| 摘要 | 第5-7页 |
| ABSTRACT | 第7-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-51页 |
| 1.1 引言 | 第14-17页 |
| 1.1.1 中国苹果产业发展现状 | 第14-15页 |
| 1.1.2 中国苹果加工产业现状 | 第15页 |
| 1.1.3 中国浓缩苹果汁产业现状 | 第15-16页 |
| 1.1.4 中国浓缩苹果汁加工中存在的问题 | 第16-17页 |
| 1.2 脂环酸芽孢杆菌研究现状 | 第17-23页 |
| 1.2.1 脂环酸芽孢杆菌简介 | 第17-18页 |
| 1.2.2 脂环酸芽孢杆菌对果汁的危害 | 第18-19页 |
| 1.2.3 脂环酸芽孢杆菌鉴定方法研究 | 第19-21页 |
| 1.2.4 脂环酸芽孢杆菌检测方法研究 | 第21-23页 |
| 1.3 微生物分离与富集方法 | 第23-29页 |
| 1.3.1 物理分离法 | 第23-26页 |
| 1.3.2 生物亲和分离法 | 第26-29页 |
| 1.4 免疫磁性分离技术发展现状 | 第29-46页 |
| 1.4.1 免疫磁性分离技术简介 | 第29-30页 |
| 1.4.2 免疫磁性分离技术原理 | 第30-31页 |
| 1.4.3 免疫磁性分离技术特点 | 第31页 |
| 1.4.4 免疫磁性微球的结构与性质 | 第31-35页 |
| 1.4.5 免疫磁性微球的制备 | 第35-38页 |
| 1.4.6 免疫磁性微球的应用 | 第38-43页 |
| 1.4.7 免疫磁性微球与快速检测方法联用 | 第43-46页 |
| 1.5 选题依据及研究内容 | 第46-51页 |
| 1.5.1 研究背景及意义 | 第46-48页 |
| 1.5.2 主要研究内容 | 第48-50页 |
| 1.5.3 研究技术路线 | 第50-51页 |
| 第二章 脂环酸芽孢杆菌多克隆抗体制备及特异性评价 | 第51-64页 |
| 2.1 材料与方法 | 第51-58页 |
| 2.1.1 菌种及培养基 | 第51-52页 |
| 2.1.2 试验材料及仪器 | 第52-53页 |
| 2.1.3 主要试剂及溶液配制 | 第53-54页 |
| 2.1.4 多克隆抗体制备及纯化 | 第54-56页 |
| 2.1.5 抗体蛋白浓度测定 | 第56页 |
| 2.1.6 抗体纯度鉴定 | 第56页 |
| 2.1.7 间接 ELISA 检测抗体效价 | 第56-57页 |
| 2.1.8 抗体特异性评价 | 第57-58页 |
| 2.2 结果与分析 | 第58-62页 |
| 2.2.1 抗体产生进程 | 第58-59页 |
| 2.2.2 抗体纯度测定 | 第59-60页 |
| 2.2.3 抗体蛋白浓度测定 | 第60页 |
| 2.2.4 抗体效价测定 | 第60-61页 |
| 2.2.5 ELISA 检测体系对抗体特异性评价 | 第61-62页 |
| 2.2.6 Western blot 检测体系对抗体特异性评价 | 第62页 |
| 2.3 小结与讨论 | 第62-64页 |
| 第三章 脂环酸芽孢杆菌免疫磁性微球制备及机理研究 | 第64-78页 |
| 3.1 材料与方法 | 第64-68页 |
| 3.1.1 材料与仪器 | 第64页 |
| 3.1.2 磁性纳米微球的制备及表征 | 第64-67页 |
| 3.1.3 免疫磁性微球的制备 | 第67-68页 |
| 3.1.4 免疫磁性微球生物活性评价 | 第68页 |
| 3.2 结果与分析 | 第68-76页 |
| 3.2.1 磁性微球的表征及结果分析 | 第68-71页 |
| 3.2.2 免疫磁性微球性能评价 | 第71-72页 |
| 3.2.3 免疫磁性微球制备机理 | 第72-76页 |
| 3.3 小结与讨论 | 第76-78页 |
| 第四章 脂环酸芽孢杆菌免疫磁性分离体系的构建及条件优化 | 第78-91页 |
| 4.1 材料与方法 | 第78-82页 |
| 4.1.1 试验材料 | 第78页 |
| 4.1.2 免疫磁性微球制备工艺参数优化 | 第78-81页 |
| 4.1.3 免疫磁性微球封闭条件优化 | 第81页 |
| 4.1.4 脂环酸芽孢杆菌免疫捕获条件优化 | 第81-82页 |
| 4.1.5 免疫磁性分离方法特异性评价 | 第82页 |
| 4.2 结果与分析 | 第82-89页 |
| 4.2.1 免疫磁性微球制备条件优化 | 第82-83页 |
| 4.2.2 多克隆抗体固定化等温吸附模型 | 第83-84页 |
| 4.2.3 多克隆抗体固定化吸附动力学模型 | 第84-85页 |
| 4.2.4 免疫磁性微球封闭条件优化 | 第85-86页 |
| 4.2.5 免疫磁性分离技术体系条件优化 | 第86-88页 |
| 4.2.6 免疫磁性分离技术特异性评价 | 第88-89页 |
| 4.3 小结与讨论 | 第89-91页 |
