| 摘要 | 第10-12页 |
| Abstract | 第12-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第15-21页 |
| 1.1 杏鲍菇概述 | 第15页 |
| 1.2 杏鲍菇采后生理生化变化 | 第15-17页 |
| 1.2.1 形态特征 | 第15页 |
| 1.2.2 呼吸作用 | 第15-16页 |
| 1.2.3 蒸腾作用 | 第16页 |
| 1.2.4 褐变 | 第16页 |
| 1.2.5 营养物质的代谢与转化 | 第16-17页 |
| 1.3 多胺与植物成熟衰老的研究进展 | 第17-18页 |
| 1.3.1 调节生物大分子的合成及作用 | 第17页 |
| 1.3.2 调节自由基清除能力 | 第17页 |
| 1.3.3 调节乙烯生物合成 | 第17-18页 |
| 1.4 食用菌遗传转化研究进展 | 第18-19页 |
| 1.5 SAMDC研究进展 | 第19-20页 |
| 1.6 研究目的与意义 | 第20页 |
| 1.7 研究内容 | 第20-21页 |
| 第二章 外源乙烯对采后杏鲍菇内源乙烯释放和衰老进程的影响 | 第21-35页 |
| 2.1 材料与方法 | 第21-25页 |
| 2.1.1 实验材料及处理 | 第21-22页 |
| 2.1.2 主要仪器设备及试剂 | 第22页 |
| 2.1.3 主要缓冲液的配制 | 第22页 |
| 2.1.4 测定指标与方法 | 第22-24页 |
| 2.1.5 数据统计 | 第24-25页 |
| 2.2 结果与分析 | 第25-32页 |
| 2.2.1 采后贮藏时期杏鲍菇子实体的乙烯释放规律 | 第25页 |
| 2.2.2 外源乙烯处理对杏鲍菇子实体内源乙烯的诱导 | 第25-26页 |
| 2.2.3 外源乙烯处理对杏鲍菇子实体褐变相关指标的影响 | 第26-27页 |
| 2.2.4 外源乙烯处理对杏鲍菇子实体相对电导率和MDA含量的影响 | 第27-28页 |
| 2.2.5 外源乙烯处理对杏鲍菇子实体抗氧化酶活的影响 | 第28-29页 |
| 2.2.6 外源乙烯处理对杏鲍菇子实体DPPH自由基清除率、TAC、抗氧化物质(总酚、类黄酮)含量的影响 | 第29-32页 |
| 2.2.7 外源乙烯处理对杏鲍菇子实体可溶性糖和可溶性蛋白含量的影响 | 第32页 |
| 2.3 讨论 | 第32-33页 |
| 2.4 本章小结 | 第33-35页 |
| 第三章 外源多胺预处理对杏鲍菇内源多胺及乙烯的诱导分析 | 第35-46页 |
| 3.1 材料与方法 | 第36-38页 |
| 3.1.1 实验材料的培养及最适外源多胺浓度的筛选 | 第36页 |
| 3.1.2 外源多胺处理 | 第36页 |
| 3.1.3 主要仪器设备及试剂 | 第36页 |
| 3.1.4 主要溶液的配制 | 第36页 |
| 3.1.5 测定指标及方法 | 第36-38页 |
| 3.1.6 数据处理 | 第38页 |
| 3.2 结果与分析 | 第38-44页 |
| 3.2.1 最适外源多胺浓度筛选 | 第38-39页 |
| 3.2.2 外源多胺处理对杏鲍菇子实体内源乙烯的诱导 | 第39-40页 |
| 3.2.3 外源多胺处理对杏鲍菇子实体内源多胺含量的影响 | 第40-41页 |
| 3.2.4 外源多胺处理对杏鲍菇子实体SAM的影响 | 第41-42页 |
| 3.2.5 外源多胺处理对杏鲍菇子实体SAMDC活性的影响 | 第42页 |
| 3.2.6 外源多胺处理对杏鲍菇子实体乙烯释放量和内源多胺含量消长关系的影响 | 第42-43页 |
| 3.2.7 外源多胺处理对杏鲍菇子实体MDA含量、细胞膜相对透性及活性氧水平的影响 | 第43-44页 |
| 3.3 讨论 | 第44-45页 |
| 3.4 本章小结 | 第45-46页 |
