| 第一章 文献综述 | 第1-40页 |
| 1．1 谷胱甘肽结构和性质 | 第14-15页 |
| 1．2 谷胱甘肽的生理功能 | 第15-16页 |
| 1．3 谷胱甘肽的应用 | 第16-17页 |
| 1．4 谷胱甘肽的生产 | 第17-35页 |
| 1．4．1 提取法 | 第17-18页 |
| 1．4．2 化学合成法 | 第18页 |
| 1．4．3 酶法 | 第18-20页 |
| 1．4．4 发酵法 | 第20-35页 |
| 1．4．4．1 高产菌种的选育 | 第22-33页 |
| (1) 诱变育种 | 第22-24页 |
| (2) 细胞杂交和原生质体融合 | 第24-32页 |
| (3) 基因工程育种 | 第32-33页 |
| 1．4．4．2 发酵工艺的优化 | 第33-35页 |
| 1．5 谷胱甘肽的提取及分离纯化 | 第35页 |
| 1．6 谷胱甘肽的测定 | 第35-37页 |
| 1．6．1 碘量法 | 第36页 |
| 1．6．2 纸层析法 | 第36页 |
| 1．6．3 差热分析法 | 第36页 |
| 1．6．4 高效液相色谱法 | 第36-37页 |
| 1．6．5 分光光度法测定 | 第37页 |
| 1．6．6 荧光法 | 第37页 |
| 1．7 小结 | 第37-40页 |
| 第二章 诱变育种 | 第40-58页 |
| 2．1 实验材料 | 第40-41页 |
| 2．1．1 实验菌株 | 第40页 |
| 2．1．2 培养基 | 第40页 |
| 2．1．3 化学试剂 | 第40-41页 |
| 2．1．4 主要试剂的配制 | 第41页 |
| 2．2 实验方法 | 第41-47页 |
| 2．2．1 培养方法 | 第41页 |
| 2．2．2 生物量的测定 | 第41-42页 |
| 2．2．3 GSH含量的分析方法-DTNB法 | 第42-43页 |
| 2．2．4 单倍体分离及鉴定 | 第43-44页 |
| 2．2．5 单倍体诱变 | 第44-45页 |
| 2．2．5．1 紫外(UV)诱变 | 第44-45页 |
| 2．2．5．2 硫酸二乙酯(DES)诱变 | 第45页 |
| 2．2．5．3 硫酸二乙酯(DES)和紫外线(UV)的复合诱变 | 第45页 |
| 2．2．6 制霉菌素质量浓度的确定 | 第45-46页 |
| 2．2．7 氯化锌和乙硫氨酸抗性筛选物浓度的确定 | 第46页 |
| 2．2．8 突变株营养缺陷型的筛选、检出和鉴定 | 第46-47页 |
| 2．3 结果与讨论 | 第47-57页 |
| 2．3．1 菌种的初筛和复筛 | 第47页 |
| 2．3．2 单倍体分离 | 第47-48页 |
| 2．3．3 出发单倍体菌株的生长曲线 | 第48-50页 |
| 2．3．4 制霉菌素浓度的确定 | 第50页 |
| 2．3．5 单倍体Y003-S1(a)进行诱变处理和抗性筛选 | 第50-53页 |
| 2．3．5．1 硫酸二乙酯(DES)诱变 | 第50-52页 |
| 2．3．5．2 UV诱变 | 第52页 |
| 2．3．5．3 DES和UV复合诱变 | 第52-53页 |
| 2．3．6 单倍体2848-SB1(a)进行诱变处理和抗性筛选 | 第53-57页 |
| 2．3．6．1 UV诱变 | 第54页 |
| 2．3．6．2 DES诱变 | 第54-55页 |
| 2．3．6．3 DES和UV复合诱变 | 第55-57页 |
| 2．4 小结 | 第57-58页 |
| 第三章 原生质体融合 | 第58-74页 |
| 3．1 材料和方法 | 第58-64页 |
| 3．1．1 菌种 | 第58-59页 |
| 3．1．2 培养基 | 第59页 |
| 3．1．3 化学试剂 | 第59页 |
| 2．1．4 主要试剂的配制 | 第59页 |
| 3．1．5 实验方法 | 第59-60页 |
| 3．1．5．1 培养方法 | 第59页 |
