摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-7页 |
1 绪论 | 第11-19页 |
1.1 聚羟基丁酸(PHB)概述 | 第11-12页 |
1.1.1 聚羟基脂肪酸酯(PHA)简介 | 第11页 |
1.1.2 合成PHB的主要菌株 | 第11-12页 |
1.2 聚羟基丁酸(PHB)的应用 | 第12-13页 |
1.2.1 PHB在医学领域的应用 | 第12-13页 |
1.2.2 PHB在环境保护领域的应用 | 第13页 |
1.2.3 PHB在农业上的应用 | 第13页 |
1.3 PHB的合成方法 | 第13-14页 |
1.3.1 微生物合成法 | 第13-14页 |
1.3.2 基因合成法 | 第14页 |
1.3.3 化学合成法 | 第14页 |
1.4 PHB的检测方法 | 第14-16页 |
1.4.1 染色法 | 第14-15页 |
1.4.2 紫外分光光法 | 第15页 |
1.4.3 高效液相色谱法 | 第15页 |
1.4.4 傅里叶红外光谱法 | 第15页 |
1.4.5 核磁共振法 | 第15-16页 |
1.5 PHB的提取方法 | 第16页 |
1.5.1 NaClO提取法 | 第16页 |
1.5.2 机械破碎法 | 第16页 |
1.6 微生物发酵法生产PHB的国内外进展 | 第16-17页 |
1.7 研究目的和意义 | 第17页 |
1.8 主要研究内容、技术路线 | 第17-19页 |
1.8.1 主要研究内容 | 第17-18页 |
1.8.2 技术路线 | 第18-19页 |
2 产聚羟基丁酸(PHB)菌株的筛选与鉴定 | 第19-27页 |
2.1 引言 | 第19页 |
2.2 材料与方法 | 第19-20页 |
2.2.1 材料与仪器 | 第19页 |
2.2.2 供试菌株 | 第19-20页 |
2.2.3 培养基 | 第20页 |
2.2.4 染色液的配制 | 第20页 |
2.3 实验方法 | 第20-22页 |
2.3.1 菌株的分离与筛选 | 第20-21页 |
2.3.2 PHB含量测定 | 第21页 |
2.3.3 形态特征观察 | 第21页 |
2.3.4 16S rDNA基因序列分析 | 第21页 |
2.3.5 生理生化特征鉴定 | 第21-22页 |
2.3.6 遗传稳定性试验 | 第22页 |
2.4 结果 | 第22-25页 |
2.4.1 产PHB菌株的筛选与分离 | 第22页 |
2.4.2 形态特征 | 第22-23页 |
2.4.3 基因序列分析及其系统发育分析 | 第23-24页 |
2.4.4 生理生化鉴定 | 第24页 |
2.4.5 遗传稳定性 | 第24-25页 |
2.5 结论 | 第25-27页 |
3 聚羟基丁酸(PHB)检测方法的建立 | 第27-37页 |
3.1 紫外分光光度法(UV)测定胞内PHB方法的建立 | 第27-32页 |
3.1.1 引言 | 第27页 |
3.1.2 实验材料 | 第27页 |
3.1.3 实验方法 | 第27-28页 |
3.1.4 实验结果 | 第28-31页 |
3.1.5 小结 | 第31-32页 |
3.2 高效液相色谱法(HPLC)检测胞内的PHB方法的建立 | 第32-35页 |
3.2.1 引言 | 第32页 |
3.2.2 实验材料 | 第32页 |
3.2.3 实验方法 | 第32-33页 |
3.2.4 实验结果 | 第33-35页 |
3.2.5 小结 | 第35页 |
3.3 结论 | 第35-37页 |
4 聚羟基丁酸发酵工艺的初步优化 | 第37-55页 |
4.1 引言 | 第37页 |
4.2 实验材料 | 第37-38页 |
4.2.1 主要仪器与试剂 | 第37-38页 |
4.2.2 实验菌株 | 第38页 |
4.2.3 优化前的与培养基 | 第38页 |
4.3 实验方法 | 第38-39页 |
4.3.1 种子培养基的优化 | 第38页 |
4.3.2 最优种龄 | 第38-39页 |
4.3.3 摇瓶发酵条件的优化 | 第39页 |
4.4 实验结果 | 第39-53页 |
4.4.1 种子培养基优化 | 第39-42页 |
4.4.2 最优种龄 | 第42-43页 |
4.4.3 摇瓶发酵培养单因素试验 | 第43-48页 |
4.4.4 Plackett-Burman试验 | 第48-49页 |
4.4.5 最陡爬坡实验 | 第49-50页 |
4.4.6 响应面分析法 | 第50-53页 |
4.5 结论 | 第53-55页 |
5 5L发酵罐发酵生产PHB工艺研究 | 第55-61页 |
5.1 引言 | 第55页 |
5.2 材料与方法 | 第55-56页 |
5.2.1 试验材料 | 第55-56页 |
5.2.2 试验方法 | 第56页 |
5.3 结果与讨论 | 第56-60页 |
5.3.1 通气量对PHB发酵过程的影响 | 第56-57页 |
5.3.2 温度对PHB发酵过程的影响 | 第57页 |
5.3.3 pH对PHB发酵过程的影响 | 第57-58页 |
5.3.4 不同时间段补加碳源对PHB发酵过程的影响 | 第58-59页 |
5.3.5 复合碳氮源补料 | 第59-60页 |
5.4 结论 | 第60-61页 |
6 PHB的提取工艺优化 | 第61-73页 |
6.1 引言 | 第61页 |
6.2 实验材料 | 第61-62页 |
6.2.1 主要仪器级试剂 | 第61-62页 |
6.2.2 试验菌株 | 第62页 |
6.3 实验方法 | 第62-64页 |
6.3.1 菌粉制备 | 第62页 |
6.3.2 单因素实验 | 第62页 |
6.3.3 响应面分析实验 | 第62-63页 |
6.3.4 PHB的纯化及纯度分析 | 第63页 |
6.3.5 提取物的定性分析 | 第63-64页 |
6.4 结果与讨论 | 第64-72页 |
6.4.1 单因素实验 | 第64-67页 |
6.4.2 响应面实验 | 第67-70页 |
6.4.3 PHB纯度分析 | 第70页 |
6.4.4 提取物的定性分析 | 第70-72页 |
6.5 结论 | 第72-73页 |
7 讨论 | 第73-75页 |
参考文献 | 第75-83页 |
致谢 | 第83-85页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第85-86页 |