| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 目录 | 第8-11页 |
| 英文缩略表 | 第11-13页 |
| 1. 引言 | 第13-21页 |
| ·研究背景及意义 | 第13-14页 |
| ·研究现状 | 第14-21页 |
| ·TRAIL 结构及其受体 | 第14-15页 |
| ·TRAIL 诱导细胞凋亡机制 | 第15页 |
| ·重组 TRAIL 国内外研究现状 | 第15-16页 |
| ·TRAIL 在肿瘤治疗中的应用 | 第16页 |
| ·融合蛋白连接肽的研究 | 第16-17页 |
| ·课题研究目的 | 第17-18页 |
| ·课题研究内容及技术路线 | 第18-21页 |
| 2. 含不同连接肽 TRAIL-Fc 表达载体的构建及其在 E.coli 的表达 | 第21-41页 |
| ·材料与仪器 | 第21-23页 |
| ·主要材料 | 第21页 |
| ·主要试剂 | 第21页 |
| ·主要仪器 | 第21-22页 |
| ·主要试剂配制 | 第22-23页 |
| ·实验所用引物序列 | 第23页 |
| ·实验方法 | 第23-31页 |
| ·前期实验结果及断裂位点初步判断 | 第23-25页 |
| ·连接肽 Linker 设计方案 | 第25页 |
| ·重组质粒 pET-22b-TRAIL-Fc 的构建与鉴定 | 第25-29页 |
| ·重组质粒 pET-22b-TRAIL-Fc 在 E.coli BL21DE3 plysS 中表达 | 第29-31页 |
| ·结果与分析 | 第31-39页 |
| ·重组质粒 pET-22b-TRAIL-Fc 的构建与鉴定 | 第31-33页 |
| ·TRAIL-Fc 的表达与初步鉴定 | 第33-39页 |
| ·讨论 | 第39-41页 |
| 3. 发酵条件优化 | 第41-47页 |
| ·材料与仪器 | 第41-42页 |
| ·主要试剂 | 第41页 |
| ·主要试剂配制 | 第41-42页 |
| ·主要仪器 | 第42页 |
| ·实验方法 | 第42-43页 |
| ·参数检测与分析方法 | 第42-43页 |
| ·工程菌的发酵 | 第43页 |
| ·结果与分析 | 第43-44页 |
| ·发酵工艺研究结果 | 第43-44页 |
| ·发酵条件验证试验 | 第44页 |
| ·讨论 | 第44-47页 |
| 4. 重组蛋白 TRAIL-Fc 纯化及鉴定 | 第47-57页 |
| ·材料与仪器 | 第47-48页 |
| ·主要材料 | 第47页 |
| ·主要仪器 | 第47页 |
| ·主要试剂配制 | 第47-48页 |
| ·实验方法 | 第48-51页 |
| ·融合蛋白 TRAIL-Fc 的纯化研究 | 第48-50页 |
| ·融合蛋白 TRAIL-Fc 的鉴定 | 第50-51页 |
| ·结果与分析 | 第51-54页 |
| ·TRAIL-Fc 纯化研究结果 | 第51-52页 |
| ·TRAIL-Fc 的鉴定 | 第52-54页 |
| ·讨论 | 第54-57页 |
| 5. TRAIL-Fc 生物活性的检测 | 第57-65页 |
| ·材料与仪器 | 第57-58页 |
| ·主要试剂 | 第57页 |
| ·主要试剂配制 | 第57页 |
| ·主要仪器 | 第57页 |
| ·细胞株及实验小鼠 | 第57-58页 |
| ·样品及其稀释 | 第58页 |
| ·实验方法 | 第58-59页 |
| ·体外抗肿瘤活性 | 第58-59页 |
| ·体内抗肿瘤活性 | 第59页 |
| ·结果与分析 | 第59-62页 |
| ·TRAIL-Fc 的体外抗肿瘤活性测定结果 | 第59-61页 |
| ·TRAIL-Fc 的体内抗肿瘤活性测定结果 | 第61-62页 |
| ·讨论 | 第62-65页 |
| 6. 结论与展望 | 第65-67页 |
| ·结论 | 第65页 |
| ·展望 | 第65-67页 |
| 致谢 | 第67-68页 |
| 参考文献 | 第68-71页 |
| 附录 | 第71-73页 |
| 附图 | 第73-74页 |
