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基于单克隆抗体的伏马毒素ELISA的研究

摘要第4-5页
ABSTRACT第5-6页
1 前言第10-17页
    1.1 伏马毒素的概况第10-15页
        1.1.1 伏马毒素的理化性质第10-11页
        1.1.2 伏马毒素的危害第11页
        1.1.3 伏马毒素的污染第11-12页
        1.1.4 伏马毒素的限量第12页
        1.1.5 伏马毒素检测方法的研究进展第12-15页
    1.2 单克隆抗体技术第15-16页
        1.2.1 单克隆抗体技术及其创新第15页
        1.2.2 单克隆抗体的应用第15-16页
    1.3 论文研究的目的及意义第16页
    1.4 论文研究的内容第16-17页
2 材料与方法第17-34页
    2.1 实验材料第17-21页
        2.1.1 主要药品和试剂第17-18页
        2.1.2 主要仪器及设备第18-19页
        2.1.3 实验动物和细胞第19页
        2.1.4 常用溶液的配制第19-21页
    2.2 实验方法第21-34页
        2.2.1 伏马毒素B_1完全抗原的制备与鉴定第21-24页
        2.2.2 伏马毒素B_1单克隆抗体的制备第24-27页
        2.2.3 伏马毒素B_1单克隆抗体的亚型鉴定及纯化第27-28页
        2.2.4 胶体金-羊抗鼠酶标二抗的制备与鉴定第28-29页
        2.2.5 伏马毒素B_1单克隆抗体间接竞争ELISA的建立第29-30页
        2.2.6 伏马毒素B_1单克隆抗体直接竞争ELISA的建立第30-31页
        2.2.7 伏马毒素B_1单克隆抗体胶体金增强间接竞争ELISA的建立第31-32页
        2.2.8 实际样品检测第32页
        2.2.9 仪器分析法确证第32-34页
3 结果与讨论第34-52页
    3.1 伏马毒素B_1免疫原及包被原的鉴定第34页
    3.2 伏马毒素B_1单克隆抗体的制备第34-36页
        3.2.1 小鼠抗血清测定结果第34-35页
        3.2.2 细胞融合与筛选第35-36页
        3.2.3 腹水纯化及单克隆抗体亚型的鉴定第36页
    3.3 胶体金-羊抗鼠酶标二抗的鉴定第36-39页
        3.3.1 胶体金的鉴定第36-37页
        3.3.2 胶体金-HRP-羊抗鼠酶标二抗的鉴定第37-39页
    3.4 伏马毒素B_1单克隆抗体间接竞争ELISA的建立第39-42页
        3.4.1 包被原及抗体稀释倍数的优化第39页
        3.4.2 HRP-羊抗鼠IgA酶标二抗稀释倍数的优化第39-40页
        3.4.3 封闭液的优化第40页
        3.4.4 标准品与抗体稀释液的优化第40-41页
        3.4.5 间接竞争ELISA标准曲线第41页
        3.4.6 方法特异性的测定第41-42页
    3.5 伏马毒素B_1单克隆抗体直接竞争ELISA的建立第42-44页
        3.5.1 抗体及酶标抗原稀释倍数的优化第42页
        3.5.2 封闭液的优化第42-43页
        3.5.3 标准品与酶标抗原稀释液的pH优化第43页
        3.5.4 直接竞争ELISA标准曲线第43-44页
        3.5.5 方法特异性的测定第44页
    3.6 伏马毒素B_1单克隆抗体胶体金增强间接竞争ELISA的建立第44-48页
        3.6.1 包被原及抗体稀释倍数的优化第44-45页
        3.6.2 胶体金-HRP-羊抗鼠IgA酶标二抗稀释倍数的优化第45页
        3.6.3 封闭液的优化第45-46页
        3.6.4 标准品与抗体稀释液的优化第46页
        3.6.5 胶体金增强间接竞争ELISA标准曲线第46-47页
        3.6.6 方法特异性的测定第47页
        3.6.7 与传统ELISA的比较第47-48页
    3.7 样品处理及添加回收实验第48-50页
        3.7.1 样品基质干扰消除第49页
        3.7.2 样品添加回收率的测定第49-50页
    3.8 仪器分析方法确证第50-52页
        3.8.1 HPLC-MS/MS标准曲线的建立第50页
        3.8.2 添加回收率的测定第50-52页
4 结论第52-54页
    4.1 全文总结第52页
    4.2 论文的创新点第52-53页
    4.3 论文的不足之处第53-54页
5 展望第54-55页
6 参考文献第55-62页
7 攻读硕士学位期间发表论文情况第62-63页
8 致谢第63页

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