| ·适配体功能化的量子点的表征 | 第79页 |
| ·QD-apt 复合物浓度的优化 | 第79-80页 |
| ·本检测方法在分别检测副溶血性弧菌和鼠伤寒沙门氏菌中的应用 | 第80-81页 |
| ·本检测方法在同时检测副溶血性弧菌和鼠伤寒沙门氏菌中的应用及性能分析 | 第81-84页 |
| ·本章小结 | 第84-85页 |
| 第六章 基于染料 AccuBlue 的食源性致病菌免标记适配体传感器研究 | 第85-93页 |
| ·前言 | 第85-86页 |
| ·材料与设备 | 第86页 |
| ·主要试剂与材料 | 第86页 |
| ·主要仪器与设备 | 第86页 |
| ·实验方法 | 第86-87页 |
| ·菌种的活化与处理 | 第86页 |
| ·基于适配体识别的免标记荧光检测方法 | 第86-87页 |
| ·实际样品前处理 | 第87页 |
| ·结果与讨论 | 第87-92页 |
| ·分析与方法的原理 | 第87-88页 |
| ·AccuBlue 染料浓度的优化 | 第88-89页 |
| ·AccuBlue 染料与适配体/互补链形成的双链 DNA 反应时间的优化 | 第89页 |
| ·基于染料 AccuBlue 的食源性致病菌免标记适配体传感器检测的性能分析 | 第89-92页 |
| ·本章小结 | 第92-93页 |
| 第七章 适配体与细菌结合机制的初步研究 | 第93-100页 |
| ·前言 | 第93页 |
| ·材料与设备 | 第93-94页 |
| ·主要试剂与材料 | 第93页 |
| ·主要仪器与设备 | 第93-94页 |
| ·实验方法 | 第94-96页 |
| ·菌种的培养 | 第94页 |
| ·菌体外膜蛋白的提取 | 第94页 |
| ·菌体脂多糖的提取 | 第94-95页 |
| ·SDS-PAGE 电泳验证 | 第95-96页 |
| ·亲和力测定 | 第96页 |
| ·结果讨论 | 第96-99页 |
| ·电泳结果分析 | 第96-97页 |
| ·亲和力分析 | 第97页 |
| ·解离常数的分析 | 第97-99页 |
| ·本章小结 | 第99-100页 |
| 主要结论与展望 | 第100-102页 |
| 主要结论 | 第100-101页 |
| 展望 | 第101-102页 |
| 本论文创新点 | 第102-103页 |
| 致谢 | 第103-104页 |
| 参考文献 | 第104-118页 |
| 附录: 作者在攻读博士学位期间发表的论文 | 第118-119页 |
