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乳清蛋白组分分离技术研究及水牛乳乳源蛋白酶水解制备抗菌肽条件优化

摘要第1-5页
Abstract第5-8页
目录第8-12页
第一章 绪论第12-26页
   ·水牛乳乳清蛋白的组成和功能性质第12-16页
     ·β-乳球蛋白第13-14页
     ·α-乳白蛋白第14-15页
     ·牛血清白蛋白第15-16页
     ·免疫球蛋白第16页
   ·乳清蛋白的主要应用第16-18页
     ·乳清蛋白在食品工业中的应用第16-17页
     ·乳清蛋白在化妆品行业中的应用第17页
     ·乳清蛋白在医疗保健方面的应用第17-18页
   ·分离乳清蛋白的主要技术手段第18-24页
     ·双水相萃取法第18-19页
     ·层析法第19-23页
     ·反相高效液相色谱法第23页
     ·SDS-PAGE 法第23-24页
     ·质谱法第24页
   ·本课题的研究目的和意义第24-26页
第二章 亲水有机溶剂/盐双水相萃取水牛乳乳清蛋白的响应面法优化第26-43页
   ·前言第26页
   ·试剂与仪器第26-27页
     ·主要材料与试剂第26页
     ·主要仪器与设备第26-27页
   ·方法第27-30页
     ·标准牛血清白蛋白溶液的制备第27页
     ·标准乳清蛋白溶液的制备第27页
     ·水牛乳乳清蛋白的制备第27页
     ·双水相体系相图的绘制第27页
     ·双水相萃取能力确定第27-28页
     ·乳清蛋白在两相中的分配规律考察第28页
     ·蛋白质浓度测定方法第28页
     ·单因素优化实验第28-29页
     ·双水相萃取乳清蛋白的SDS-PAGE实验第29页
     ·双水相萃取乳清蛋白RP-HPLC实验第29页
     ·双水相萃取水牛乳乳清蛋白紫外吸收光谱扫描第29页
     ·双水相萃取水牛乳乳清蛋白荧光光谱扫描第29-30页
   ·结果与讨论第30-42页
     ·双水相体系的相图第30-31页
     ·考马斯亮蓝法测定乳清蛋白浓度标准曲线第31页
     ·双水相最佳体系的选择第31-32页
     ·单因素实验优化萃取条件第32-33页
     ·双水相萃取乳清蛋白条件的响应面法优化第33-37页
     ·SDS-PAGE 分析第37-38页
     ·RP-HPLC 分析第38-40页
     ·紫外吸收光谱分析第40-41页
     ·荧光发射光谱分析第41-42页
   ·结论第42-43页
第三章 PEG/盐双水相分离南方水牛乳乳清蛋白第43-53页
   ·前言第43页
   ·实验试剂及仪器第43-44页
     ·材料与试剂第43页
     ·主要仪器第43-44页
   ·实验方法第44-45页
     ·水牛乳乳清蛋白的提取第44页
     ·双水相体系相图的绘制第44页
     ·双水相体系的配制第44页
     ·乳清蛋白在两相中的分配规律考察第44-45页
     ·双水相萃取能力确定第45页
     ·蛋白质浓度测定方法第45页
     ·SDS-PAGE第45页
   ·结果与讨论第45-51页
     ·PEG/磷酸盐双水相体系相图第45-46页
     ·BSA 在 PEG/磷酸盐体系中的分配第46-47页
     ·β-Lg 在 PEG/磷酸盐双水相体系中的分配第47-48页
     ·α-La 在 PEG/磷酸盐双水相体系中的分配第48-49页
     ·α-La 和β-Lg 在 PEG1500/磷酸盐体系中的分配第49-50页
     ·PEG1500/磷酸盐双水相体系分离南方水牛乳乳清蛋白 SDS-PAGE 分析第50-51页
   ·结论第51-53页
第四章 离子交换层析和凝胶层析分离Α-乳白蛋白及Β-乳球蛋白第53-61页
   ·前言第53页
   ·实验材料与仪器第53页
     ·实验材料与试剂第53页
     ·实验仪器第53页
   ·实验方法第53-54页
     ·乳清蛋白的提取第53-54页
     ·硫酸铵分级沉淀法(即分段盐析)初步提纯乳清蛋白第54页
     ·离子交换层析提纯第54页
     ·凝胶过滤层析提纯第54页
     ·SDS-PAGE 电泳第54页
     ·高效液相色谱分析第54页
   ·结果和讨论第54-60页
     ·硫酸铵分级沉淀提纯乳清蛋白第54-55页
     ·离子交换层析分离结果第55-56页
     ·离子交换层析样品 SDS-PAGE 结果第56-57页
     ·离子交换层析 RP-HPLC 结果第57-59页
     ·凝胶过滤层析分离结果第59页
     ·凝胶过滤层析 SDS-PAGE 结果第59-60页
   ·结论第60-61页
第五章 两种方法检测水牛乳乳清蛋白掺杂异源蛋白的比较第61-69页
   ·前言第61页
   ·材料与仪器第61-62页
     ·材料与试剂第61页
     ·主要仪器与设备第61-62页
   ·方法第62页
     ·南方水牛乳乳清蛋白的提取第62页
     ·乳清蛋白含量测定及掺杂样品的配制第62页
     ·乳清蛋白的 SDS-PAGE 分析第62页
     ·乳清蛋白 RP-HPLC 分析第62页
     ·最低检出限的计算第62页
   ·结果与分析第62-68页
     ·Bradford 法测定蛋白质含量第62-63页
     ·大豆分离蛋白掺假结果第63-65页
     ·明胶掺假结果第65-68页
   ·结论第68-69页
第六章 LTQ-ORBITRAP 液-质联用质谱技术对水牛奶乳清蛋白的鉴定第69-77页
   ·前言第69页
   ·实验试剂及仪器第69页
     ·实验材料与试剂第69页
     ·主要仪器第69页
   ·方法第69-70页
     ·乳清蛋白的提取第69-70页
     ·乳清蛋白溶液的酶解实验第70页
     ·质谱分析第70页
   ·结果与讨论第70-76页
     ·水牛奶乳清蛋白的总离子流色谱及二级质谱图第70-72页
     ·水牛乳α-乳白蛋白的氨基酸序列鉴定结果第72-74页
     ·水牛乳β-乳球蛋白氨基酸序列鉴定结果第74-76页
   ·结论第76-77页
第七章 响应面法对水牛乳酪蛋白源抗菌肽制备条件的优化第77-87页
   ·前言第77页
   ·材料与方法第77-78页
     ·材料与试剂第77-78页
     ·实验主要仪器第78页
   ·方法第78-79页
     ·酪蛋白的制备第78页
     ·胰蛋白酶对酪蛋白的水解第78页
     ·水解度测定第78页
     ·抗菌性的测定第78-79页
     ·单因素优化实验第79页
     ·响应面法实验优化酶解条件第79页
   ·结果与讨论第79-86页
     ·不同水解温度对酪蛋白水解度的影响第79-80页
     ·不同水解时间的酪蛋白水解度的影响第80页
     ·不同酶底比对酪蛋白水解度的影响第80-81页
     ·胰蛋白酶酶解条件的响应曲面优化第81-86页
     ·酶解产物的抗菌性研究第86页
   ·结论第86-87页
结论与展望第87-89页
 1. 结论第87-88页
 2. 展望第88-89页
参考文献第89-97页
附录 攻读硕士学位期间发表论文第97-98页
致谢第98页

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