| 目录 | 第5-11页 |
| 摘要 | 第11-13页 |
| ABSTRACT | 第13-15页 |
| 符号及缩略语说明 | 第16-18页 |
| 前言 | 第18-20页 |
| 第一篇 文献综述 | 第20-72页 |
| 第一章 水产品中药物残留快速检测新技术研究进展 | 第20-36页 |
| 1 化学发光免疫分析(chemiluminescence immunoassay,CLIA) | 第20-23页 |
| 1.1 化学发光免疫分析原理及特点 | 第20-21页 |
| 1.2 化学发光免疫分析的应用 | 第21-23页 |
| 2 时间分辨荧光免疫分析(time-resolved fluoresence immunoassay, TR-FIA) | 第23-26页 |
| 2.1 时间分辨荧光免疫分析原理 | 第23页 |
| 2.2 时间分辨荧光免疫优势及应用 | 第23-26页 |
| 3 免疫传感器(Immunosensor) | 第26-28页 |
| 3.1 免疫传感器的原理 | 第26-27页 |
| 3.2 生物传感器的分类与发展 | 第27-28页 |
| 3.3 免疫传感器的优势及应用 | 第28页 |
| 4 免疫芯片技术(Immunochip) | 第28-29页 |
| 4.1 免疫芯片原理 | 第28-29页 |
| 4.2 免疫芯片发展及应用 | 第29页 |
| 5 小结 | 第29-30页 |
| 参考文献 | 第30-36页 |
| 第二章 水产品中部分禁用药物残留危害与检测技术研究进展 | 第36-58页 |
| 1 渔药残留现状及危害性 | 第36-37页 |
| 2 水产品药物残留检测分析方法 | 第37-40页 |
| 2.1 气相色谱法(GC) | 第37页 |
| 2.2 高效液相色谱法(HPLC) | 第37页 |
| 2.3 联用技术 | 第37-38页 |
| 2.4 酶联免疫吸附测定 | 第38-39页 |
| 2.5 胶体金免疫层析法 | 第39-40页 |
| 3 水产养殖的部分禁用渔药残留危害及免疫学检测检测技术 | 第40-52页 |
| 3.1 孔雀石绿 | 第41-44页 |
| 3.2 己烯雌酚 | 第44-47页 |
| 3.3 醋酸甲孕酮 | 第47-49页 |
| 3.4 呋喃唑酮 | 第49-52页 |
| 参考文献 | 第52-58页 |
| 第三章 大田软海绵酸及其检测技术研究进展 | 第58-72页 |
| 1 食物中毒性海洋贝毒素的概况 | 第58-64页 |
| 1.1 赤潮与贝毒素 | 第58-59页 |
| 1.2 海洋贝毒素的分类 | 第59-61页 |
| 1.3 DSP毒性 | 第61-62页 |
| 1.4 大田软海绵酸的来源与污染的贝类 | 第62-63页 |
| 1.5 OA的化学结构与构效关系 | 第63页 |
| 1.6 大田软海绵酸的性质 | 第63-64页 |
| 1.7 大田软海绵酸的食用标准与检测方法 | 第64页 |
| 2 OA检测技术研现状、水平概括如下 | 第64-67页 |
| 2.1 生物测试法 | 第64-65页 |
| 2.2 化学仪器分析法 | 第65-66页 |
| 2.3 免疫分析法 | 第66-67页 |
| 2.4 化学发光分析 | 第67页 |
| 3 本项目研究意义 | 第67-68页 |
| 参考文献 | 第68-72页 |
| 第二篇 试验研究 | 第72-176页 |
| 第四章 酶促化学发光检测技术平台的建立 | 第72-86页 |
| 1 材料与方法 | 第72-76页 |
| 1.1 材料 | 第72页 |
| 1.2 仪器设备 | 第72-73页 |
| 1.3 主要溶液和配制方法 | 第73-74页 |
| 1.4 化学发光底物液的制备 | 第74-75页 |
| 1.5 发光底物液发光性能的鉴定 | 第75页 |
