| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 目录 | 第8-14页 |
| 第1章 引言 | 第14-26页 |
| ·酯酶概述 | 第14-16页 |
| ·酯酶及其分类 | 第14页 |
| ·产酯酶微生物 | 第14-15页 |
| ·酯酶活性的测定方法 | 第15-16页 |
| ·定性检测法 | 第15-16页 |
| ·定量检测法 | 第16页 |
| ·微生物酯酶的研究概况 | 第16-21页 |
| ·产酯酶微生物菌种的筛选方法研究 | 第16-17页 |
| ·发酵产酯酶培养条件的研究 | 第17-19页 |
| ·培养基成分 | 第18页 |
| ·培养条件 | 第18页 |
| ·培养方式 | 第18-19页 |
| ·酯酶的酶学特性 | 第19-20页 |
| ·酯酶的分离纯化 | 第20-21页 |
| ·酯酶的提取 | 第20页 |
| ·酯酶的纯化 | 第20-21页 |
| ·微生物酯酶的应用研究 | 第21-23页 |
| ·酯酶在食品工业的应用 | 第21-22页 |
| ·酯酶对白酒香味的贡献 | 第21-22页 |
| ·酯酶对其他食品工业的贡献 | 第22页 |
| ·酯酶在其他领域中的应用 | 第22-23页 |
| ·酯酶在医药行业的应用 | 第22-23页 |
| ·酯化酶在环境保护中的应用 | 第23页 |
| ·本课题研究背景、意义和课题来源 | 第23-24页 |
| ·本课题研究内容 | 第24-26页 |
| 第2章 大曲酯酶产生菌的分离及鉴定 | 第26-38页 |
| ·材料 | 第26-28页 |
| ·大曲 | 第26页 |
| ·培养基 | 第26页 |
| ·仪器与试剂 | 第26-28页 |
| ·方法 | 第28-31页 |
| ·菌种初筛 | 第28页 |
| ·孢子悬液的制备 | 第28页 |
| ·菌种复筛 | 第28页 |
| ·粗酶液的制备 | 第28页 |
| ·酯酶活力测定 | 第28-30页 |
| ·平板透明圈法 | 第28页 |
| ·对硝基苯酚检测法 | 第28-30页 |
| ·菌株生长及产酯酶曲线的测定 | 第30页 |
| ·菌种形态学鉴定 | 第30页 |
| ·菌落形态观察 | 第30页 |
| ·菌体自然形态观察 | 第30页 |
| ·菌种分子学鉴定 | 第30-31页 |
| ·总 DNA 的提取 | 第30-31页 |
| ·PCR 扩增 | 第31页 |
| ·序列数据及其系统发育学分析 | 第31页 |
| ·结果与分析 | 第31-37页 |
| ·产酯酶菌株筛选结果 | 第31-32页 |
| ·初筛结果 | 第31-32页 |
| ·复筛结果 | 第32页 |
| ·菌株生长及产酯酶曲线 | 第32-33页 |
| ·菌种形态学鉴定 | 第33-34页 |
| ·菌种分子学鉴定 | 第34-37页 |
| ·PCR 产物的验证结果 | 第34页 |
| ·HSM 菌株的 18S rDNA 序列测定 | 第34-35页 |
| ·菌株 HSM 的系统发育分析 | 第35-37页 |
| ·小结 | 第37-38页 |
| 第3章 横梗霉产酯酶发酵条件优化 | 第38-56页 |
| ·材料 | 第38页 |
| ·菌种 | 第38页 |
| ·培养基 | 第38页 |
| ·仪器与试剂 | 第38页 |
| ·方法 | 第38-42页 |
| ·发酵液酶活测定方法 | 第38-39页 |
| ·发酵培养方法 | 第39页 |
| ·培养基的优化 | 第39-41页 |
| ·碳源的优化 | 第39页 |
| ·氮源的优化 | 第39页 |
| ·PB 试验设计 | 第39-40页 |
| ·Box-Behnken 试验设计 | 第40-41页 |
| ·培养条件的优化 | 第41-42页 |
| ·发酵温度对产酶的影响 | 第41页 |
| ·接种量对产酶的影响 | 第41页 |
| ·装液量对产酶的影响 | 第41页 |
| ·初始发酵 pH 值对产酶的影响 | 第41页 |
| ·转速对产酶的影响 | 第41-42页 |
| ·结果与分析 | 第42-54页 |
| ·培养基的优化 | 第42-51页 |
| ·碳源的优化 | 第42页 |
| ·氮源的优化 | 第42-44页 |
| ·Plackett-Buman 设计与分析 | 第44-46页 |
| ·Box-Behnken 设计与分析 | 第46-48页 |
| ·优化 | 第48-51页 |
| ·培养条件的优化 | 第51-54页 |
