| 摘要 | 第6-8页 |
| abstract | 第8-10页 |
| 英文缩略表 | 第20-22页 |
| 第一章 引言 | 第22-41页 |
| 1.1 黄曲霉毒素免疫检测技术 | 第22-27页 |
| 1.1.1 黄曲霉毒素的发生及危害 | 第22-23页 |
| 1.1.2 黄曲霉毒素的限量标准 | 第23-24页 |
| 1.1.3 黄曲霉毒素免疫分析技术 | 第24-27页 |
| 1.2 基因工程抗体技术及国内外研究现状 | 第27-35页 |
| 1.2.1 基因工程抗体主要类型 | 第28-30页 |
| 1.2.2 噬菌体展示技术 | 第30-34页 |
| 1.2.3 基因工程抗体在真菌毒素检测中的应用 | 第34-35页 |
| 1.3 纳米抗体研究进展 | 第35-39页 |
| 1.3.1 纳米抗体的发现 | 第35页 |
| 1.3.2 纳米抗体的结构 | 第35-36页 |
| 1.3.3 纳米抗体理化特性 | 第36-37页 |
| 1.3.4 纳米抗体的制备 | 第37页 |
| 1.3.5 纳米抗体在小分子化学污染物检测中的应用 | 第37-39页 |
| 1.4 本课题的研究目的和意义 | 第39页 |
| 1.5 本课题的主要研究内容 | 第39-41页 |
| 第二章 黄曲霉毒素噬菌体展示纳米抗体库的构建与阳性克隆筛选鉴定 | 第41-70页 |
| 2.1 引言 | 第41页 |
| 2.2 材料 | 第41-45页 |
| 2.2.1 仪器与耗材 | 第41-42页 |
| 2.2.2 主要试剂 | 第42-43页 |
| 2.2.3 实验溶液 | 第43-44页 |
| 2.2.4 引物、载体和菌株 | 第44-45页 |
| 2.3 方法 | 第45-55页 |
| 2.3.1 动物免疫 | 第45-46页 |
| 2.3.2 噬菌体展示纳米抗体文库的构建 | 第46-51页 |
| 2.3.3 黄曲霉毒素B1纳米抗体的淘选 | 第51-52页 |
| 2.3.4 阳性噬菌体克隆鉴定与序列分析 | 第52页 |
| 2.3.5 基于纳米抗体噬菌体ELISA法（phage-ELISA）的建立 | 第52-54页 |
| 2.3.6 Phage-ELISA样品分析方法的建立 | 第54-55页 |
| 2.4 结果与分析 | 第55-66页 |
| 2.4.1 动物免疫效果检测 | 第55-56页 |
| 2.4.2 噬菌体展示纳米抗体文库的构建 | 第56-58页 |
| 2.4.3 纳米抗体文库的淘选 | 第58-59页 |
| 2.4.4 阳性噬菌体克隆的鉴定与序列分析 | 第59页 |
| 2.4.5 纳米抗体phage-ELISA方法建立 | 第59-63页 |
| 2.4.6 Phage-ELISA样品分析方法的建立 | 第63-66页 |
| 2.5 讨论 | 第66-68页 |
| 2.5.1 黄曲霉毒素噬菌体展示纳米抗体库淘选的影响因素 | 第66-68页 |
| 2.5.2 Phage-ELISA检测方法评价 | 第68页 |
| 2.6 小结 | 第68-70页 |
| 第三章 黄曲霉毒素B_1纳米抗体制备及酶免疫分析方法建立 | 第70-97页 |
| 3.1 前言 | 第70页 |
| 3.2 材料 | 第70-73页 |
| 3.2.1 仪器设备 | 第70-71页 |
| 3.2.2 试剂与耗材 | 第71页 |
| 3.2.3 实验溶液 | 第71-73页 |
| 3.3 方法 | 第73-80页 |
| 3.3.1 黄曲霉毒素纳米抗体氨基酸序列分析 | 第73-74页 |
| 3.3.2 黄曲霉毒素纳米抗体的表达与纯化 | 第74-75页 |
| 3.3.3 可溶性纳米抗体表达条件的优化 | 第75-77页 |
| 3.3.4 纳米抗体VHH-ELISA标准曲线初步建立 | 第77页 |
| 3.3.5 纳米抗体的稳定性研究 | 第77-78页 |