| 1.6 发光稳定性试验 | 第75页 |
| 1.7 不同化学发光板的性能比较 | 第75页 |
| 1.8 自制发光底物的初步应用 | 第75-76页 |
| 2 结果 | 第76-84页 |
| 2.1 底物缓冲液的选择 | 第76页 |
| 2.2 化学发光增强剂类型的选择 | 第76-77页 |
| 2.3 化学发光增强剂浓度的选择 | 第77页 |
| 2.4 鲁米诺浓度筛选 | 第77页 |
| 2.5 过氧化氢脲浓度筛选 | 第77-78页 |
| 2.6 酶标二抗稀释度的选择 | 第78页 |
| 2.7 发光底物发光持续性实验 | 第78-82页 |
| 2.8 发光底物稳定性实验 | 第82页 |
| 2.9 比较三种化学发光板的性能 | 第82-83页 |
| 2.10 自配化学发光底物的初步应用 | 第83-84页 |
| 3 讨论和小结 | 第84-85页 |
| 3.1 讨论 | 第84页 |
| 3.2 小结 | 第84-85页 |
| 3.2.1 化学发光底物成分的选择 | 第84页 |
| 3.2.2 发光底物的发光性能 | 第84-85页 |
| 3.2.3 发光底物稳定性实验 | 第85页 |
| 3.2.4 化学发光底物的初步应用 | 第85页 |
| 参考文献 | 第85-86页 |
| 第五章 大田软海绵酸完全抗原及单克隆抗体的制备与鉴定 | 第86-104页 |
| 1 材料与方法 | 第86-94页 |
| 1.1 主要试剂和仪器 | 第86-87页 |
| 1.2 实验相关试剂配制 | 第87-88页 |
| 1.3 实验动物 | 第88页 |
| 1.4 OA抗原制备与鉴定 | 第88-89页 |
| 1.5 动物免疫试验 | 第89页 |
| 1.6 用于融合小鼠的选择 | 第89页 |
| 1.7 单抗制备与鉴定 | 第89-93页 |
| 1.8 单抗的生产与纯化 | 第93页 |
| 1.9 OA半数抑制的质量浓度测定 | 第93-94页 |
| 2 结果与分析 | 第94-101页 |
| 2.1 免疫抗原(OA-BSA)紫外扫描 | 第94页 |
| 2.2 偶联物的SDS-PAGE电泳鉴定 | 第94-95页 |
| 2.3 OA-BSA偶联比的测定 | 第95-96页 |
| 2.4 免疫鼠抗体产生情况 | 第96-97页 |
| 2.5 最佳小鼠的选择 | 第97页 |
| 2.6 多抗针对药物决定簇的鉴定 | 第97-98页 |
| 2.7 细胞融合过程及观察 | 第98-99页 |
| 2.8 阳性克隆的筛选 | 第99页 |
| 2.9 阳性克隆的亚克隆 | 第99页 |
| 2.10 OA单抗细胞株4H4、4H7、5C10性质比较 | 第99-101页 |
| 3 讨论 | 第101-102页 |
| 参考文献 | 第102-104页 |
| 第六章 海产品中大田软海绵酸酶促化学发光免疫分析方法的建立 | 第104-118页 |
| 1 材料与方法 | 第104-108页 |
| 1.1 试剂 | 第104页 |
| 1.2 仪器与设备 | 第104-105页 |
| 1.3 相关溶液的配制 | 第105-106页 |
| 1.4 最佳包被原、抗体工作浓度的选择 | 第106页 |
| 1.5 CLIA工作程序 | 第106页 |
| 1.6 标准曲线的绘制与曲线拟合 | 第106页 |
| 1.7 样品的前处理 | 第106页 |
| 1.8 检测方法的最低检出限、精确度、特异性、准确度测定 | 第106-107页 |
| 1.9 与进口ELISA试剂盒及国内相关的标准方法比较,并进行初步应用 | 第107-108页 |
| 2 结果 | 第108-116页 |
| 2.1 包被抗原和抗体稀释度进行CLIA检测 | 第108-109页 |
| 2.2 CLIA标准曲线的建立 | 第109页 |
