环介导恒等温扩增技术快速检测大肠菌群的研究
| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5页 |
| 1 引言 | 第9-20页 |
| 1.1 立题的背景和意义 | 第9-10页 |
| 1.2 大肠菌群简介 | 第10-12页 |
| 1.2.1 大肠菌群生物学特征 | 第10-11页 |
| 1.2.2 大肠菌群致病性 | 第11-12页 |
| 1.3 大肠菌群检测研究现状 | 第12-13页 |
| 1.3.1 传统方法 | 第12页 |
| 1.3.2 酶活性检测法 | 第12页 |
| 1.3.3 纸片法 | 第12页 |
| 1.3.4 免疫学方法 | 第12-13页 |
| 1.3.5 聚合酶链反应技术 | 第13页 |
| 1.3.6 Hygicut载片培养法 | 第13页 |
| 1.4 环介导等温扩增(LAMP)技术 | 第13-20页 |
| 1.4.1 LAMP技术简介 | 第13-14页 |
| 1.4.2 LAMP法的引物设计 | 第14页 |
| 1.4.3 LAMP法的扩增机制 | 第14-17页 |
| 1.4.4 LAMP法的基本特点 | 第17页 |
| 1.4.5 LAMP的产物检测 | 第17-18页 |
| 1.4.6 LAMP国内外现状和发展趋势 | 第18-20页 |
| 2 试验用菌的鉴定以及培养 | 第20-39页 |
| 2.1 大肠菌群鉴定培养 | 第20-24页 |
| 2.1.1 实验设备 | 第20-21页 |
| 2.1.2 培养基和试剂 | 第21页 |
| 2.1.3 大肠菌群MPN计数法检验 | 第21-24页 |
| 2.2 金色葡萄球菌鉴定培养 | 第24-28页 |
| 2.2.1 设备和材料 | 第25页 |
| 2.2.2 培养基和试剂 | 第25-26页 |
| 2.2.3 金色葡萄球菌检验培养 | 第26-28页 |
| 2.3 志贺氏菌的鉴定培养 | 第28-31页 |
| 2.3.1 实验设备 | 第28-29页 |
| 2.3.2 培养基和试剂 | 第29页 |
| 2.3.3 志贺氏菌检测培养 | 第29-31页 |
| 2.4 沙门氏菌检测培养 | 第31-39页 |
| 2.4.1 实验设备 | 第31页 |
| 2.4.2 实验培养基和试剂 | 第31-34页 |
| 2.4.3 沙门氏菌检验程序 | 第34-39页 |
| 3 LAMP技术快速检测大肠杆菌反应 | 第39-49页 |
| 3.1 大肠菌群目的基因的选择以及引物设计 | 第39-49页 |
| 3.1.1 目的基因序列 | 第39-40页 |
| 3.1.2 引物设计结果 | 第40-42页 |
| 3.1.3 引物筛选试验 | 第42-49页 |
| 4 LAMP条件优化实验 | 第49-64页 |
| 4.1 实验设备试剂 | 第49页 |
| 4.1.1 实验主要设备 | 第49页 |
| 4.1.2 实验主要试剂 | 第49页 |
| 4.2 最适引物添加量 | 第49-51页 |
| 4.3 最适底物添加量 | 第51-53页 |
| 4.4 最适Bst DNA聚合酶添加量 | 第53-55页 |
| 4.5 最适扩增反应甜菜碱浓度 | 第55-57页 |
| 4.6 最适扩增反应温度 | 第57-58页 |
| 4.7 最适扩增反应时间 | 第58-60页 |
| 4.8 条件优化结果与分析 | 第60-61页 |
| 4.9 LAMP技术灵敏性的研究 | 第61-64页 |
| 5 LAMP扩增产物快速鉴定方法的研究 | 第64-66页 |
| 5.1 沉淀反应 | 第64页 |
| 5.2 颜色反应 | 第64-65页 |
| 5.3 讨论 | 第65-66页 |
| 结论 | 第66-67页 |
| 参考文献 | 第67-70页 |
| 攻读硕士学位期间发表的论文及科研成果 | 第70-71页 |
| 致谢 | 第71页 |