| ·发酵温度对产酶的影响 | 第51-52页 |
| ·接种量对产酶的影响 | 第52页 |
| ·装液量对产酶的影响 | 第52-53页 |
| ·初始发酵 pH 值对产酶的影响 | 第53-54页 |
| ·转速对产酶的影响 | 第54页 |
| ·小结 | 第54-56页 |
| 第4章 诱导剂对横梗霉 HSM 菌株产酯酶的影响 | 第56-66页 |
| ·材料 | 第56-57页 |
| ·菌株 | 第56页 |
| ·培养基 | 第56页 |
| ·仪器与试剂 | 第56-57页 |
| ·方法 | 第57-58页 |
| ·酯酶活性的测定 | 第57页 |
| ·发酵培养方法 | 第57页 |
| ·不同诱导剂对菌株产酶的影响研究 | 第57-58页 |
| ·脂肪酸乙酯对产酶的影响 | 第57页 |
| ·油脂类物质对产酶的影响 | 第57页 |
| ·表面活性剂对产酶的影响 | 第57页 |
| ·聚乙二醇类化合物对产酶的影响 | 第57-58页 |
| ·离子络合剂对产酶的影响 | 第58页 |
| ·诱导剂对 HSM 菌株发酵产酯酶的影响 | 第58页 |
| ·结果与分析 | 第58-64页 |
| ·不同诱导剂对菌株产酶的影响 | 第58-63页 |
| ·脂肪酸乙酯对 HSM 菌株产酶的影响 | 第58-59页 |
| ·油酯类物质对产酶的影响 | 第59-60页 |
| ·表面活性剂对产酶的影响 | 第60-61页 |
| ·聚乙二醇类化合物对产酶的影响 | 第61-62页 |
| ·离子络合剂 EDTA 对产酶的影响 | 第62-63页 |
| ·诱导剂对 HSM 菌株产酯酶的影响 | 第63-64页 |
| ·小结 | 第64-66页 |
| 第5章 横梗霉酯酶的分离纯化 | 第66-80页 |
| ·材料 | 第66-68页 |
| ·菌种 | 第66页 |
| ·培养基 | 第66页 |
| ·仪器与试剂 | 第66-67页 |
| ·主要试剂的配制 | 第67-68页 |
| ·蛋白质含量测定试剂的配制 | 第67页 |
| ·SDS-PAGE 试剂的配制 | 第67-68页 |
| ·方法 | 第68-72页 |
| ·酯酶酶活测定方法 | 第68页 |
| ·酯酶发酵培养方法 | 第68-69页 |
| ·蛋白质浓度的测定方法 | 第69-70页 |
| ·酯酶分离纯化方法 | 第70-72页 |
| ·酯酶的分离纯化技术路线 | 第70页 |
| ·酯酶的提取（粗酶液的制备） | 第70-71页 |
| ·硫酸铵分级盐析沉淀 | 第71页 |
| ·硫酸铵沉淀的透析除盐 | 第71页 |
| ·DEAE Sepharose Fast Flow 柱层析分离 | 第71-72页 |
| ·SDS-PAGE 电泳 | 第72页 |
| ·结果与分析 | 第72-78页 |
| ·硫酸铵分级沉淀 | 第72-73页 |
| ·DEAE Sepharose Fast Flow 柱层析静态吸附 | 第73-74页 |
| ·DEAE Sepharose Fast Flow 柱层析 | 第74-78页 |
| ·小结 | 第78-80页 |
| 第6章 横梗霉酯酶酶学特性的研究 | 第80-88页 |
| ·材料 | 第80页 |
| ·菌种 | 第80页 |
| ·培养基 | 第80页 |
| ·仪器与试剂 | 第80页 |
| ·方法 | 第80-82页 |
| ·酯酶酶活测定方法 | 第80页 |
| ·酯酶发酵培养方法 | 第80-81页 |
| ·酯酶的酶学特性研究 | 第81-82页 |
| ·最适反应温度的确定 | 第81页 |
| ·温度对酶稳定性的影响 | 第81页 |
| ·最适反应 pH 的确定 | 第81页 |
| ·pH 对酶稳定性的影响 | 第81页 |
| ·最适反应盐度的确定 | 第81页 |
| ·金属离子对酶活力的影响 | 第81-82页 |
| ·结果与分析 | 第82-86页 |
| ·最适反应温度的确定 | 第82页 |
| ·温度对酶稳定性的影响 | 第82-83页 |
| ·最适反应 pH 的确定 | 第83-84页 |
| ·pH 对酶稳定性的影响 | 第84-85页 |
| ·最适反应盐度的确定 | 第85页 |
| ·金属离子对酶活力的影响 | 第85-86页 |
| ·小结 | 第86-88页 |
| 第7章 结论及展望 | 第88-92页 |
| ·结论 | 第88-89页 |
| ·展望 | 第89-92页 |
| 参考文献 | 第92-100页 |
| 致谢 | 第100-101页 |
| 发表论文 | 第101页 |
