| 中文摘要 | 第4-5页 |
| abstract | 第5页 |
| 第一章 文献综述 | 第9-21页 |
| 1.1 蓝细菌 | 第9-12页 |
| 1.1.1 蓝细菌概述 | 第9页 |
| 1.1.2 集胞藻PCC 6803 简介 | 第9-10页 |
| 1.1.3 以蓝细菌进行抗逆研究的优势 | 第10页 |
| 1.1.4 集胞藻PCC 6803 的分子生物学操作系统 | 第10-12页 |
| 1.2 镉离子研究 | 第12-16页 |
| 1.2.1 镉离子对细胞的毒性 | 第12-13页 |
| 1.2.2 蓝细菌抗镉离子机制研究进展 | 第13-15页 |
| 1.2.3 蓝细菌吸附消除镉离子研究进展 | 第15-16页 |
| 1.2.4 蓝细菌抗镉离子菌株改造研究进展 | 第16页 |
| 1.3 DNA-蛋白质相互作用分析 | 第16-20页 |
| 1.3.1 DNA-蛋白质相互作用研究方法 | 第17-19页 |
| 1.3.2 蓝细菌中DNA-蛋白质相互作用研究进展 | 第19-20页 |
| 1.4 本文的主要研究内容 | 第20-21页 |
| 第二章 集胞藻PCC 6803 中应答调控蛋白Sll0649的功能鉴定 | 第21-33页 |
| 2.1 实验材料 | 第21-23页 |
| 2.1.1 实验对象 | 第21页 |
| 2.1.2 实验主要试剂 | 第21-22页 |
| 2.1.3 实验主要仪器 | 第22页 |
| 2.1.4 培养基及主要溶液 | 第22-23页 |
| 2.2 实验方法 | 第23-27页 |
| 2.2.1 重组菌株构建的流程 | 第23页 |
| 2.2.2 重组质粒的构建 | 第23-25页 |
| 2.2.3 重组质粒的富集及验证 | 第25-26页 |
| 2.2.4 互补突变株的构建及验证 | 第26-27页 |
| 2.2.5 菌株的表型分析 | 第27页 |
| 2.3 实验结果与讨论 | 第27-32页 |
| 2.3.1 重组质粒pJA2-sll0649的构建 | 第27-30页 |
| 2.3.2 集胞藻PCC 6803 互补菌株的验证 | 第30-31页 |
| 2.3.3 镉离子胁迫条件下的表型分析 | 第31-32页 |
| 2.4 本章小结 | 第32-33页 |
| 第三章 DAP-chip技术鉴定集胞藻PCC 6803 中应答调控蛋白Sll0649的下游调控位点 | 第33-45页 |
| 3.1 实验材料 | 第33-35页 |
| 3.1.1 实验对象 | 第33页 |
| 3.1.2 实验主要试剂 | 第33页 |
| 3.1.3 实验主要仪器 | 第33-34页 |
| 3.1.4 培养基及主要溶液配置 | 第34-35页 |
| 3.2 实验方法 | 第35-40页 |
| 3.2.1 集胞藻PCC 6803 基因组的准备实验 | 第35页 |
| 3.2.2 His6-Sll0649蛋白的过量表达及纯化 | 第35-37页 |
| 3.2.3 目的DNA的获得 | 第37页 |
| 3.2.4 qPCR对调控位点的鉴定 | 第37-39页 |
| 3.2.5 EMSAs对Sll0649与slr0946启动子区域结合的验证 | 第39-40页 |
| 3.3 实验结果与讨论 | 第40-44页 |
| 3.3.1 集胞藻PCC 6803 全基因组的超声破碎 | 第40-41页 |
| 3.3.2 His6-Sll0649蛋白的纯化 | 第41页 |
| 3.3.3 His6-Sll0649与基因组的孵育及再纯化 | 第41-42页 |
| 3.3.4 qPCR的结果分析 | 第42-43页 |
| 3.3.5 EMSAs对Sll0649与slr0946启动子区域结合的验证 | 第43-44页 |
| 3.4 本章小结 | 第44-45页 |
| 第四章 镉离子胁迫相关基因slr0946的功能鉴定 | 第45-60页 |
| 4.1 实验材料 | 第45-46页 |
| 4.1.1 实验对象 | 第45页 |
| 4.1.2 实验主要试剂 | 第45-46页 |
| 4.1.3 实验主要仪器 | 第46页 |
| 4.1.4 培养基及主要溶液配置 | 第46页 |
| 4.2 实验方法 | 第46-51页 |
| 4.2.1 基因敲除突变株的构建及验证 | 第46-50页 |
| 4.2.2 互补突变株的构建及验证 | 第50-51页 |
| 4.2.3 菌株的表型分析 | 第51页 |
| 4.3 实验结果与讨论 | 第51-59页 |
| 4.3.1 Δslr0946突变株的构建及验证 | 第51-54页 |
| 4.3.2 Δslr0946/pJA2-slr0946突变株的构建及验证 | 第54-57页 |
| 4.3.3 胁迫条件下耐受性的表型分析 | 第57-59页 |
| 4.4 本章小结 | 第59-60页 |
| 第五章 镉离子耐受性菌株的构建及胁迫耐受性分析 | 第60-71页 |
| 5.1 实验材料 | 第60-61页 |
| 5.1.1 实验对象 | 第60页 |
| 5.1.2 实验主要试剂 | 第60页 |
| 5.1.3 实验主要仪器 | 第60页 |
| 5.1.4 培养基及主要溶液 | 第60-61页 |
| 5.2 实验方法 | 第61-64页 |
| 5.2.1 重组质粒的构建 | 第61页 |
| 5.2.2 重组质粒的富集及验证 | 第61页 |
| 5.2.3 过表达突变体的构建及验证 | 第61-62页 |
| 5.2.4 菌株的表型分析 | 第62页 |
| 5.2.5 RT-PCR鉴定基因的表达水平 | 第62-64页 |
| 5.3 实验结果与讨论 | 第64-70页 |
| 5.3.1 重组质粒pJA2-Gene的构建 | 第64-66页 |
| 5.3.2 集胞藻PCC 6803 过表达菌株的构建及验证 | 第66-68页 |
| 5.3.3 镉离子胁迫条件下的表型分析 | 第68-69页 |
| 5.3.4 RT-PCR鉴定基因的表达量 | 第69-70页 |
| 5.4 本章小结 | 第70-71页 |
| 第六章 结论与展望 | 第71-73页 |
| 参考文献 | 第73-80页 |
| 发表论文和参加科研情况说明 | 第80-81页 |
| 致谢 | 第81-82页 |
