摘要 | 第4-5页 |
ABSTRACT | 第5-6页 |
1 前言 | 第10-17页 |
1.1 伏马毒素的概况 | 第10-15页 |
1.1.1 伏马毒素的理化性质 | 第10-11页 |
1.1.2 伏马毒素的危害 | 第11页 |
1.1.3 伏马毒素的污染 | 第11-12页 |
1.1.4 伏马毒素的限量 | 第12页 |
1.1.5 伏马毒素检测方法的研究进展 | 第12-15页 |
1.2 单克隆抗体技术 | 第15-16页 |
1.2.1 单克隆抗体技术及其创新 | 第15页 |
1.2.2 单克隆抗体的应用 | 第15-16页 |
1.3 论文研究的目的及意义 | 第16页 |
1.4 论文研究的内容 | 第16-17页 |
2 材料与方法 | 第17-34页 |
2.1 实验材料 | 第17-21页 |
2.1.1 主要药品和试剂 | 第17-18页 |
2.1.2 主要仪器及设备 | 第18-19页 |
2.1.3 实验动物和细胞 | 第19页 |
2.1.4 常用溶液的配制 | 第19-21页 |
2.2 实验方法 | 第21-34页 |
2.2.1 伏马毒素B_1完全抗原的制备与鉴定 | 第21-24页 |
2.2.2 伏马毒素B_1单克隆抗体的制备 | 第24-27页 |
2.2.3 伏马毒素B_1单克隆抗体的亚型鉴定及纯化 | 第27-28页 |
2.2.4 胶体金-羊抗鼠酶标二抗的制备与鉴定 | 第28-29页 |
2.2.5 伏马毒素B_1单克隆抗体间接竞争ELISA的建立 | 第29-30页 |
2.2.6 伏马毒素B_1单克隆抗体直接竞争ELISA的建立 | 第30-31页 |
2.2.7 伏马毒素B_1单克隆抗体胶体金增强间接竞争ELISA的建立 | 第31-32页 |
2.2.8 实际样品检测 | 第32页 |
2.2.9 仪器分析法确证 | 第32-34页 |
3 结果与讨论 | 第34-52页 |
3.1 伏马毒素B_1免疫原及包被原的鉴定 | 第34页 |
3.2 伏马毒素B_1单克隆抗体的制备 | 第34-36页 |
3.2.1 小鼠抗血清测定结果 | 第34-35页 |
3.2.2 细胞融合与筛选 | 第35-36页 |
3.2.3 腹水纯化及单克隆抗体亚型的鉴定 | 第36页 |
3.3 胶体金-羊抗鼠酶标二抗的鉴定 | 第36-39页 |
3.3.1 胶体金的鉴定 | 第36-37页 |
3.3.2 胶体金-HRP-羊抗鼠酶标二抗的鉴定 | 第37-39页 |
3.4 伏马毒素B_1单克隆抗体间接竞争ELISA的建立 | 第39-42页 |
3.4.1 包被原及抗体稀释倍数的优化 | 第39页 |
3.4.2 HRP-羊抗鼠IgA酶标二抗稀释倍数的优化 | 第39-40页 |
3.4.3 封闭液的优化 | 第40页 |
3.4.4 标准品与抗体稀释液的优化 | 第40-41页 |
3.4.5 间接竞争ELISA标准曲线 | 第41页 |
3.4.6 方法特异性的测定 | 第41-42页 |
3.5 伏马毒素B_1单克隆抗体直接竞争ELISA的建立 | 第42-44页 |
3.5.1 抗体及酶标抗原稀释倍数的优化 | 第42页 |
3.5.2 封闭液的优化 | 第42-43页 |
3.5.3 标准品与酶标抗原稀释液的pH优化 | 第43页 |
3.5.4 直接竞争ELISA标准曲线 | 第43-44页 |
3.5.5 方法特异性的测定 | 第44页 |
3.6 伏马毒素B_1单克隆抗体胶体金增强间接竞争ELISA的建立 | 第44-48页 |
3.6.1 包被原及抗体稀释倍数的优化 | 第44-45页 |
3.6.2 胶体金-HRP-羊抗鼠IgA酶标二抗稀释倍数的优化 | 第45页 |
3.6.3 封闭液的优化 | 第45-46页 |
3.6.4 标准品与抗体稀释液的优化 | 第46页 |
3.6.5 胶体金增强间接竞争ELISA标准曲线 | 第46-47页 |
3.6.6 方法特异性的测定 | 第47页 |
3.6.7 与传统ELISA的比较 | 第47-48页 |
3.7 样品处理及添加回收实验 | 第48-50页 |
3.7.1 样品基质干扰消除 | 第49页 |
3.7.2 样品添加回收率的测定 | 第49-50页 |
3.8 仪器分析方法确证 | 第50-52页 |
3.8.1 HPLC-MS/MS标准曲线的建立 | 第50页 |
3.8.2 添加回收率的测定 | 第50-52页 |
4 结论 | 第52-54页 |
4.1 全文总结 | 第52页 |
4.2 论文的创新点 | 第52-53页 |
4.3 论文的不足之处 | 第53-54页 |
5 展望 | 第54-55页 |
6 参考文献 | 第55-62页 |
7 攻读硕士学位期间发表论文情况 | 第62-63页 |
8 致谢 | 第63页 |