摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
第1章 引言 | 第12-28页 |
1.1 黄曲霉毒素简介 | 第12-13页 |
1.1.1 黄曲霉毒素来源 | 第12页 |
1.1.2 黄曲霉毒素理化性质 | 第12-13页 |
1.2 黄曲霉毒素毒性及致毒机理 | 第13-15页 |
1.3 黄曲霉毒素的防治 | 第15-17页 |
1.3.1 预防黄曲霉毒素的污染 | 第15-16页 |
1.3.2 传统方法去除AFB | 第16-17页 |
1.4 生物法去除AFB | 第17-27页 |
1.4.1 脱毒微生物 | 第17-22页 |
1.4.2 降解机制 | 第22-24页 |
1.4.3 降解产物 | 第24-27页 |
1.5 本研究的目的及意义 | 第27-28页 |
第2章 碳源对夏孢生枝孢的发酵及其产酶降解AFB_1的影响 | 第28-40页 |
2.1 实验材料 | 第28-30页 |
2.1.1 菌种 | 第28页 |
2.1.2 培养基 | 第28页 |
2.1.3 试剂 | 第28-29页 |
2.1.4 仪器设备 | 第29-30页 |
2.2 实验方法 | 第30-32页 |
2.2.1 菌株发酵 | 第30页 |
2.2.2 收集发酵液与菌体 | 第30页 |
2.2.3 黄曲霉毒素B_1降解反应 | 第30-31页 |
2.2.4 残留黄曲霉毒素B_1检测与分析 | 第31页 |
2.2.5 麦角固醇的检测与提取 | 第31页 |
2.2.6 5-羟甲基糠醛和香草醛检测 | 第31-32页 |
2.2.7 黄曲霉毒素降解酶酶活定义 | 第32页 |
2.3 结果与分析 | 第32-38页 |
2.3.1 麦角固醇的标准曲线 | 第32-33页 |
2.3.2 玉米芯粉中不同碳源对酶活和生物量的影响 | 第33-34页 |
2.3.3 5-羟甲基糠醛和香草醛的发现 | 第34-36页 |
2.3.4 5-羟甲基糠醛和香草醛对酶活和生物量的影响 | 第36-37页 |
2.3.5 5-羟甲基糠醛和香草醛对AFB_1酶解反应的影响 | 第37-38页 |
2.4 本章小结 | 第38-40页 |
第3章 黄曲霉毒素B_1降解产物的鉴定 | 第40-50页 |
3.1 实验材料 | 第40-42页 |
3.1.1 菌种 | 第40页 |
3.1.2 培养基 | 第40页 |
3.1.3 试剂 | 第40-41页 |
3.1.4 仪器设备 | 第41-42页 |
3.2 实验方法 | 第42-43页 |
3.2.1 黄曲霉毒素B_1的降解 | 第42页 |
3.2.2 黄曲霉毒素B_1降解产物的发现 | 第42页 |
3.2.2.1 薄层色谱(TLC)法 | 第42页 |
3.2.2.2 高效液相色谱法 | 第42页 |
3.2.3 降解产物的分离纯化 | 第42-43页 |
3.2.4 降解产物的结构鉴定 | 第43页 |
3.3 结果与分析 | 第43-49页 |
3.3.1 降解产物的发现 | 第43-44页 |
3.3.2 色谱条件的优化与产物检测 | 第44-45页 |
3.3.3 LC-Q-TOFMS分析产物分子 | 第45-47页 |
3.3.4 MS/MS分析降解产物的结构 | 第47-49页 |
3.4 本章小结 | 第49-50页 |
第4章 黄曲霉毒素B_1降解产物的毒性鉴定 | 第50-56页 |
4.1 实验材料 | 第50-52页 |
4.1.1 菌种 | 第50页 |
4.1.2 培养基 | 第50页 |
4.1.3 试剂 | 第50-51页 |
4.1.4 仪器设备 | 第51-52页 |
4.2 实验方法 | 第52页 |
4.2.1 Test软件模拟降解产物的毒性 | 第52页 |
4.2.2 细胞毒性试验 | 第52页 |
4.3 结果与分析 | 第52-55页 |
4.3.1 定量构效关系分析 | 第52-53页 |
4.3.2 Test软件预估毒性分析 | 第53-54页 |
4.3.3 细胞毒性实验 | 第54-55页 |
4.4 本章小结 | 第55-56页 |
第5章 酶的分离纯化及酶学性质的研究 | 第56-67页 |
5.1 实验材料 | 第56-58页 |
5.1.1 菌种 | 第56页 |
5.1.2 培养基 | 第56页 |
5.1.3 试剂 | 第56-57页 |
5.1.4 仪器设备 | 第57-58页 |
5.2 实验方法 | 第58-60页 |
5.2.1 菌株发酵 | 第58页 |
5.2.2 发酵液的收集与浓缩 | 第58-59页 |
5.2.3 酶的分离纯化 | 第59页 |
5.2.4 活性物质的分离与鉴定 | 第59-60页 |
5.2.5 酶学性质的探究 | 第60页 |
5.2.6 过氧化物酶的鉴定 | 第60页 |
5.3 结果与分析 | 第60-66页 |
5.3.1 凝胶过滤层析 | 第60-61页 |
5.3.2 活性物质成分分析 | 第61-62页 |
5.3.3 离子交换层析 | 第62页 |
5.3.4 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第62-63页 |
5.3.5 最适反应温度 | 第63-64页 |
5.3.6 最适反应pH | 第64-65页 |
5.3.7 酶动力学参数 | 第65页 |
5.3.8 酶的作用靶点分析 | 第65页 |
5.3.9 ABTS过氧化物酶鉴定 | 第65-66页 |
5.4 本章小结 | 第66-67页 |
第6章 总结与展望 | 第67-69页 |
6.1 总结 | 第67-68页 |
6.2 创新点 | 第68页 |
6.3 展望 | 第68-69页 |
参考文献 | 第69-77页 |
致谢 | 第77页 |