| 3．1．5．2 生物量的测定 | 第59页 |
| 3．1．5．3 GSH的分析方法 | 第59-60页 |
| 3．1．6 原生质体融合 | 第60-64页 |
| 3．1．6．1 原生质体的制备 | 第60-61页 |
| 3．1．6．2 原生质体灭活 | 第61页 |
| 3．1．6．3 原生质体融合 | 第61页 |
| 3．1．6．4 融合子的鉴定 | 第61-62页 |
| 3．1．6．5 融合子遗传稳定性分析 | 第62页 |
| 3．1．6．6 融合子和亲株可溶性蛋白质的聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)对照 | 第62-64页 |
| 3．2 结果与讨论 | 第64-72页 |
| 3．2．1 原生质体的制备和再生 | 第64-67页 |
| 3．2．1．1 酶的种类对原生质体形成率和再生率的影响 | 第64-65页 |
| 3．2．1．2 预处理对原生质体形成率和再生率的影响 | 第65-66页 |
| 3．2．1．3 酶解时间的确定 | 第66-67页 |
| 3．2．2 原生质体的灭活 | 第67-68页 |
| 3．2．3 原生质体融合 | 第68-69页 |
| 3．2．3．1 PEG和Ca~(2+)浓度对原生质体融合频率影响 | 第68-69页 |
| 3．2．3．2 融合温度对原生质体融合频率的影响 | 第69页 |
| 3．2．4 融合子的鉴定 | 第69-72页 |
| 3．2．4．1 融合子的营养要求 | 第70页 |
| 3．2．4．2 融合子的交配型鉴定 | 第70页 |
| 3．2．4．3 亲株与融合子细胞大小的测定 | 第70-71页 |
| 3．2．4．4 高产基因稳定性实验 | 第71页 |
| 3．2．4．5 融合子和亲株可溶性蛋白电泳对照 | 第71-72页 |
| 3．3 小结 | 第72-74页 |
| 第四章 培养条件的优化 | 第74-97页 |
| 4．1 实验材料 | 第74-77页 |
| 4．1．1 菌种 | 第74页 |
| 4．1．2 培养基及培养条件 | 第74-75页 |
| 4．1．3 发酵液中残糖浓度的分析 | 第75-76页 |
| 4．1．3．1 培养基pH的测定 | 第76页 |
| 4．1．4 实验设计 | 第76-77页 |
| 4．2 结果和讨论 | 第77-95页 |
| 4．2．1 融合子R1培养条件的优化 | 第77-81页 |
| 4．2．1．1 融合子R1的发酵曲线 | 第77-78页 |
| 4．2．1．2 温度对GSH产量和生物量的影响 | 第78-79页 |
| 4．2．1．3 培养基的初始pH值对GSH产量和生物量的影响 | 第79页 |
| 4．2．1．4 接种量对GSH产量和生物量的影响 | 第79-80页 |
| 4．2．1．5 装液量对GSH产量和生物量的影响 | 第80-81页 |
| 4．2．2 融合子R1培养基的优化 | 第81-95页 |
| 4．2．2．1 碳源对积累谷胱甘肽的影响 | 第81-83页 |
| 4．2．2．2 氮游对积累谷胱甘肽的影响 | 第83-86页 |
| 4．2．2．3 磷酸钾浓度对积累谷胱甘肽的影响 | 第86-89页 |
| 4．2．2．4 无机盐的影响 | 第89-90页 |
| 4．2．2．5 正交实验确定碳源，氮源，磷酸盐的浓度 | 第90-92页 |
| 4．2．2．6 葡萄糖的添加对谷胱甘肽积累的影响 | 第92-93页 |
| 4．2．2．7 不同种类的氨基酸对积累谷胱甘肽的影响 | 第93-95页 |
| 4．3 小结 | 第95-97页 |
| 第五章 结论和展望 | 第97-99页 |
| 5．1 结论 | 第97-98页 |
| 5．2 展望 | 第98-99页 |
| 参考文献 | 第99-108页 |
| 附录 | 第108-113页 |
| 致谢 | 第113-114页 |
| 研究生期间发表论文 | 第114页 |