| 第四章 杏鲍菇遗传转化体系的优化 | 第46-57页 |
| 4.1 材料与方法 | 第46-48页 |
| 4.1.1 供试菌株与质粒 | 第46页 |
| 4.1.2 主要试剂及试剂盒 | 第46-47页 |
| 4.1.3 主要仪器设备 | 第47页 |
| 4.1.4 培养基的配制 | 第47页 |
| 4.1.5 主要溶液的配制 | 第47-48页 |
| 4.2 实验方法 | 第48-50页 |
| 4.2.1 原生质体的制备 | 第48页 |
| 4.2.2 酶解液浓度对原生质体制备的影响 | 第48页 |
| 4.2.3 酶组合对原生质体制备的影响 | 第48页 |
| 4.2.4 酶解时间对原生质体制备的影响 | 第48页 |
| 4.2.5 再生培养基对原生质体再生率的影响 | 第48页 |
| 4.2.6 杏鲍菇菌株对hph的抗性实验 | 第48-49页 |
| 4.2.7 PEG/CaCl2介导杏鲍菇原生质体转化 | 第49页 |
| 4.2.8 拟转化子的转接和筛选 | 第49页 |
| 4.2.9 PCR鉴定拟转化子 | 第49-50页 |
| 4.2.10 拟转化子荧光定量PCR分析 | 第50页 |
| 4.2.11 荧光倒置显微镜观察 | 第50页 |
| 4.3 结果与分析 | 第50-55页 |
| 4.3.1 原生质体的制备 | 第50-51页 |
| 4.3.2 酶解液浓度对原生质体产量的影响 | 第51页 |
| 4.3.3 酶组合对原生质体产量的影响 | 第51-52页 |
| 4.3.4 酶解时间对原生质体产量的影响 | 第52页 |
| 4.3.5 再生培养基对原生质体再生率的影响 | 第52-53页 |
| 4.3.6 杏鲍菇hph抗性测定 | 第53页 |
| 4.3.7 hph抗性转化子的筛选 | 第53-54页 |
| 4.3.8 拟转化子的PCR鉴定 | 第54页 |
| 4.3.9 拟转化子荧光定量PCR分析 | 第54-55页 |
| 4.3.10 荧光倒置显微镜观察 | 第55页 |
| 4.4 讨论 | 第55-56页 |
| 4.5 本章小结 | 第56-57页 |
| 第五章 杏鲍菇PeSAMDC基因的克隆及过表达载体构建与转化 | 第57-67页 |
| 5.1 材料与方法 | 第57-58页 |
| 5.1.1 供试菌株及质粒 | 第57页 |
| 5.1.2 主要试剂及试剂盒 | 第57页 |
| 5.1.3 主要仪器设备 | 第57页 |
| 5.1.4 主要培养基的配制 | 第57页 |
| 5.1.5 主要溶液的配制 | 第57-58页 |
| 5.2 实验方法 | 第58-61页 |
| 5.2.1 杏鲍菇PeSAMDC基因的克隆 | 第58页 |
| 5.2.2 生物信息学分析 | 第58页 |
| 5.2.3 过表达载体pYf11-hph-PeSAMDC的构建 | 第58-60页 |
| 5.2.4 PeSAMDC过表达转化子的筛选和鉴定 | 第60-61页 |
| 5.2.5 出菇试验 | 第61页 |
| 5.3 结果分析 | 第61-65页 |
| 5.3.1 PeSAMDC基因的克隆 | 第61-62页 |
| 5.3.2 PeSAMDC基因的生物信息学分析 | 第62-63页 |
| 5.3.3 过表达载体的构建及酶切鉴定 | 第63页 |
| 5.3.4 拟转化子菌株的hph抗性验证 | 第63页 |
| 5.3.5 拟转化子菌株的PCR检测 | 第63-64页 |
| 5.3.6 转化子的荧光定量PCR分析 | 第64-65页 |
| 5.3.7 转化子出菇 | 第65页 |
| 5.4 讨论 | 第65页 |
| 5.5 本章小结 | 第65-67页 |
| 全文结论 | 第67-68页 |
| 参考文献 | 第68-76页 |
| 后续研究工作的展望 | 第76-77页 |
| 攻读学位论文期间发表文章 | 第77-78页 |
| 致谢 | 第78页 |
