| 摘要 | 第4-5页 |
| abstract | 第5页 |
| 第一章 文献综述 | 第9-20页 |
| 1.1 丙酮和异丙醇生物合成研究现状 | 第9-11页 |
| 1.2 大肠杆菌糖酵解途径碳源损失及解决 | 第11-15页 |
| 1.2.1 磷酸转酮酶 | 第12-13页 |
| 1.2.2 非氧化酵解途径（non-oxidative glycolysis pathway） | 第13-15页 |
| 1.3 乙酸循环 | 第15-18页 |
| 1.3.1 通过调控acs和ackA-pta基因来减少乙酸合成 | 第16-17页 |
| 1.3.2 乙酰化对基因acs的调节作用 | 第17-18页 |
| 1.4 本课题研究思路与研究内容 | 第18-20页 |
| 1.4.1 本课题研究思路 | 第18-19页 |
| 1.4.2 本课题研究内容和技术路线 | 第19-20页 |
| 第二章 材料与方法 | 第20-35页 |
| 2.1 实验材料 | 第20-22页 |
| 2.1.1 实验菌株和质粒 | 第20-21页 |
| 2.1.2 实验相关仪器 | 第21-22页 |
| 2.2 实验药品和试剂、培养基配制 | 第22-25页 |
| 2.2.1 实验药品 | 第22-23页 |
| 2.2.2 试剂和培养基配制 | 第23-25页 |
| 2.3 试验方法 | 第25-35页 |
| 2.3.1 大肠杆菌质粒DNA的提取 | 第25页 |
| 2.3.2 PCR扩增 | 第25-27页 |
| 2.3.3 DNA的酶切、去磷酸化和连接 | 第27-28页 |
| 2.3.4 DNA片段的回收和纯化 | 第28页 |
| 2.3.5 大肠杆菌化学转化感受态细胞的制备 | 第28-29页 |
| 2.3.6 大肠杆菌化转感受态细胞的转化 | 第29页 |
| 2.3.7 电转化感受态细胞制备 | 第29-30页 |
| 2.3.8 电转化感受态细胞的转化 | 第30页 |
| 2.3.9 琼脂糖凝胶电泳 | 第30页 |
| 2.3.10 大肠杆菌基因组的提取 | 第30-31页 |
| 2.3.11 大肠杆菌基因的敲除 | 第31-32页 |
| 2.3.12 菌株发酵 | 第32-33页 |
| 2.3.13 发酵产物的测定 | 第33-34页 |
| 2.3.14 葡萄糖的测定 | 第34-35页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第35-54页 |
| 3.1 丙酮异丙醇外源代谢途径的引入 | 第35-39页 |
| 3.1.1 丙酮表达载体构建 | 第35-36页 |
| 3.1.2 异丙醇表达载体构建 | 第36-37页 |
| 3.1.3 引入外源途径后E.coli JM109菌株摇瓶发酵结果 | 第37-39页 |
| 3.2 基于基因组尺度代谢网络模型的计算模拟 | 第39-41页 |
| 3.3 NOG途径的引入 | 第41-45页 |
| 3.3.1 磷酸转酮酶合成基因（fxpk）的引入 | 第41-42页 |
| 3.3.2 过表达FBP | 第42-43页 |
| 3.3.3 NOG途径对丙酮和异丙醇产量和得率的影响 | 第43-45页 |
| 3.4 提高NOG途径通量 | 第45-49页 |
| 3.4.1 过表达转醛醇酶基因（tal A） | 第46-47页 |
| 3.4.2 过表达转酮醇酶基因(tktA) | 第47-48页 |
| 3.4.3 提高非氧化酵解途径对产量和得率的影响 | 第48-49页 |
| 3.5 乙酸、乙酰辅酶A、乙酰磷酸平衡调节 | 第49-54页 |
| 3.5.1 过表达乙酰辅酶A合成酶基因（acs） | 第50-51页 |
| 3.5.2 敲除肽基赖氨酸乙酰转移酶基因（pka） | 第51页 |
| 3.5.3 过表达去乙酰化酶基因（cobB） | 第51-52页 |
| 3.5.4 对乙酸循环改造后菌株发酵结果 | 第52-54页 |
| 第四章 结论与展望 | 第54-56页 |
| 4.1 实验结论 | 第54页 |
| 4.2 展望 | 第54-56页 |
| 参考文献 | 第56-60页 |
| 发表论文和参加科研情况说明 | 第60-61页 |
| 附录 | 第61-62页 |
| 致谢 | 第62-63页 |
