| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-8页 |
| 目录 | 第8-12页 |
| 第一章 绪论 | 第12-26页 |
| ·水牛乳乳清蛋白的组成和功能性质 | 第12-16页 |
| ·β-乳球蛋白 | 第13-14页 |
| ·α-乳白蛋白 | 第14-15页 |
| ·牛血清白蛋白 | 第15-16页 |
| ·免疫球蛋白 | 第16页 |
| ·乳清蛋白的主要应用 | 第16-18页 |
| ·乳清蛋白在食品工业中的应用 | 第16-17页 |
| ·乳清蛋白在化妆品行业中的应用 | 第17页 |
| ·乳清蛋白在医疗保健方面的应用 | 第17-18页 |
| ·分离乳清蛋白的主要技术手段 | 第18-24页 |
| ·双水相萃取法 | 第18-19页 |
| ·层析法 | 第19-23页 |
| ·反相高效液相色谱法 | 第23页 |
| ·SDS-PAGE 法 | 第23-24页 |
| ·质谱法 | 第24页 |
| ·本课题的研究目的和意义 | 第24-26页 |
| 第二章 亲水有机溶剂/盐双水相萃取水牛乳乳清蛋白的响应面法优化 | 第26-43页 |
| ·前言 | 第26页 |
| ·试剂与仪器 | 第26-27页 |
| ·主要材料与试剂 | 第26页 |
| ·主要仪器与设备 | 第26-27页 |
| ·方法 | 第27-30页 |
| ·标准牛血清白蛋白溶液的制备 | 第27页 |
| ·标准乳清蛋白溶液的制备 | 第27页 |
| ·水牛乳乳清蛋白的制备 | 第27页 |
| ·双水相体系相图的绘制 | 第27页 |
| ·双水相萃取能力确定 | 第27-28页 |
| ·乳清蛋白在两相中的分配规律考察 | 第28页 |
| ·蛋白质浓度测定方法 | 第28页 |
| ·单因素优化实验 | 第28-29页 |
| ·双水相萃取乳清蛋白的SDS-PAGE实验 | 第29页 |
| ·双水相萃取乳清蛋白RP-HPLC实验 | 第29页 |
| ·双水相萃取水牛乳乳清蛋白紫外吸收光谱扫描 | 第29页 |
| ·双水相萃取水牛乳乳清蛋白荧光光谱扫描 | 第29-30页 |
| ·结果与讨论 | 第30-42页 |
| ·双水相体系的相图 | 第30-31页 |
| ·考马斯亮蓝法测定乳清蛋白浓度标准曲线 | 第31页 |
| ·双水相最佳体系的选择 | 第31-32页 |
| ·单因素实验优化萃取条件 | 第32-33页 |
| ·双水相萃取乳清蛋白条件的响应面法优化 | 第33-37页 |
| ·SDS-PAGE 分析 | 第37-38页 |
| ·RP-HPLC 分析 | 第38-40页 |
| ·紫外吸收光谱分析 | 第40-41页 |
| ·荧光发射光谱分析 | 第41-42页 |
| ·结论 | 第42-43页 |
| 第三章 PEG/盐双水相分离南方水牛乳乳清蛋白 | 第43-53页 |
| ·前言 | 第43页 |
| ·实验试剂及仪器 | 第43-44页 |
| ·材料与试剂 | 第43页 |
| ·主要仪器 | 第43-44页 |
| ·实验方法 | 第44-45页 |
| ·水牛乳乳清蛋白的提取 | 第44页 |
| ·双水相体系相图的绘制 | 第44页 |
| ·双水相体系的配制 | 第44页 |
| ·乳清蛋白在两相中的分配规律考察 | 第44-45页 |
| ·双水相萃取能力确定 | 第45页 |
| ·蛋白质浓度测定方法 | 第45页 |
| ·SDS-PAGE | 第45页 |
| ·结果与讨论 | 第45-51页 |
| ·PEG/磷酸盐双水相体系相图 | 第45-46页 |
| ·BSA 在 PEG/磷酸盐体系中的分配 | 第46-47页 |
| ·β-Lg 在 PEG/磷酸盐双水相体系中的分配 | 第47-48页 |
| ·α-La 在 PEG/磷酸盐双水相体系中的分配 | 第48-49页 |
| ·α-La 和β-Lg 在 PEG1500/磷酸盐体系中的分配 | 第49-50页 |
| ·PEG1500/磷酸盐双水相体系分离南方水牛乳乳清蛋白 SDS-PAGE 分析 | 第50-51页 |
| ·结论 | 第51-53页 |