| 2.3 检测方法的主要技术参数的测定 | 第109-112页 |
| 2.4 研制试剂盒与同类方法的比较 | 第112-116页 |
| 3 讨论与小结 | 第116页 |
| 参考文献 | 第116-118页 |
| 第七章 四种水产禁用药物的完全抗原、单抗制备及分析 | 第118-136页 |
| 1 材料与方法 | 第118-124页 |
| 1.1 实验试剂与仪器 | 第118-119页 |
| 1.2 药物完全抗原的制备 | 第119-122页 |
| 1.3 完全抗原鉴定 | 第122-123页 |
| 1.4 单抗制备 | 第123页 |
| 1.5 单抗的鉴定 | 第123-124页 |
| 2 结果 | 第124-130页 |
| 2.1 合成半抗原分析的结果 | 第124-126页 |
| 2.2 完全抗原分析 | 第126-128页 |
| 2.3 各药物单抗主要特性 | 第128-130页 |
| 3 小结和讨论 | 第130-133页 |
| 3.1 小结 | 第130页 |
| 3.2 讨论 | 第130-133页 |
| 参考文献 | 第133-136页 |
| 第八章 水产品中主要禁用药物残留检测蛋白芯片研制 | 第136-176页 |
| 1 原辅料选择 | 第136-138页 |
| 1.1 常规原辅料 | 第136页 |
| 1.2 特殊原辅料 | 第136-138页 |
| 2 试剂盒制造工艺的确定 | 第138-140页 |
| 3 检测体系的建立 | 第140页 |
| 4 抗原点样、固定及浓度的确定 | 第140-146页 |
| 4.1 蛋白芯片的点阵设计 | 第140-141页 |
| 4.2 蛋白芯片点样 | 第141-142页 |
| 4.3 抗原、抗体浓度的确定 | 第142-143页 |
| 4.4 实验数据结果 | 第143-145页 |
| 4.5 实验数据结果 | 第145-146页 |
| 5 芯片制备、后续工作及质量控制 | 第146-147页 |
| 5.1 芯片制备 | 第146页 |
| 5.2 芯片贴标签、围栏和洗针条件的确定 | 第146页 |
| 5.3 芯片半成品的质量控制 | 第146-147页 |
| 6 反应流程的优化 | 第147-151页 |
| 6.1 芯片封闭 | 第147页 |
| 6.2 芯片的清洗 | 第147页 |
| 6.3 一抗、二抗反应 | 第147-148页 |
| 6.4 反应温度的确定 | 第148页 |
| 6.5 反应时间的确定 | 第148-149页 |
| 6.6 反应流程 | 第149页 |
| 6.7 芯片扫描 | 第149-150页 |
| 6.8 结果判读 | 第150-151页 |
| 7 标准曲线的绘制与曲线拟合 | 第151-157页 |
| 8 样品的前处理 | 第157页 |
| 9 检测方法的灵敏度、精确度、特异性、准确度测定 | 第157-172页 |
| 9.1 灵敏度试验 | 第157-158页 |
| 9.2 精确度试验 | 第158-159页 |
| 9.3 特异性试验 | 第159-169页 |
| 9.4 准确度试验 | 第169-170页 |
| 9.5 药残芯片检测技术初步应用 | 第170-172页 |
| 10 讨论和小结 | 第172-173页 |
| 10.1 讨论 | 第172-173页 |
| 10.2 小结 | 第173页 |
| 11 改进与展望 | 第173-174页 |
| 参考文献 | 第174-176页 |
| 全文总结 | 第176-178页 |
| 论文创新点 | 第178-180页 |
| 致谢 | 第180-182页 |
| 在学期间发表论文和专利申请情况 | 第182-190页 |
| 附：作者简历 | 第190-192页 |
| 附录 | 第192-205页 |
