| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 目录 | 第7-11页 |
| 第一章 绪论 | 第11-28页 |
| ·功能性甜味剂 | 第11页 |
| ·双果糖酐Ⅲ | 第11-16页 |
| ·双果糖酐Ⅲ 的结构和理化性质 | 第11-12页 |
| ·双果糖酐Ⅲ 的安全性 | 第12页 |
| ·双果糖酐Ⅲ 功能性质 | 第12-14页 |
| ·双果糖酐合成策略 | 第14-15页 |
| ·双果糖酐Ⅲ 国内外生产现状 | 第15-16页 |
| ·菊糖果糖转移酶的研究进展 | 第16-22页 |
| ·菊粉酶与菊糖果糖转移酶的概述 | 第16页 |
| ·菊糖果糖转移酶的微生物来源 | 第16-17页 |
| ·菊糖果糖转移酶的分离纯化 | 第17-18页 |
| ·菊糖果糖转移酶的酶学性质 | 第18-20页 |
| ·菊糖果糖转移酶基因工程研究进展 | 第20页 |
| ·菊糖果糖转移酶催化反应机理 | 第20-22页 |
| ·本课题立题依据及意义 | 第22页 |
| ·本课题研究思路与主要内容 | 第22-23页 |
| 参考文献 | 第23-28页 |
| 第二章 菊糖果糖转移酶产生菌的分离、筛选及鉴定 | 第28-39页 |
| ·前言 | 第28页 |
| ·材料与方法 | 第28-31页 |
| ·主要材料 | 第28页 |
| ·主要仪器 | 第28页 |
| ·样品采集 | 第28-29页 |
| ·培养基 | 第29页 |
| ·菌种富集 | 第29页 |
| ·菌种初筛 | 第29页 |
| ·菌种复筛 | 第29页 |
| ·菌株细胞形态观察 | 第29页 |
| ·菌株的生理、生化特性鉴定 | 第29页 |
| ·菌株的165 rDNA 序列分析 | 第29-30页 |
| ·双果糖酐Ⅲ 的检测方法 | 第30页 |
| ·菊糖果糖转移酶酶活测定 | 第30页 |
| ·产物鉴定 | 第30-31页 |
| ·结果与讨论 | 第31-36页 |
| ·菌种初筛 | 第31页 |
| ·菌种复筛 | 第31页 |
| ·细胞形态观察 | 第31-32页 |
| ·菌株SK8.001 的生理生化特征 | 第32-33页 |
| ·SK8.001 165 rDNA 序列测定 | 第33-34页 |
| ·LC-MS-MS 鉴定 | 第34-35页 |
| ·(13) ~C-NMR 鉴定 | 第35-36页 |
| ·本章小结 | 第36-37页 |
| 参考文献 | 第37-39页 |
| 第三章 双果糖酐Ⅲ 的分离纯化及菊糖果糖转移酶的诱导合成 | 第39-54页 |
| ·前言 | 第39页 |
| ·材料与方法 | 第39-41页 |
| ·主要试剂 | 第39页 |
| ·主要仪器 | 第39-40页 |
| ·双果糖酐Ⅲ 的酶法合成 | 第40页 |
| ·双果糖酐Ⅲ 糖液的热稳定性 | 第40页 |
| ·离子交换树脂分离纯化糖液 | 第40页 |
| ·双果糖酐Ⅲ 与低聚果糖分离度的定义 | 第40页 |
| ·培养基 | 第40页 |
| ·碳源诱导合成菊糖果糖转移酶 | 第40-41页 |
| ·糖液组分分析 | 第41页 |
| ·发酵过程参数测定 | 第41页 |
| ·结果与讨论 | 第41-51页 |
| ·糖液组分分析 | 第41页 |
| ·糖液热稳定性 | 第41-42页 |
| ·糖液的离子交换树脂分离 | 第42-44页 |
| ·有效诱导碳源的筛选 | 第44-45页 |
| ·菊糖对A. aurescens SK 8.001 诱导合成菊糖果糖转移酶的影响 | 第45-47页 |
| ·双果糖酐Ⅲ 对A. aurescens SK 8.001 诱导合成菊糖果糖转移酶的影响 | 第47-51页 |
