| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 目录 | 第7-9页 |
| 第一章 绪论 | 第9-17页 |
| ·背景 | 第9页 |
| ·碱性果胶酶概述 | 第9-11页 |
| ·大肠杆菌表达体系简介 | 第11-12页 |
| ·异源蛋白在大肠杆菌中的分泌表达 | 第11页 |
| ·流加策略在重组大肠杆菌中的应用 | 第11-12页 |
| ·枯草芽孢杆菌表达系统简介 | 第12-13页 |
| ·枯草芽孢杆菌表达系统的主要优点 | 第12页 |
| ·枯草芽孢杆菌表达系统常用载体 | 第12-13页 |
| ·立题依据 | 第13-15页 |
| ·碱性果胶酶在棉织物前处理中的应用 | 第13页 |
| ·碱性果胶酶异源表达研究现状 | 第13-15页 |
| ·本论文主要研究内容 | 第15-17页 |
| 第二章 材料与方法 | 第17-25页 |
| ·材料 | 第17-19页 |
| ·菌株与质粒 | 第17-18页 |
| ·主要试剂和仪器 | 第18页 |
| ·培养基 | 第18-19页 |
| ·方法 | 第19-25页 |
| ·DNA 操作 | 第19-20页 |
| ·碱性果胶酶基因的克隆 | 第20-21页 |
| ·大肠杆菌表达载体pET-20b(+)/pgl 的构建与转化 | 第21页 |
| ·枯草芽孢杆菌表达载体的构建与转化 | 第21-22页 |
| ·培养方法 | 第22-23页 |
| ·菌体浓度测定 | 第23页 |
| ·重组PGL 的定位 | 第23页 |
| ·SDS-PAGE 分析 | 第23页 |
| ·碱性果胶酶酶活力的测定 | 第23-24页 |
| ·甘油与乙酸浓度的测定 | 第24页 |
| ·重组酶酶学性质初步分析 | 第24-25页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第25-45页 |
| ·枯草芽孢杆菌PGL 基因在大肠杆菌中的克隆与表达 | 第25-28页 |
| ·PGL 结构基因的核苷酸序列及对应氨基酸序列分析 | 第25-26页 |
| ·PGL 基因在大肠杆菌中的表达 | 第26-28页 |
| ·影响重组大肠杆菌胞外生产PGL 关键因素的探索 | 第28-35页 |
| ·培养基组分对重组PGL 胞外生产的影响 | 第28-31页 |
| ·金属离子及其浓度对PGL 胞外生产的影响 | 第31-32页 |
| ·诱导温度对重组PGL 胞外生产的影响 | 第32-33页 |
| ·诱导剂浓度对重组PGL 胞外生产的影响 | 第33-35页 |
| ·采用流加策略发酵生产PGL | 第35-38页 |
| ·两阶段甘油流加策略对重组大肠杆菌胞外生产PGL 的影响 | 第35-37页 |
| ·流加培养过程诱导时机的研究 | 第37-38页 |
| ·PGL 基因在枯草芽孢杆菌中的表达 | 第38-43页 |
| ·重组碱性果胶酶粗酶性质的初步研究 | 第43-45页 |
| ·重组菌产PGL 的适宜温度范围及温度稳定性 | 第43-44页 |
| ·重组菌产PGL 的适宜pH | 第44-45页 |
| 主要结论与展望 | 第45-47页 |
| 致谢 | 第47-49页 |
| 参考文献 | 第49-53页 |
| 附录：作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第53页 |
