| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 第1章 绪论 | 第11-20页 |
| 1.1 木质纤维素油脂生产 | 第11-14页 |
| 1.1.1 木质纤维素生物炼制 | 第11页 |
| 1.1.2 油脂酵母概况 | 第11-12页 |
| 1.1.3 高产油脂酵母筛选方法 | 第12-13页 |
| 1.1.4 超离心筛选皮状丝孢酵母 | 第13-14页 |
| 1.2 油脂合成代谢路径 | 第14页 |
| 1.3 酵母细胞壁代谢及其对细胞形态的影响 | 第14-16页 |
| 1.3.1 酵母细胞形态 | 第14-15页 |
| 1.3.2 酵母细胞壁代谢 | 第15-16页 |
| 1.4 酵母遗传操作系统概况 | 第16-18页 |
| 1.4.1 酵母表达载体 | 第16-17页 |
| 1.4.2 酵母转化方法 | 第17-18页 |
| 1.5 本课题的研究内容与意义 | 第18-20页 |
| 第2章 超离心筛选皮状丝孢酵母油脂积累的分子生物学机制解析 | 第20-40页 |
| 2.1 引言 | 第20-21页 |
| 2.2 材料与方法 | 第21-23页 |
| 2.2.1 菌种与培养基 | 第21页 |
| 2.2.2 菌体干重与油脂含量测定 | 第21页 |
| 2.2.3 实时荧光定量PCR (q-RTPCR)实验 | 第21-22页 |
| 2.2.4 胞内乙酰-CoA与NADPH含量测定 | 第22页 |
| 2.2.5 高效液相色谱(HPLC)分析 | 第22页 |
| 2.2.6 透射电子显微镜(TEM)观察 | 第22页 |
| 2.2.7 细胞壁组分测定 | 第22-23页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第23-38页 |
| 2.3.1 T.cutaneum合成培养基油脂发酵 | 第23-24页 |
| 2.3.2 T.cutaneum油脂合成相关基因转录水平分析 | 第24-28页 |
| 2.3.3 T.cutaneum胞内乙酰-CoA与NADPH含量变化 | 第28-29页 |
| 2.3.4 T.cutaneum木质纤维素全糖利用能力验证 | 第29-31页 |
| 2.3.5 T.cutaneum木质纤维素全糖代谢相关基因转录水平分析 | 第31-33页 |
| 2.3.6 T.cutaneum细胞壁合成与分解相关基因转录水平分析 | 第33-37页 |
| 2.3.7 T.cutaneum细胞壁组分变化 | 第37-38页 |
| 2.4 本章小结 | 第38-40页 |
| 第3章 皮状丝孢酵母遗传操作系统的构建 | 第40-51页 |
| 3.1 引言 | 第40页 |
| 3.2 材料与方法 | 第40-41页 |
| 3.2.1 菌种与培养基 | 第40页 |
| 3.2.2 试剂与试剂盒 | 第40-41页 |
| 3.2.3 T.cutaneum感受态的制备 | 第41页 |
| 3.2.4 T.cutaneum电转化流程 | 第41页 |
| 3.2.5 T.cutaneum菌落PCR验证 | 第41页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第41-50页 |
| 3.3.1 T.cutaneum抗生素敏感性探究 | 第41-44页 |
| 3.3.2 单拷贝整合型质粒pUC19-ΔECH1::HYR的构建 | 第44-45页 |
| 3.3.3 pUC19-ΔECH1::HYR的转化与T.cutaneum MS28 ΔECH1::HYR的筛选 | 第45-47页 |
| 3.3.4 T.cutaneum MS28ΔECH1::HYR中绿色荧光蛋白基因GFP的表达 | 第47-48页 |
| 3.3.5 工程菌株稳定性验证 | 第48-50页 |
| 3.4 本章小结 | 第50-51页 |
| 第4章 结论与展望 | 第51-54页 |
| 4.1 结论与创新点 | 第51-53页 |
| 4.2 展望 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-60页 |
| 附录Ⅰ q-RTPCR考察基因及所用引物 | 第60-64页 |
| 附录Ⅱ 表达载体构建所用质粒及引物 | 第64-68页 |
| 学术成果 | 第68-69页 |
| 致谢 | 第69页 |
