| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 缩写词表 | 第7-11页 |
| 第1章 绪论 | 第11-19页 |
| 1.1 论文的研究背景 | 第11-12页 |
| 1.1.1 研究背景 | 第11页 |
| 1.1.2 选题意义 | 第11-12页 |
| 1.2 乳制品中病原微生物研究进展 | 第12-14页 |
| 1.2.1 乳及乳制品中常见病原微生物来源 | 第12页 |
| 1.2.2 常见乳制品中致病微生物概述 | 第12-14页 |
| 1.3 乳及乳制品病原微生物检测方法 | 第14-18页 |
| 1.3.1 常规微生物培养与生化检测方法 | 第14页 |
| 1.3.2 仪器检测方法 | 第14-15页 |
| 1.3.3 核酸检测方法 | 第15-16页 |
| 1.3.4 以免疫学为基础的检测方法 | 第16-18页 |
| 1.3.5 ATP生物发光法 | 第18页 |
| 1.3.6 生物传感器 | 第18页 |
| 1.3.7 细菌直接计数法 | 第18页 |
| 1.4 研究内容 | 第18-19页 |
| 第2章 沙门氏菌外膜蛋白表达纯化 | 第19-25页 |
| 2.1 引言 | 第19页 |
| 2.2 材料 | 第19-20页 |
| 2.2.1 菌株及载体 | 第19页 |
| 2.2.2 试剂 | 第19-20页 |
| 2.3 方法 | 第20-21页 |
| 2.3.1 菌株培养与细菌基因组DNA提取 | 第20页 |
| 2.3.2 沙门氏菌PagC基因扩增 | 第20页 |
| 2.3.3 沙门氏菌PagC基因原核表达载体构建及鉴定 | 第20页 |
| 2.3.4 沙门氏菌PagC蛋白的诱导表达及鉴定 | 第20-21页 |
| 2.3.5 包涵体的纯化 | 第21页 |
| 2.4 结果与分析 | 第21-23页 |
| 2.4.1 沙门氏菌PagC基因原核表达构建 | 第21-22页 |
| 2.4.2 沙门氏菌PagC蛋白表达 | 第22-23页 |
| 2.5 讨论 | 第23-24页 |
| 2.6 本章小结 | 第24-25页 |
| 第3章 沙门氏菌免疫磁珠制备 | 第25-33页 |
| 3.1 引言 | 第25页 |
| 3.2 材料 | 第25页 |
| 3.2.1 试验菌株及培养基 | 第25页 |
| 3.2.2 试验溶液及配制 | 第25页 |
| 3.3 方法 | 第25-28页 |
| 3.3.1 PagC抗血清制备 | 第25-26页 |
| 3.3.2 多克隆抗体的纯化及定量 | 第26页 |
| 3.3.3 测定PagC抗血清和纯化后抗体效价 | 第26-27页 |
| 3.3.4 重组PagC蛋白Western-blotting验证 | 第27页 |
| 3.3.5 重组PagC蛋白免疫磁珠制备 | 第27页 |
| 3.3.6 重组蛋白的免疫磁珠条件优化 | 第27页 |
| 3.3.7 免疫磁珠富集沙门氏菌能力的确定 | 第27-28页 |
| 3.3.8 免疫磁珠富集沙门氏菌效果测定 | 第28页 |
| 3.4 结果与分析 | 第28-32页 |
| 3.4.1 测定重组PagC蛋白抗血清和纯化后抗体效价 | 第28-29页 |
| 3.4.2 重组PagC蛋白Western-blotting结果 | 第29-30页 |
| 3.4.3 PagC蛋白免疫磁珠制备与优化 | 第30页 |
| 3.4.4 PagC蛋白免疫磁珠富集沙门氏菌的效率确定 | 第30-31页 |
| 3.4.5 PagC蛋白免疫磁珠富集沙门氏菌的特异性分析 | 第31-32页 |
| 3.5 讨论 | 第32页 |
| 3.6 本章小结 | 第32-33页 |
| 第4章 IMBs-qPCR检测乳制品中沙门氏菌 | 第33-37页 |
| 4.1 引言 | 第33页 |
| 4.2 材料与方法 | 第33-34页 |
| 4.2.1 试验材料 | 第33页 |
| 4.2.2 荧光定量PCR试剂 | 第33页 |
| 4.2.3 细菌DNA提取 | 第33页 |
| 4.2.4 荧光定量PCR | 第33-34页 |
| 4.2.5 PagC基因荧光定量PCR抗干扰试验分析 | 第34页 |
| 4.2.6 免疫磁珠富集生乳中沙门氏菌及荧光定量检测沙门氏菌 | 第34页 |
| 4.3 结果与分析 | 第34-35页 |
| 4.3.1 荧光定量PCR检测沙门氏菌的可重复性分析 | 第34页 |
| 4.3.2 荧光定量PCR检测沙门氏菌的干扰性分析 | 第34-35页 |
| 4.3.3 IMBs-荧光定量PCR检测生乳中沙门氏菌 | 第35页 |
| 4.4 讨论 | 第35-36页 |
| 4.5 本章小结 | 第36-37页 |
| 第5章 多重PCR检测乳制品中沙门氏菌 | 第37-43页 |
| 5.1 引言 | 第37页 |
| 5.2 材料 | 第37-39页 |
| 5.2.1 菌株 | 第37页 |
| 5.2.2 试剂 | 第37页 |
| 5.2.3 菌株培养 | 第37页 |
| 5.2.4 细菌基因组DNA提取 | 第37页 |
| 5.2.5 沙门氏菌特异引物 | 第37-38页 |
| 5.2.6 多重PCR体系优化 | 第38-39页 |
| 5.2.7 乳制品中的沙门氏菌DNA提取方法 | 第39页 |
| 5.3 结果与分析 | 第39-41页 |
| 5.3.1 多重PCR条件优化 | 第39-40页 |
| 5.3.2 多重PCR检测乳制品中的沙门氏菌 | 第40-41页 |
| 5.4 讨论 | 第41-42页 |
| 5.5 本章小结 | 第42-43页 |
| 第6章 比较IMBs-qPCR和多重PCR检测乳制品中沙门氏菌的检测效率 | 第43-45页 |
| 6.1 引言 | 第43页 |
| 6.2 材料 | 第43页 |
| 6.2.1 菌株 | 第43页 |
| 6.3 方法 | 第43页 |
| 6.3.1 IMBs-qPCR检测沙门氏菌 | 第43页 |
| 6.3.2 多重PCR检测乳制品中的沙门氏菌 | 第43页 |
| 6.4 结果与分析 | 第43-44页 |
| 6.5 结论 | 第44-45页 |
| 结论 | 第45-47页 |
| 参考文献 | 第47-52页 |
| 致谢 | 第52-53页 |
| 个人简历 | 第53页 |