| 3.3.6 VHH-ELISA方法的灵敏度与特异性 | 第78-80页 |
| 3.3.7 VHH-ELISA样品分析方法的建立 | 第80页 |
| 3.4 结果与分析 | 第80-93页 |
| 3.4.1 纳米抗体氨基酸序列分析 | 第80-82页 |
| 3.4.2 纳米抗体亲和层析纯化 | 第82页 |
| 3.4.3 可溶性纳米抗体的优化表达 | 第82-84页 |
| 3.4.4 纳米抗体VHH-ELISA标准曲线初步建立 | 第84-85页 |
| 3.4.5 纳米抗体的稳定性研究 | 第85-89页 |
| 3.4.6 基于纳米抗体VHH-ELISA方法的灵敏度与特异性 | 第89-92页 |
| 3.4.7 VHH-ELISA样品分析方法的建立 | 第92-93页 |
| 3.5 讨论 | 第93-96页 |
| 3.5.1 关于可溶性纳米抗体的制备 | 第93-94页 |
| 3.5.2 纳米抗体稳定性分析 | 第94-95页 |
| 3.5.3 纳米抗体的优势及应用前景 | 第95-96页 |
| 3.6 小结 | 第96-97页 |
| 第四章 纳米抗体免疫亲和柱的研制与应用 | 第97-108页 |
| 4.1 前言 | 第97页 |
| 4.2 材料 | 第97-98页 |
| 4.2.1 仪器设备 | 第97页 |
| 4.2.2 实验试剂 | 第97-98页 |
| 4.2.3 实验溶液 | 第98页 |
| 4.3 方法 | 第98-101页 |
| 4.3.1 纳米抗体与单克隆抗体基本性质比较 | 第98-99页 |
| 4.3.2 免疫亲和柱的制备 | 第99-100页 |
| 4.3.3 免疫亲和柱的特性鉴定 | 第100-101页 |
| 4.3.4 再生纳米抗体免疫亲和柱应用于农产品AFB1检测 | 第101页 |
| 4.4 结果与分析 | 第101-106页 |
| 4.4.1 纳米抗体与单克隆抗体性质比较 | 第101-104页 |
| 4.4.2 免疫亲和柱的特性鉴定 | 第104-105页 |
| 4.4.3 再生纳米抗体免疫亲和柱应用于农产品AFB1检测 | 第105-106页 |
| 4.5 讨论 | 第106页 |
| 4.6 小结 | 第106-108页 |
| 第五章 黄曲霉毒素B_1纳米抗体时间分辨荧光免疫层析技术研究 | 第108-127页 |
| 5.1 前言 | 第108页 |
| 5.2 材料 | 第108-110页 |
| 5.2.1 主要试剂 | 第108-109页 |
| 5.2.2 仪器与耗材 | 第109页 |
| 5.2.3 实验溶液 | 第109-110页 |
| 5.3 方法 | 第110-115页 |
| 5.3.1 铕标记纳米抗体免疫荧光探针的制备 | 第110页 |
| 5.3.2 纳米抗体免疫荧光探针的鉴定 | 第110-112页 |
| 5.3.3 纳米抗体时间分辨荧光免疫层析试纸条的构建 | 第112-113页 |
| 5.3.4 纳米抗体时间分辨荧光免疫层析法（VHH-TRFIA）的建立 | 第113-114页 |
| 5.3.5 VHH-TRFIA在样品检测中的应用 | 第114-115页 |
| 5.4 结果与分析 | 第115-125页 |
| 5.4.1 纳米抗体与氧化铕乳胶偶联量的确定 | 第115-116页 |
| 5.4.2 纳米抗体免疫荧光探针的鉴定 | 第116-117页 |
| 5.4.3 纳米抗体时间分辨荧光免疫层析试纸条的构建 | 第117-118页 |
| 5.4.4 纳米抗体时间分辨荧光免疫层析方法的建立 | 第118-122页 |
| 5.4.5 VHH-TRFIA在样品检测中的应用 | 第122-125页 |
| 5.5 讨论 | 第125-126页 |
| 5.6 小结 | 第126-127页 |
| 第六章 全文结论 | 第127-129页 |
| 参考文献 | 第129-137页 |
| 致谢 | 第137-138页 |
| 作者简历 | 第138页 |
