| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5页 |
| 第一章 绪论 | 第9-18页 |
| 1.1 海参 | 第9页 |
| 1.2 海参的自溶及研究现状 | 第9-10页 |
| 1.3 水产动物蛋白研究进展 | 第10-11页 |
| 1.3.1 水产动物蛋白质组成及含量研究 | 第10页 |
| 1.3.2 水产动物蛋白提取方法及工艺条件研究 | 第10-11页 |
| 1.4 常用添加剂在水产动物中应用的研究现状 | 第11-12页 |
| 1.4.1 常用添加剂浓缩乳清蛋白粉(WPC) | 第11页 |
| 1.4.2 常用添加剂在水产动物自溶中的研究现状 | 第11-12页 |
| 1.5 海参蛋白研究进展 | 第12-13页 |
| 1.5.1 海参胶原蛋白 | 第12页 |
| 1.5.2 海参胶原蛋白研究进展 | 第12-13页 |
| 1.6 组织蛋白酶L研究进展 | 第13-15页 |
| 1.6.1 组织蛋白酶L | 第13页 |
| 1.6.2 组织蛋白酶L在医学领域的应用及研究进展 | 第13-14页 |
| 1.6.3 组织蛋白酶L在科学领域的应用及研究进展 | 第14页 |
| 1.6.4 组织蛋白酶L与自溶的关系研究进展 | 第14-15页 |
| 1.7 其他基因表达研究进展 | 第15-16页 |
| 1.8 实验工艺条件研究 | 第16页 |
| 1.8.1 RNA提取方法及工艺条件研究 | 第16页 |
| 1.8.2 RT-PCR技术的研究及其进展 | 第16页 |
| 1.9 本课题研究的内容及意义 | 第16-18页 |
| 第二章 材料与方法 | 第18-30页 |
| 2.1 实验材料 | 第18-21页 |
| 2.1.1 材料 | 第18页 |
| 2.1.2 主要实验仪器 | 第18-19页 |
| 2.1.3 主要实验试剂 | 第19-21页 |
| 2.2 实验方法 | 第21-30页 |
| 2.2.1 主要试剂配制 | 第21-23页 |
| 2.2.1.1 高盐溶液的配制 | 第21页 |
| 2.2.1.2 平行电泳缓冲液的配制 | 第21页 |
| 2.2.1.3 琼脂糖凝胶的配制 | 第21页 |
| 2.2.1.4 GelRed染色液的配置 | 第21页 |
| 2.2.1.5 SDS-PAGE电泳相关试剂的配制 | 第21-22页 |
| 2.2.1.6 分离胶和浓缩胶的配制 | 第22页 |
| 2.2.1.7 McIIvaines缓冲液配制 | 第22页 |
| 2.2.1.8 蛋白质提取液 | 第22页 |
| 2.2.1.9 20%三氯乙酸(TCA)溶液的配制 | 第22-23页 |
| 2.2.1.10 Folin—酚溶液的配制 | 第23页 |
| 2.2.2 Folin—酚法绘制蛋白质标准曲线 | 第23-24页 |
| 2.2.3 原料预处理 | 第24页 |
| 2.2.4 海参体壁蛋白质提取 | 第24-25页 |
| 2.2.4.1 用蛋白质提取液提取罗非鱼肉、鱼皮、海参体壁和海参筋蛋白对照 | 第24页 |
| 2.2.4.2 4℃条件下海参体壁自溶过程中蛋白质的变化 | 第24-25页 |
| 2.2.4.3 46℃条件下海参体壁自溶过程中蛋白质的变化 | 第25页 |
| 2.2.4.4 抑制剂(E-64,碘乙酸,抗蛋白酶)存在条件下海参体壁自溶 | 第25页 |
| 2.2.4.5 添加剂浓缩乳清蛋白粉(WPC)存在条件下海参体壁自溶 | 第25页 |
| 2.2.5 SDS-PAGE电泳 | 第25页 |
| 2.2.6 TCA可溶性寡肽含量的测定 | 第25-26页 |
| 2.2.7 海参体壁总RNA提取(Trizol法提取) | 第26页 |
| 2.2.8 RNA定量计算 | 第26-27页 |
| 2.2.9 逆转录合成cDNA | 第27-28页 |
| 2.2.10 聚合酶链反应(PCR) | 第28-29页 |
| 2.2.11 琼脂糖凝胶电泳 | 第29-30页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第30-50页 |
| 3.1 用蛋白质提取液提取罗非鱼肉、鱼皮、海参体壁和海参筋蛋白对照 | 第30-32页 |
| 3.2 不同温度下海参体壁蛋白的提取及SDS-PAGE电泳 | 第32-34页 |
| 3.2.1 4℃条件下海参体壁蛋白的提取及SDS-PAGE电泳分析 | 第32-33页 |
| 3.2.2 46℃条件下海参体壁蛋白的提取及SDS-PAGE电泳分析 | 第33-34页 |
| 3.3 抑制剂及添加剂对海参体壁自溶的影响 | 第34-38页 |
| 3.3.1 抑制剂(E-64,碘乙酸,抗蛋白酶)对海参体壁自溶的影响 | 第34-36页 |
| 3.3.2 乳清蛋白(WPC)对海参体壁自溶的影响 | 第36-38页 |
| 3.4 海参总RNA提取 | 第38-39页 |
| 3.4.1 高盐溶液质量的影响 | 第38-39页 |
| 3.4.2 乙醇洗涤的影响 | 第39页 |
| 3.5 引物序列设计 | 第39-45页 |
| 3.6 海参体壁紫外前后组织蛋白酶C(CC)、衰老相关蛋白(SAP)、纤维蛋白原A(FGL)和主要卵黄蛋白2 (MYP2)基因表达 | 第45-50页 |
| 第四章 结论 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-58页 |
| 致谢 | 第58-59页 |
| 附录 | 第59页 |