| 第四章 离子交换层析和凝胶层析分离Α-乳白蛋白及Β-乳球蛋白 | 第53-61页 |
| ·前言 | 第53页 |
| ·实验材料与仪器 | 第53页 |
| ·实验材料与试剂 | 第53页 |
| ·实验仪器 | 第53页 |
| ·实验方法 | 第53-54页 |
| ·乳清蛋白的提取 | 第53-54页 |
| ·硫酸铵分级沉淀法(即分段盐析)初步提纯乳清蛋白 | 第54页 |
| ·离子交换层析提纯 | 第54页 |
| ·凝胶过滤层析提纯 | 第54页 |
| ·SDS-PAGE 电泳 | 第54页 |
| ·高效液相色谱分析 | 第54页 |
| ·结果和讨论 | 第54-60页 |
| ·硫酸铵分级沉淀提纯乳清蛋白 | 第54-55页 |
| ·离子交换层析分离结果 | 第55-56页 |
| ·离子交换层析样品 SDS-PAGE 结果 | 第56-57页 |
| ·离子交换层析 RP-HPLC 结果 | 第57-59页 |
| ·凝胶过滤层析分离结果 | 第59页 |
| ·凝胶过滤层析 SDS-PAGE 结果 | 第59-60页 |
| ·结论 | 第60-61页 |
| 第五章 两种方法检测水牛乳乳清蛋白掺杂异源蛋白的比较 | 第61-69页 |
| ·前言 | 第61页 |
| ·材料与仪器 | 第61-62页 |
| ·材料与试剂 | 第61页 |
| ·主要仪器与设备 | 第61-62页 |
| ·方法 | 第62页 |
| ·南方水牛乳乳清蛋白的提取 | 第62页 |
| ·乳清蛋白含量测定及掺杂样品的配制 | 第62页 |
| ·乳清蛋白的 SDS-PAGE 分析 | 第62页 |
| ·乳清蛋白 RP-HPLC 分析 | 第62页 |
| ·最低检出限的计算 | 第62页 |
| ·结果与分析 | 第62-68页 |
| ·Bradford 法测定蛋白质含量 | 第62-63页 |
| ·大豆分离蛋白掺假结果 | 第63-65页 |
| ·明胶掺假结果 | 第65-68页 |
| ·结论 | 第68-69页 |
| 第六章 LTQ-ORBITRAP 液-质联用质谱技术对水牛奶乳清蛋白的鉴定 | 第69-77页 |
| ·前言 | 第69页 |
| ·实验试剂及仪器 | 第69页 |
| ·实验材料与试剂 | 第69页 |
| ·主要仪器 | 第69页 |
| ·方法 | 第69-70页 |
| ·乳清蛋白的提取 | 第69-70页 |
| ·乳清蛋白溶液的酶解实验 | 第70页 |
| ·质谱分析 | 第70页 |
| ·结果与讨论 | 第70-76页 |
| ·水牛奶乳清蛋白的总离子流色谱及二级质谱图 | 第70-72页 |
| ·水牛乳α-乳白蛋白的氨基酸序列鉴定结果 | 第72-74页 |
| ·水牛乳β-乳球蛋白氨基酸序列鉴定结果 | 第74-76页 |
| ·结论 | 第76-77页 |
| 第七章 响应面法对水牛乳酪蛋白源抗菌肽制备条件的优化 | 第77-87页 |
| ·前言 | 第77页 |
| ·材料与方法 | 第77-78页 |
| ·材料与试剂 | 第77-78页 |
| ·实验主要仪器 | 第78页 |
| ·方法 | 第78-79页 |
| ·酪蛋白的制备 | 第78页 |
| ·胰蛋白酶对酪蛋白的水解 | 第78页 |
| ·水解度测定 | 第78页 |
| ·抗菌性的测定 | 第78-79页 |
| ·单因素优化实验 | 第79页 |
| ·响应面法实验优化酶解条件 | 第79页 |
| ·结果与讨论 | 第79-86页 |
| ·不同水解温度对酪蛋白水解度的影响 | 第79-80页 |
| ·不同水解时间的酪蛋白水解度的影响 | 第80页 |
| ·不同酶底比对酪蛋白水解度的影响 | 第80-81页 |
| ·胰蛋白酶酶解条件的响应曲面优化 | 第81-86页 |
| ·酶解产物的抗菌性研究 | 第86页 |
| ·结论 | 第86-87页 |
| 结论与展望 | 第87-89页 |
| 1. 结论 | 第87-88页 |
| 2. 展望 | 第88-89页 |
| 参考文献 | 第89-97页 |
| 附录 攻读硕士学位期间发表论文 | 第97-98页 |
| 致谢 | 第98页 |