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鲤鱼肌肉脯氨酸内肽酶的分离纯化及性质分析

摘要第1-5页
Abstract第5-11页
第1章 引言第11-20页
   ·鱼类肌肉蛋白酶与鱼肉品质的关系第11-12页
   ·蛋白酶的分类第12-14页
     ·丝氨酸蛋白酶第12-13页
     ·基质金属蛋白酶第13页
     ·半胱氨酸蛋白酶第13页
     ·天冬氨酸蛋白酶第13-14页
   ·脯氨酸内肽酶第14-17页
     ·PEP 的组织分布第14-15页
     ·PEP 的生物学功能第15页
     ·PEP 的作用机理第15-16页
     ·PEP 的晶体结构第16页
     ·PEP 及其抑制剂的应用第16-17页
   ·酶的分离纯化第17-18页
     ·分离纯化的原则第17页
     ·分离纯化的方法第17-18页
   ·本课题研究的内容与意义第18-20页
第2章 材料与方法第20-32页
   ·实验用鱼第20页
   ·试剂第20-21页
     ·层析树脂第20页
     ·荧光合成底物及肽底物第20页
     ·蛋白酶抑制剂第20页
     ·SDS-PAGE 所用试剂第20-21页
   ·实验所用溶剂及配制第21-23页
     ·母液第21页
     ·鲤鱼肌肉 PEP 分离纯化所用缓冲液第21页
     ·PEP 性质分析所用缓冲溶液第21页
     ·SDS-PAGE 所用试剂第21-22页
     ·普通银染色所用试剂第22页
     ·快速银染色所需溶液第22-23页
   ·实验仪器第23页
   ·实验方法第23-32页
     ·蛋白浓度测定第23页
     ·PEP 活力测定第23-24页
     ·蛋白酶纯度的测定第24页
     ·制备 SDS-PAGE 胶第24-25页
     ·SDS-PAGE 银染色法第25-26页
     ·鲤鱼肌肉 PEP 的分离纯化第26-27页
     ·PEP 的性质分析第27-32页
第3章 结果与分析第32-51页
   ·PEP 的分离纯化结果第32-36页
   ·PEP 性质分析第36-51页
     ·肽指纹质量图谱第36-39页
     ·pH 对酶活力和酶稳定性的影响第39页
     ·温度对酶活力和热稳定性的影响第39-40页
     ·酶的热失活动力学第40-44页
     ·底物特异性的研究第44页
     ·酶对多肽与蛋白的分解作用第44-46页
     ·蛋白酶抑制剂对酶活性的影响第46-47页
     ·SUAM-14746 对 PEP 抑制机理第47-48页
     ·金属离子对酶活性的影响第48-49页
     ·动力学参数的测定第49-51页
第4章 讨论第51-54页
   ·鲤鱼 PEP 的分离纯化第51页
   ·PEP 的性质第51-54页
第5章 结论与展望第54-56页
   ·结论第54-55页
   ·展望第55-56页
致谢第56-57页
参考文献第57-61页
在学期间发表的学术论文第61页

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