| 第五章 苹果汁中脂环酸芽孢杆菌的 IMS-ELISA 检测与评价 | 第91-108页 |
| 5.1 材料与方法 | 第91-95页 |
| 5.1.1 菌种及培养基 | 第91-92页 |
| 5.1.2 主要试剂及仪器 | 第92-93页 |
| 5.1.3 间接 ELISA 检测方法优化 | 第93页 |
| 5.1.4 苹果汁中脂环酸芽孢杆菌的间接 ELISA 检测 | 第93-94页 |
| 5.1.5 IMS-ELISA 检测体系建立 | 第94页 |
| 5.1.6 IMS-ELISA 检测体系灵敏度评价 | 第94页 |
| 5.1.7 IMS-ELISA 检测体系特异性评价 | 第94页 |
| 5.1.8 加标苹果汁中脂环酸芽孢杆菌的检测 | 第94-95页 |
| 5.1.9 实际苹果汁中脂环酸芽孢杆菌的检测 | 第95页 |
| 5.2 结果与分析 | 第95-106页 |
| 5.2.1 间接 ELISA 方法检测条件优化 | 第95-99页 |
| 5.2.2 苹果汁中脂环酸芽孢杆菌的检测 | 第99-101页 |
| 5.2.3 IMS-ELISA 检测方法的灵敏度评价 | 第101页 |
| 5.2.4 免疫磁性分离对间接 ELISA 检测体系的影响 | 第101-102页 |
| 5.2.5 IMS-ELISA 检测方法的特异性评价 | 第102-103页 |
| 5.2.6 苹果汁中脂环酸芽孢杆菌的检测 | 第103-105页 |
| 5.2.7 苹果汁样品的检测及评价 | 第105-106页 |
| 5.3 小结与讨论 | 第106-108页 |
| 第六章 苹果汁中 A. acidoterrestris 的 IMS-PCR 快速检测与评价 | 第108-115页 |
| 6.1 材料与方法 | 第108-111页 |
| 6.1.1 菌种及培养基 | 第108页 |
| 6.1.2 主要试剂及仪器 | 第108-109页 |
| 6.1.3 主要试剂配制方法 | 第109页 |
| 6.1.4 PCR 扩增引物合成 | 第109页 |
| 6.1.5 DNA 模板制备 | 第109-110页 |
| 6.1.6 IMS-PCR 扩增体系建立 | 第110页 |
| 6.1.7 琼脂糖凝胶电泳 | 第110-111页 |
| 6.1.8 IMS-PCR 灵敏度分析 | 第111页 |
| 6.1.9 IMS-PCR 特异性分析 | 第111页 |
| 6.1.10 苹果汁样品中 A. acidoterrestris 的检测 | 第111页 |
| 6.2 结果与分析 | 第111-114页 |
| 6.2.1 IMS-PCR 检测灵敏度评价 | 第111-112页 |
| 6.2.2 IMS-PCR 检测特异性评价 | 第112-113页 |
| 6.2.3 苹果汁样品的检测 | 第113-114页 |
| 6.3 小结与讨论 | 第114-115页 |
| 第七章 苹果汁中 A. acidoterrestris 的 IMS-Real-time PCR 快速检测与评价 | 第115-127页 |
| 7.1 材料与方法 | 第115-118页 |
| 7.1.1 菌种及培养基 | 第115-116页 |
| 7.1.2 主要试剂及仪器 | 第116页 |
| 7.1.3 引物及 TaqMan 荧光探针设计 | 第116页 |
| 7.1.4 模板制备 | 第116页 |
| 7.1.5 Real-time PCR 体系建立 | 第116-117页 |
| 7.1.6 Real-time PCR 标准曲线建立及结果判读 | 第117页 |
| 7.1.7 Real-time PCR 特异性及灵敏度评价 | 第117页 |
| 7.1.8 IMS-Real-time PCR 检测体系的建立 | 第117页 |
| 7.1.9 加标果汁样品的 IMS- Real-time PCR 检测 | 第117-118页 |
| 7.1.10 实际样品中 A. acidoterrestris 的检测 | 第118页 |
| 7.2 结果与分析 | 第118-125页 |
| 7.2.1 Real-time PCR 引物及探针的设计与合成 | 第118-119页 |
| 7.2.2 Real-time PCR 反应体系特异性评价 | 第119-121页 |
| 7.2.3 Real-time PCR 反应体系灵敏度评价 | 第121-122页 |
| 7.2.4 果汁样品中 A. acidoterrestris 的 IMS- Real-time PCR 检测 | 第122-124页 |
| 7.2.5 苹果汁及猕猴桃产品的检测 | 第124-125页 |
| 7.3 小结与讨论 | 第125-127页 |
| 第八章 结论、讨论与创新点 | 第127-132页 |
| 8.1 结论 | 第127-129页 |
| 8.2 讨论 | 第129-130页 |
| 8.3 创新点 | 第130-132页 |
| 参考文献 | 第132-149页 |
| 致谢 | 第149-150页 |
| 作者简介 | 第150-152页 |
