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黄曲霉毒素B1降解酶及其降解机制研究

摘要第4-6页
Abstract第6-7页
第1章 引言第12-28页
    1.1 黄曲霉毒素简介第12-13页
        1.1.1 黄曲霉毒素来源第12页
        1.1.2 黄曲霉毒素理化性质第12-13页
    1.2 黄曲霉毒素毒性及致毒机理第13-15页
    1.3 黄曲霉毒素的防治第15-17页
        1.3.1 预防黄曲霉毒素的污染第15-16页
        1.3.2 传统方法去除AFB第16-17页
    1.4 生物法去除AFB第17-27页
        1.4.1 脱毒微生物第17-22页
        1.4.2 降解机制第22-24页
        1.4.3 降解产物第24-27页
    1.5 本研究的目的及意义第27-28页
第2章 碳源对夏孢生枝孢的发酵及其产酶降解AFB_1的影响第28-40页
    2.1 实验材料第28-30页
        2.1.1 菌种第28页
        2.1.2 培养基第28页
        2.1.3 试剂第28-29页
        2.1.4 仪器设备第29-30页
    2.2 实验方法第30-32页
        2.2.1 菌株发酵第30页
        2.2.2 收集发酵液与菌体第30页
        2.2.3 黄曲霉毒素B_1降解反应第30-31页
        2.2.4 残留黄曲霉毒素B_1检测与分析第31页
        2.2.5 麦角固醇的检测与提取第31页
        2.2.6 5-羟甲基糠醛和香草醛检测第31-32页
        2.2.7 黄曲霉毒素降解酶酶活定义第32页
    2.3 结果与分析第32-38页
        2.3.1 麦角固醇的标准曲线第32-33页
        2.3.2 玉米芯粉中不同碳源对酶活和生物量的影响第33-34页
        2.3.3 5-羟甲基糠醛和香草醛的发现第34-36页
        2.3.4 5-羟甲基糠醛和香草醛对酶活和生物量的影响第36-37页
        2.3.5 5-羟甲基糠醛和香草醛对AFB_1酶解反应的影响第37-38页
    2.4 本章小结第38-40页
第3章 黄曲霉毒素B_1降解产物的鉴定第40-50页
    3.1 实验材料第40-42页
        3.1.1 菌种第40页
        3.1.2 培养基第40页
        3.1.3 试剂第40-41页
        3.1.4 仪器设备第41-42页
    3.2 实验方法第42-43页
        3.2.1 黄曲霉毒素B_1的降解第42页
        3.2.2 黄曲霉毒素B_1降解产物的发现第42页
            3.2.2.1 薄层色谱(TLC)法第42页
            3.2.2.2 高效液相色谱法第42页
        3.2.3 降解产物的分离纯化第42-43页
        3.2.4 降解产物的结构鉴定第43页
    3.3 结果与分析第43-49页
        3.3.1 降解产物的发现第43-44页
        3.3.2 色谱条件的优化与产物检测第44-45页
        3.3.3 LC-Q-TOFMS分析产物分子第45-47页
        3.3.4 MS/MS分析降解产物的结构第47-49页
    3.4 本章小结第49-50页
第4章 黄曲霉毒素B_1降解产物的毒性鉴定第50-56页
    4.1 实验材料第50-52页
        4.1.1 菌种第50页
        4.1.2 培养基第50页
        4.1.3 试剂第50-51页
        4.1.4 仪器设备第51-52页
    4.2 实验方法第52页
        4.2.1 Test软件模拟降解产物的毒性第52页
        4.2.2 细胞毒性试验第52页
    4.3 结果与分析第52-55页
        4.3.1 定量构效关系分析第52-53页
        4.3.2 Test软件预估毒性分析第53-54页
        4.3.3 细胞毒性实验第54-55页
    4.4 本章小结第55-56页
第5章 酶的分离纯化及酶学性质的研究第56-67页
    5.1 实验材料第56-58页
        5.1.1 菌种第56页
        5.1.2 培养基第56页
        5.1.3 试剂第56-57页
        5.1.4 仪器设备第57-58页
    5.2 实验方法第58-60页
        5.2.1 菌株发酵第58页
        5.2.2 发酵液的收集与浓缩第58-59页
        5.2.3 酶的分离纯化第59页
        5.2.4 活性物质的分离与鉴定第59-60页
        5.2.5 酶学性质的探究第60页
        5.2.6 过氧化物酶的鉴定第60页
    5.3 结果与分析第60-66页
        5.3.1 凝胶过滤层析第60-61页
        5.3.2 活性物质成分分析第61-62页
        5.3.3 离子交换层析第62页
        5.3.4 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳第62-63页
        5.3.5 最适反应温度第63-64页
        5.3.6 最适反应pH第64-65页
        5.3.7 酶动力学参数第65页
        5.3.8 酶的作用靶点分析第65页
        5.3.9 ABTS过氧化物酶鉴定第65-66页
    5.4 本章小结第66-67页
第6章 总结与展望第67-69页
    6.1 总结第67-68页
    6.2 创新点第68页
    6.3 展望第68-69页
参考文献第69-77页
致谢第77页

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