| 中文摘要 | 第4-5页 |
| abstract | 第5页 |
| 第1章 文献综述 | 第10-21页 |
| 1.1 5-氨基乙酰丙酸的简介 | 第10-11页 |
| 1.1.1 5-ALA的理化性质 | 第10页 |
| 1.1.2 5-ALA的稳定性 | 第10-11页 |
| 1.2 5-ALA的应用 | 第11-12页 |
| 1.2.1 5-ALA在医学上的应用 | 第11页 |
| 1.2.2 5-ALA在农业领域的应用 | 第11-12页 |
| 1.3 5-ALA的生产 | 第12-17页 |
| 1.3.1 化学法合成5-ALA | 第12页 |
| 1.3.2 微生物法合成5-ALA | 第12-17页 |
| 1.3.2.1 5-ALA的生物合成途径 | 第12-17页 |
| 1.3.2.1.1 C4途径 | 第12-14页 |
| 1.3.2.1.2 C5途径 | 第14-17页 |
| 1.4 血红素 | 第17-18页 |
| 1.4.1 血红素的生理功能 | 第17页 |
| 1.4.2 谷氨酸棒杆菌血红素的生物合成途径 | 第17-18页 |
| 1.5 选题背景及主要技术路线 | 第18-21页 |
| 1.5.1 选题背景 | 第18-20页 |
| 1.5.2 研究思路 | 第20-21页 |
| 第2章 血红素合成途径扰动对5-ALA合成的影响 | 第21-49页 |
| 2.1 实验材料 | 第21-27页 |
| 2.1.1 菌种和质粒 | 第21-22页 |
| 2.1.2 实验仪器 | 第22-23页 |
| 2.1.3 实验试剂 | 第23-25页 |
| 2.1.4 培养基 | 第25-26页 |
| 2.1.5 溶液 | 第26-27页 |
| 2.2 实验方法 | 第27-39页 |
| 2.2.1 大肠杆菌DH5α感受态细胞的制备与转化 | 第27-28页 |
| 2.2.2 谷氨酸棒杆菌感受态的制备与转化 | 第28-29页 |
| 2.2.3 基因组DNA的提取 | 第29页 |
| 2.2.4 质粒DNA提取(碱裂解法) | 第29-30页 |
| 2.2.5 DNA片段的扩增 | 第30-31页 |
| 2.2.6 琼脂糖凝胶电泳 | 第31-32页 |
| 2.2.7 DNA片段的纯化和回收 | 第32-33页 |
| 2.2.8 酶切和酶连 | 第33页 |
| 2.2.9 菌落PCR | 第33-35页 |
| 2.2.10 谷氨酸棒杆菌基因敲除以及弱化步骤 | 第35-37页 |
| 2.2.11 发酵液中菌体浓度和葡萄糖浓度的测定 | 第37页 |
| 2.2.12 发酵液中5-ALA的测定 | 第37-38页 |
| 2.2.13 发酵液中有机酸的测定 | 第38页 |
| 2.2.14 发酵液中氨基酸的测定 | 第38-39页 |
| 2.3 实验结果与讨论 | 第39-48页 |
| 2.3.1 heme合成途径部分基因的弱表达对5-ALA合成的影响 | 第39-43页 |
| 2.3.2 heme合成途径部分基因诱导表达对5-ALA合成影响 | 第43-48页 |
| 2.4 本章小结 | 第48-49页 |
| 第3章 谷氨酸棒杆菌5-ALA运输蛋白鉴定与过表达 | 第49-55页 |
| 3.1 实验材料 | 第49-50页 |
| 3.1.1 菌种与质粒 | 第49页 |
| 3.1.2 实验仪器 | 第49页 |
| 3.1.3 实验试剂 | 第49页 |
| 3.1.4 培养基 | 第49-50页 |
| 3.1.5 溶液 | 第50页 |
| 3.2 实验结果与讨论 | 第50-53页 |
| 3.2.1 谷氨酸棒杆菌5-ALA运输蛋白的鉴定 | 第50-51页 |
| 3.2.2 谷氨酸棒杆菌5-ALA运输蛋白的过表达 | 第51-53页 |
| 3.3 本章小结 | 第53-55页 |
| 第4章 甘氨酸途径对5-ALA合成的影响 | 第55-62页 |
| 4.1 实验材料 | 第56页 |
| 4.1.1 菌种与质粒 | 第56页 |
| 4.1.2 实验仪器 | 第56页 |
| 4.1.3 实验试剂 | 第56页 |
| 4.1.4 培养基 | 第56页 |
| 4.1.5 溶液 | 第56页 |
| 4.2 实验结果与讨论 | 第56-61页 |
| 4.2.1 甘氨酸是5-ALA合成途径中的关键因素 | 第56-58页 |
| 4.2.2 丝氨酸添加对5-ALA合成的影响 | 第58-59页 |
| 4.2.3 glyA反应对5-ALA合成的影响 | 第59-61页 |
| 4.3 本章小结 | 第61-62页 |
| 第5章 C5途径外源关键酶基因的表达对5-ALA合成的影响 | 第62-68页 |
| 5.1 实验材料 | 第62-63页 |
| 5.1.1 菌种与质粒 | 第62页 |
| 5.1.2 实验仪器 | 第62-63页 |
| 5.1.3 实验试剂 | 第63页 |
| 5.1.4 培养基 | 第63页 |
| 5.1.5 溶液 | 第63页 |
| 5.2 实验结果与讨论 | 第63-67页 |
| 5.2.1 C5途径引进对5-ALA合成的影响 | 第63-67页 |
| 5.3 本章小结 | 第67-68页 |
| 第6章 结论与展望 | 第68-70页 |
| 6.1 结论及创新点 | 第68-69页 |
| 6.1.1 主要结论 | 第68-69页 |
| 6.1.2 创新点 | 第69页 |
| 6.2 展望 | 第69-70页 |
| 参考文献 | 第70-79页 |
| 发表论文和科研情况 | 第79-80页 |
| 附录 | 第80-82页 |
| 致谢 | 第82-83页 |
