| 符号说明 | 第1-9页 |
| 摘要 | 第9-10页 |
| Abstract | 第10-12页 |
| 1 引言 | 第12-21页 |
| ·纳豆激酶及溶栓剂 | 第12-13页 |
| ·血栓性疾病的危害 | 第12页 |
| ·血栓形成机理 | 第12页 |
| ·血栓的治疗 | 第12-13页 |
| ·溶栓剂 | 第13页 |
| ·纳豆激酶的介绍 | 第13-15页 |
| ·纳豆激酶的来源及安全 | 第13-14页 |
| ·纳豆激酶的作用机理 | 第14页 |
| ·纳豆激酶的分子结构 | 第14-15页 |
| ·纳豆激酶的理化性质 | 第15页 |
| ·纳豆激酶及产生菌的研究现状 | 第15-18页 |
| ·纳豆激酶产生菌的筛选 | 第16页 |
| ·纳豆激酶发酵条件的优化 | 第16页 |
| ·纳豆激酶的分离纯化 | 第16-18页 |
| ·基因工程技术的应用 | 第18页 |
| ·应用现状及展望 | 第18-19页 |
| ·本课题研究的目的和意义 | 第19-20页 |
| ·技术路线 | 第20-21页 |
| 2 材料与方法 | 第21-38页 |
| ·实验样品 | 第21页 |
| ·主要试剂 | 第21-22页 |
| ·培养基 | 第22-23页 |
| ·实验培养基 | 第22页 |
| ·鉴定培养基 | 第22-23页 |
| ·仪器设备 | 第23-24页 |
| ·实验方法 | 第24-33页 |
| ·粗酶液的制备 | 第24页 |
| ·产纳豆激酶细菌的分离与筛选 | 第24页 |
| ·初筛 | 第24页 |
| ·复筛 | 第24页 |
| ·产纳豆激酶细菌的鉴定 | 第24-28页 |
| ·形态观察 | 第24-25页 |
| ·生理生化鉴定 | 第25-28页 |
| ·16S rDNA 序列的测定 | 第28页 |
| ·纳豆激酶液体发酵条件的优化 | 第28-29页 |
| ·产酶条件的单因素实验 | 第28-29页 |
| ·Plackett-Burman 筛选影响产酶的重要因素设计 | 第29页 |
| ·中心组合实验 | 第29页 |
| ·纳豆激酶的分离纯化 | 第29-32页 |
| ·硫酸铵盐析 | 第29页 |
| ·透析 | 第29-30页 |
| ·Sephadex G-75 凝胶层析 | 第30-31页 |
| ·Q Sepharose Fast Flow 离子交换 | 第31-32页 |
| ·酶学性质的研究 | 第32-33页 |
| ·NK 的最适反应温度 | 第32页 |
| ·NK 的最适反应 pH | 第32页 |
| ·温度对酶稳定性的影响 | 第32-33页 |
| ·pH 对酶稳定性的影响 | 第33页 |
| ·金属离子对酶稳定性的影响 | 第33页 |
| ·分析方法 | 第33-38页 |
| ·酶活的测定 | 第33-34页 |
| ·SDS-PAGE 电泳鉴定蛋白纯度 | 第34-36页 |
| ·蛋白含量的测定 | 第36-38页 |
| 3 结果与分析 | 第38-56页 |
| ·产纳豆激酶细菌的分离与筛选 | 第38-39页 |
| ·初筛 | 第38页 |
| ·复筛 | 第38-39页 |
| ·产纳豆激酶细菌的鉴定 | 第39-41页 |
| ·形态鉴定 | 第39页 |
| ·理化鉴定 | 第39-40页 |
| ·分子鉴定 | 第40-41页 |
| ·产酶条件的优化 | 第41-50页 |
| ·最适发酵培养基的优化 | 第41-44页 |
| ·碳源对产酶的影响 | 第41-42页 |
| ·氮源对产酶的影响 | 第42页 |
| ·营养盐对产酶的影响 | 第42-43页 |
| ·初始 pH 对产酶的影响 | 第43-44页 |
| ·金属离子对产酶的影响 | 第44页 |
| ·最适发酵条件的优化 | 第44-46页 |
| ·种龄对产酶的影响 | 第44-45页 |
| ·接种量对产酶的影响 | 第45页 |
| ·发酵时间对产酶的影响 | 第45-46页 |
| ·装液量对产酶的影响 | 第46页 |
| ·Plackett-Burman 设计筛选影响产酶的重要因素 | 第46-48页 |
| ·中心组合实验 | 第48-50页 |
| ·纳豆激酶的分离纯化 | 第50-53页 |
| ·硫酸铵饱和度的选择 | 第50-51页 |
| ·Sephadex G-75 凝胶层析 | 第51页 |
| ·Q Sepharose Fast Flow 离子交换 | 第51-52页 |
| ·SDS-PAGE 电泳 | 第52-53页 |
| ·酶学性质的研究 | 第53-56页 |
| ·NK 的最适反应温度 | 第53页 |
| ·NK 的最适反应 pH | 第53-54页 |
| ·温度对酶稳定性的影响 | 第54页 |
| ·pH 对酶稳定性的影响 | 第54-55页 |
| ·金属离子对酶稳定性的影响 | 第55-56页 |
| 4 讨论 | 第56-59页 |
| ·纳豆激酶活力的测定 | 第56页 |
| ·不同样品中产纳豆激酶细菌的分析 | 第56页 |
| ·纳豆激酶的分离纯化 | 第56-58页 |
| ·纳豆激酶酶学性质的研究 | 第58-59页 |
| 5 结论 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-65页 |
| 致谢 | 第65-66页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第66页 |