| ·本章小结 | 第51页 |
| 参考文献 | 第51-54页 |
| 第四章 A. aurescens SK8.001 菊糖果糖转移酶的分离纯化及酶学性质研究 | 第54-72页 |
| ·前言 | 第54页 |
| ·材料与方法 | 第54-58页 |
| ·主要试剂 | 第54页 |
| ·主要仪器 | 第54-55页 |
| ·菊糖果糖转移酶的分离纯化过程 | 第55页 |
| ·粗酶的制备过程 | 第55页 |
| ·乙醇分级沉淀 | 第55页 |
| ·DEAE-Sepharose Fast Flow 离子交换层析 | 第55页 |
| ·Superdex 200（10/300 GL）凝胶过滤层析 | 第55页 |
| ·菊糖果糖转移酶分子量测定 | 第55-56页 |
| ·pH 对酶活力及稳定性的影响 | 第56页 |
| ·温度对酶活力及稳定性的影响 | 第56页 |
| ·化学修饰剂对酶活力的影响 | 第56-57页 |
| ·金属离子对酶活力的影响 | 第57页 |
| ·动力学参数测定 | 第57页 |
| ·底物研究 | 第57页 |
| ·N-端结构测定 | 第57页 |
| ·蛋白质含量测定 | 第57-58页 |
| ·菊糖果糖转移酶酶活定义及测定 | 第58页 |
| ·结果与讨论 | 第58-69页 |
| ·乙醇分级沉淀 | 第58页 |
| ·DEAE Sepharose Fast Flow 离子交换色谱 | 第58-59页 |
| ·Superdex 200（10/300 GL）凝胶过滤 | 第59-60页 |
| ·菊糖果糖转移酶分子量测定 | 第60-62页 |
| ·pH 对酶活力及稳定性的影响 | 第62-63页 |
| ·温度对酶活力及稳定性的影响 | 第63-64页 |
| ·化学修饰剂对酶活力的影响 | 第64-66页 |
| ·金属离子及其它抑制剂对酶活的影响 | 第66页 |
| ·动力学参数测定 | 第66-67页 |
| ·酶底物研究 | 第67-69页 |
| ·N-端结构测定 | 第69页 |
| ·本章小结 | 第69-70页 |
| 参考文献 | 第70-72页 |
| 第五章 A. aurescens SK8.001 菊糖果糖转移酶基因的克隆表达及酶学性质研究 | 第72-92页 |
| ·前言 | 第72页 |
| ·材料与方法 | 第72-76页 |
| ·菌种与质粒 | 第72页 |
| ·主要试剂 | 第72-73页 |
| ·主要仪器 | 第73页 |
| ·培养基 | 第73页 |
| ·菊糖果糖转移酶基因的克隆 | 第73-74页 |
| ·菊糖果糖转移酶基因在大肠杆菌中的表达 | 第74-76页 |
| ·结果与讨论 | 第76-90页 |
| ·菊糖果糖转移酶基因ift 的PCR 扩增 | 第76-77页 |
| ·克隆载体pMD-ift-W、pMD-ift-In、pMD-ift-P 的构建 | 第77页 |
| ·A. aurescens SK 8.001 菊糖果糖转移酶基因测序 | 第77-80页 |
| ·菊糖果糖转移酶表达载体的构建 | 第80-82页 |
| ·表达产物的SDS-PAGE 分析 | 第82-83页 |
| ·信号肽对产酶活的影响 | 第83-84页 |
| ·BL21(pET226-ift-W) 菊糖果糖转移酶的发酵过程 | 第84-85页 |
| ·重组菊糖果糖转移酶酶学性质研究 | 第85-90页 |
| ·本章小结 | 第90页 |
| 参考文献 | 第90-92页 |
| 论文主要结论 | 第92-94页 |
| 论文创新点 | 第94-96页 |
| 附录：N-端结构分析图谱及标准氨基酸分析图谱 | 第96-102页 |
| 致谢 | 第102-103页 |
| 附录：作者在攻读博士学位期间发表的论文 | 第103页 |
