蓝圆鲹加工副产物酶促水解制备铁结合肽及其在模式细胞中的吸收研究
| 致谢 | 第5-6页 |
| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 1 绪论 | 第15-23页 |
| 1.1 食源性生物活性肽研究进展 | 第15页 |
| 1.2 食源性生物活性肽的分类 | 第15-19页 |
| 1.2.1 降压肽 | 第16-17页 |
| 1.2.2 免疫调节肽 | 第17页 |
| 1.2.3 抗菌肽 | 第17-18页 |
| 1.2.4 抗氧化肽 | 第18页 |
| 1.2.5 抗血栓肽 | 第18页 |
| 1.2.6 矿物元素结合肽 | 第18-19页 |
| 1.3 矿物离子结合肽 | 第19-21页 |
| 1.3.1 铁结合肽 | 第19-20页 |
| 1.3.2 锌结合肽 | 第20页 |
| 1.3.3 钙结合肽 | 第20页 |
| 1.3.4 其它矿物元素结合肽 | 第20-21页 |
| 1.4 海洋资源加工副产物综合利用 | 第21页 |
| 1.5 矿物离子结合肽纯化方法 | 第21页 |
| 1.6 矿物离子结合肽的生物利用率 | 第21-22页 |
| 1.7 本课题研究的目的和内容 | 第22-23页 |
| 2 酶促水解蓝圆鲹加工副产物制备铁结合肽工艺研究 | 第23-41页 |
| 2.1 前言 | 第23-24页 |
| 2.2 材料与仪器 | 第24-25页 |
| 2.2.1 材料 | 第24页 |
| 2.2.2 主要仪器 | 第24-25页 |
| 2.3 实验方法 | 第25-29页 |
| 2.3.1 原料预处理 | 第25页 |
| 2.3.2 酶促水解 | 第25页 |
| 2.3.3 单因素试验 | 第25-26页 |
| 2.3.4 响应面优化 | 第26页 |
| 2.3.5 总蛋白测定 | 第26页 |
| 2.3.6 脂肪的测定 | 第26页 |
| 2.3.7 可溶性蛋白的测定 | 第26-27页 |
| 2.3.8 水解度的测定 | 第27-28页 |
| 2.3.9 铁结合能力的测定 | 第28页 |
| 2.3.10 DPPH自由基清除能力的测定 | 第28-29页 |
| 2.3.11 数据处理 | 第29页 |
| 2.4 结果与讨论 | 第29-40页 |
| 2.4.1 蓝圆鲹加工副产物样品脱脂方法比较 | 第29-30页 |
| 2.4.2 水解用酶的筛选 | 第30-31页 |
| 2.4.3 水解条件单因素优化 | 第31-33页 |
| 2.4.4 水解条件响应面优化 | 第33-38页 |
| 2.4.5 DH，DSA与IBC的关系 | 第38-40页 |
| 2.5 本章小结 | 第40-41页 |
| 3 蓝圆鲹加工副产物铁结合肽的分离纯化及鉴定 | 第41-59页 |
| 3.1 前言 | 第41页 |
| 3.2 材料与仪器 | 第41-42页 |
| 3.2.1 实验材料 | 第41页 |
| 3.2.2 主要仪器 | 第41-42页 |
| 3.3 实验方法 | 第42-46页 |
| 3.3.1 蓝圆鲹加工副产物铁肽复合物的制备 | 第42页 |
| 3.3.2 铁肽复合物定性检测 | 第42-43页 |
| 3.3.3 紫外光谱测定 | 第43页 |
| 3.3.4 红外光谱测定 | 第43页 |
| 3.3.5 超滤分离 | 第43页 |
| 3.3.6 氨基酸组成分析 | 第43页 |
| 3.3.7 胃肠道稳定性研究 | 第43-45页 |
| 3.3.8 亲和层析分离蓝圆鲹副产物铁结合肽 | 第45页 |
| 3.3.9 凝聚过滤层析分离 | 第45页 |
| 3.3.10 反相高效液相色谱分离 | 第45页 |
| 3.3.11 生物质谱鉴定 | 第45-46页 |
| 3.3.12 数据处理 | 第46页 |
| 3.4 结果与讨论 | 第46-58页 |
| 3.4.1 铁肽复合物的制备 | 第46页 |
| 3.4.2 超滤分离 | 第46-47页 |
| 3.4.3 紫外光谱测定 | 第47-48页 |
| 3.4.4 铁肽复合物的红外光谱 | 第48-49页 |
| 3.4.5 氨基酸组成分析 | 第49-50页 |
| 3.4.6 胃肠道稳定性研究 | 第50-53页 |
| 3.4.7 亲和层析色谱分离 | 第53-54页 |
| 3.4.8 凝聚过滤层析分离 | 第54-55页 |
| 3.4.9 HPLC分离 | 第55-56页 |
| 3.4.10 质谱扫描测定肽分子量及氨基酸序列 | 第56-58页 |
| 3.5 本章小结 | 第58-59页 |
| 4 蓝圆鲹铁结合肽对细胞摄取铁的影响 | 第59-64页 |
| 4.1 材料与方法 | 第59-61页 |
| 4.1.1 试剂 | 第59页 |
| 4.1.2 仪器 | 第59页 |
| 4.1.3 人结肠癌Caco-2 细胞的培养 | 第59页 |
| 4.1.4 细胞活性检测 | 第59页 |
| 4.1.5 细胞分组与药物处理 | 第59-60页 |
| 4.1.6 BCA法细胞蛋白含量 | 第60页 |
| 4.1.7 铁蛋白含量 | 第60-61页 |
| 4.2 结果与分析 | 第61-63页 |
| 4.3 本章小结 | 第63-64页 |
| 5 论文总结、创新点与展望 | 第64-66页 |
| 5.1 论文总结 | 第64-65页 |
| 5.2 论文创新点 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-73页 |
| 作者简历 | 第73页 |
