| 摘要 | 第4-6页 |
| abstract | 第6-8页 |
| 第1章 绪论 | 第12-22页 |
| 1.1 人Cu,Zn-SOD研究背景 | 第12-13页 |
| 1.2 技术路线与研究内容和意义 | 第13-14页 |
| 1.2.1 技术路线 | 第13页 |
| 1.2.2 研究内容和意义 | 第13-14页 |
| 1.3 Cu,Zn-SOD理化性质 | 第14-16页 |
| 1.4 人Cu,Zn-SOD的作用机制 | 第16-17页 |
| 1.5 SOD的应用 | 第17-19页 |
| 1.5.1 SOD在食品中的应用 | 第17页 |
| 1.5.2 SOD在日化品中的应用 | 第17-18页 |
| 1.5.3 SOD在医疗方面的应用 | 第18-19页 |
| 1.6 原核表达系统 | 第19-20页 |
| 1.6.1 大肠杆菌表达系统 | 第19页 |
| 1.6.2 大肠杆菌表达载体pET-22b(+) | 第19-20页 |
| 1.7 真核表达系统 | 第20-22页 |
| 1.7.1 酿酒酵母表达系统 | 第20-21页 |
| 1.7.2 酿酒酵母表达载体pAUR123 | 第21-22页 |
| 第2章 人Cu,Zn-SOD表达载体的构建与转化 | 第22-64页 |
| 2.1 引言 | 第22-23页 |
| 2.2 材料和仪器 | 第23-26页 |
| 2.2.1 实验材料 | 第23-26页 |
| 2.2.2 实验仪器 | 第26页 |
| 2.3 实验方法 | 第26-46页 |
| 2.3.1 大肠杆菌工程菌目的基因Cu,Zn-SOD-E.coli的构建 | 第26-28页 |
| 2.3.2 酿酒酵母工程菌目的基因Cu,Zn-SOD-Yeast的构建 | 第28-30页 |
| 2.3.3 大肠杆菌表达载体pET-22b-SOD的构建 | 第30-36页 |
| 2.3.4 大肠杆菌工程菌BL21-22b-SOD的构建 | 第36-37页 |
| 2.3.5 酿酒酵母表达载体pAUR123-SOD的构建 | 第37-40页 |
| 2.3.6 酿酒酵母工程菌Yeast-123-SOD的构建 | 第40-42页 |
| 2.3.7 大肠杆菌工程菌BL21-SOD-22b诱导表达和目的蛋白检测 | 第42-44页 |
| 2.3.8 酿酒酵母工程菌Yeast-SOD-123表达和目的蛋白检测 | 第44-45页 |
| 2.3.9 表达产物酶活和酶比活测定 | 第45-46页 |
| 2.4 结果和分析 | 第46-62页 |
| 2.4.1 大肠杆菌偏好目的基因Cu,Zn-SOD-E.coli与原始序列对比分析 | 第46-47页 |
| 2.4.2 酿酒酵母偏好目的基因Cu,Zn-SOD-Yeast与原始序列对比分析 | 第47-48页 |
| 2.4.3 大肠杆菌表达载体pET-22b-SOD的构建 | 第48-54页 |
| 2.4.4 大肠杆菌工程菌BL21-22b-SOD的构建 | 第54-55页 |
| 2.4.5 酿酒酵母表达载体pAUR123-SOD的构建 | 第55-59页 |
| 2.4.6 酿酒酵母工程菌Yeast-123-SOD的构建 | 第59-60页 |
| 2.4.7 大肠杆菌工程菌BL21-22b-SOD诱导表达和目的蛋白鉴定 | 第60-61页 |
| 2.4.8 酿酒酵母工程菌Yeast-123-SOD表达和目的蛋白鉴定 | 第61-62页 |
| 2.5 本章小节 | 第62-64页 |
| 第3章 工程菌发酵条件的优化 | 第64-92页 |
| 3.1 引言 | 第64-65页 |
| 3.2 材料和仪器 | 第65页 |
| 3.2.1 实验材料 | 第65页 |
| 3.2.2 实验仪器 | 第65页 |
| 3.3 实验方法 | 第65-71页 |
| 3.3.1 菌液初始诱导OD600值对工程菌BL21-22b-SOD生长和目的蛋白表达的影响 | 第65-66页 |
| 3.3.2 IPTG诱导剂浓度对工程菌BL21-22b-SOD生长和目的蛋白表达的影响 | 第66-67页 |
| 3.3.3 诱导时间对工程菌BL21-22b-SOD生长和目的蛋白表达的影响 | 第67页 |
| 3.3.4 诱导温度对工程菌BL21-22b-SOD生长和目的蛋白表达的影响 | 第67-68页 |
| 3.3.5 适宜发酵条件下工程菌BL21-22b-SOD目的蛋白表达 | 第68页 |
| 3.3.6 发酵时间对工程菌Yeast-123-SOD生长和目的蛋白表达的影响 | 第68-69页 |
| 3.3.7 发酵温度对工程菌Yeast-123-SOD生长和目的蛋白表达的影响 | 第69-70页 |
| 3.3.8 初始pH对工程菌Yeast-123-SOD生长和目的蛋白表达的影响 | 第70页 |
| 3.3.9 培养转速对工程菌Yeast-123-SOD生长和目的蛋白表达的影响 | 第70-71页 |
| 3.3.10 适宜发酵条件下工程菌Yeast-123-SOD目的蛋白表达 | 第71页 |
| 3.4 结果和分析 | 第71-89页 |
| 3.4.1 菌液初始诱导OD600值对工程菌BL21-22b-SOD生长和目的蛋白表达的影响 | 第71-74页 |
| 3.4.2 IPTG诱导剂浓度对工程菌BL21-22b-SOD生长和目的蛋白表达的影响 | 第74-76页 |
| 3.4.3 诱导时间对工程菌BL21-22b-SOD生长和目的蛋白表达的影响 | 第76-78页 |
| 3.4.4 诱导温度对工程菌BL21-22b-SOD生长和目的蛋白表达的影响 | 第78-80页 |
| 3.4.5 适宜发酵条件下工程菌BL21-22b-SOD目的蛋白表达量 | 第80页 |
| 3.4.6 发酵时间对工程菌Yeast-123-SOD生长和目的蛋白表达的影响 | 第80-83页 |
| 3.4.7 发酵温度对工程菌Yeast-123-SOD生长和目的蛋白表达的影响 | 第83-85页 |
| 3.4.8 初始pH对工程菌Yeast-123-SOD生长和目的蛋白表达的影响 | 第85-87页 |
| 3.4.9 培养转速对工程菌Yeast-123-SOD生长和目的蛋白表达的影响 | 第87-89页 |
| 3.4.10 适宜发酵条件下工程菌Yeast-SOD-123目的蛋白表达量 | 第89页 |
| 3.5 本章小结 | 第89-92页 |
| 第4章 结论和展望 | 第92-94页 |
| 参考文献 | 第94-100页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第100-102页 |
| 致谢 | 第102页 |
