| 摘要 | 第3-4页 |
| ABSTRACT | 第4-5页 |
| 缩略语表 | 第6-10页 |
| 第1章 引言 | 第10-17页 |
| 1.1 牛乳过敏 | 第10-12页 |
| 1.1.1 牛乳过敏概况 | 第10-11页 |
| 1.1.2 牛乳主要过敏原 | 第11-12页 |
| 1.2 标准物质的研究进展 | 第12-15页 |
| 1.2.1 标准物质的定义 | 第13页 |
| 1.2.2 标准物质的特性值评估 | 第13-15页 |
| 1.3 立题背景与研究内容 | 第15-17页 |
| 1.3.1 立题背景 | 第15页 |
| 1.3.2 研究内容 | 第15-17页 |
| 第2章 牛乳主要过敏原标准物质候选物的小试分离纯化 | 第17-32页 |
| 2.1 引言 | 第17页 |
| 2.2 材料与设备 | 第17-20页 |
| 2.2.1 试剂与材料 | 第17-18页 |
| 2.2.2 主要仪器与设备 | 第18页 |
| 2.2.3 溶液配制 | 第18-20页 |
| 2.3 实验方法 | 第20-24页 |
| 2.3.1 牛乳脱脂处理 | 第20页 |
| 2.3.2 超滤浓缩乳清的制备 | 第20页 |
| 2.3.3 SephadexG-75凝胶层析分离牛乳乳清蛋白 | 第20-21页 |
| 2.3.4 DEAE-Sepharose Fast Flow阴离子交换层析分离α-乳白蛋白和β-乳球蛋白 | 第21-22页 |
| 2.3.5 SDS-PAGE电泳 | 第22页 |
| 2.3.6 Native-PAGE电泳检测β-乳球蛋白的两个异型体 | 第22-24页 |
| 2.3.7 考马斯亮蓝法测定蛋白质浓度 | 第24页 |
| 2.4 结果与分析 | 第24-29页 |
| 2.4.1 凝胶层析初步纯化乳清蛋白 | 第24-25页 |
| 2.4.2 离子交换层析分离牛乳α-乳白蛋白和β-乳球蛋白 | 第25-27页 |
| 2.4.3 Native-PAGE梯度电泳分析β-乳球蛋白的两个异型体 | 第27-28页 |
| 2.4.4 纯化过程中蛋白质含量的变化 | 第28-29页 |
| 2.5 讨论 | 第29-30页 |
| 2.5.1 关于牛乳α-乳球蛋白和β-乳球蛋白的小试分离纯化 | 第29-30页 |
| 2.5.2 关于Native-PAGE检测β-乳球蛋白的两个异型体 | 第30页 |
| 2.6 本章小结 | 第30-32页 |
| 第3章 牛乳主要过敏原标准物质候选物的规模化放大制备研究 | 第32-43页 |
| 3.1 引言 | 第32页 |
| 3.2 材料与设备 | 第32-35页 |
| 3.2.1 试剂与材料 | 第32-33页 |
| 3.2.2 仪器与设备 | 第33页 |
| 3.2.3 溶液配制 | 第33-35页 |
| 3.3 实验方法 | 第35-38页 |
| 3.3.1 牛乳α-乳白蛋白和β-乳球蛋白的规模化放大试验 | 第35-36页 |
| 3.3.2 牛乳α-乳白蛋白和β-乳球蛋白纯化放大试验的工艺设计 | 第36-38页 |
| 3.4 结果与分析 | 第38-41页 |
| 3.4.1 凝胶层析初步分离浓缩乳清蛋白 | 第39-40页 |
| 3.4.2 离子交换层析纯化α-乳白蛋白和β-乳球蛋白 | 第40-41页 |
| 3.4.3 考马斯亮蓝法测定纯化过程中α-乳白蛋白和β-乳球蛋白含量变化 | 第41页 |
| 3.5 讨论 | 第41-42页 |
| 3.5.1 关于凝胶层析分离的放大试验 | 第41-42页 |
| 3.5.2 关于离子交换层析的放大试验 | 第42页 |
| 3.6 本章小结 | 第42-43页 |
| 第4章 牛乳主要过敏原标准物质候选物的理化性质测定及免疫学性质评估 | 第43-65页 |
| 4.1 引言 | 第43页 |
| 4.2 材料与设备 | 第43-45页 |
| 4.2.1 试剂与材料 | 第43-44页 |
| 4.2.2 主要仪器与设备 | 第44页 |
| 4.2.3 溶液配制 | 第44-45页 |
| 4.3 实验方法 | 第45-49页 |
| 4.3.1 牛乳主要过敏原标准物质候选物的鉴定 | 第45页 |
| 4.3.2 牛乳主要过敏原标准品物质候选物的纯度分析 | 第45-46页 |
| 4.3.3 圆二色光谱(circular dichroism)分析标准物质候选物的二级结构 | 第46页 |
| 4.3.4 荧光光谱分析标准物质候选物的疏水性 | 第46页 |
| 4.3.5 牛乳主要过敏原标准物质的IgE结合能力测定 | 第46-48页 |
| 4.3.6 牛乳主要过敏原标准物质候选物的均匀性检测方案 | 第48-49页 |
| 4.3.7 牛乳主要过敏原标准物质候选物的稳定性检测方案 | 第49页 |
| 4.4 结果与分析 | 第49-63页 |
| 4.4.1 牛乳主要过敏原冻干物的质谱鉴定结果 | 第50-52页 |
| 4.4.2 牛乳主要过敏原的纯度测定结果 | 第52-53页 |
| 4.4.3 圆二色光谱检测过敏原蛋白的二级结构 | 第53-54页 |
| 4.4.4 荧光光谱表征过敏原蛋白的疏水性 | 第54-55页 |
| 4.4.5 基于纯度分析检测标准物质候选物的均匀性检测结果 | 第55-57页 |
| 4.4.6 基于蛋白质二级结构表征对候选物蛋白的均匀性检测 | 第57-59页 |
| 4.4.7 基于人血清IgE结合能力的评估对候选物蛋白的均匀性检测 | 第59-61页 |
| 4.4.8 牛乳主要过敏原标准物质候选物的稳定性检验结果 | 第61-63页 |
| 4.5 讨论 | 第63-64页 |
| 4.5.1 过敏原蛋白标准物质候选物的冷冻干燥保存 | 第63页 |
| 4.5.2 过敏原蛋白标准物质候选物的稳定性检测 | 第63页 |
| 4.5.3 过敏原蛋白标准物质候选物的空间结构观察 | 第63-64页 |
| 4.6 本章小结 | 第64-65页 |
| 第5章 结论与展望 | 第65-66页 |
| 5.1 结论 | 第65页 |
| 5.2 展望 | 第65-66页 |
| 致谢 | 第66-67页 |
| 参考文献 | 第67-70页 |
| 硕士期间研究成果 | 第70-71页 |
| 附录A | 第71-72页 |
| 附录B | 第72-73页 |
| 附录C | 第73页 |
