摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-9页 |
1 绪论 | 第9-16页 |
·益生元 | 第9页 |
·低聚半乳糖 | 第9-12页 |
·低聚半乳糖的健康功效 | 第10-11页 |
·低聚半乳糖的市场和应用 | 第11-12页 |
·低聚半乳糖的制备 | 第12页 |
·β-半乳糖苷酶体系及来源 | 第12-13页 |
·β-半乳糖苷酶的反应机制 | 第13-14页 |
·课题的研究背景及意义 | 第14-15页 |
·本课题的主要研究内容 | 第15-16页 |
2 实验材料与方法 | 第16-23页 |
·材料和试剂 | 第16页 |
·实验材料 | 第16页 |
·主要试剂 | 第16页 |
·实验仪器设备 | 第16页 |
·实验方法 | 第16-23页 |
·β-半乳糖苷酶产生菌的筛选及鉴定 | 第16-18页 |
·粗酶液的制备 | 第18页 |
·β-半乳糖苷酶酶活测定 | 第18页 |
·低聚半乳糖的检测方法 | 第18-19页 |
·种子培养生长曲线 | 第19页 |
·菌体生物量测定 | 第19页 |
·培养基优化单因素实验 | 第19页 |
·发酵培养曲线 | 第19页 |
·β-半乳糖苷酶的分离纯化 | 第19-21页 |
·蛋白质浓度的测定 | 第21页 |
·β-半乳糖苷酶酶学性质的研究 | 第21-22页 |
·低聚半乳糖合成条件的确定 | 第22-23页 |
3 结果与讨论 | 第23-50页 |
·产β-半乳糖苷酶菌株筛选及鉴定 | 第23-28页 |
·菌种初筛 | 第23页 |
·菌种复筛 | 第23-24页 |
·细胞的形态观察及生理生化特征 | 第24-25页 |
·SK 22.001 的 16S rRNA 序列测定 | 第25页 |
·酶反应产物的 HPLC 和 LC-MS 分析 | 第25-28页 |
·发酵产酶培养基优化 | 第28-34页 |
·种子生长曲线的测定 | 第28-29页 |
·培养基成分对 SK 22.001 产β-半乳糖苷酶的影响 | 第29-31页 |
·培养条件对 SK 22.001 产β-半乳糖苷酶的影响 | 第31-34页 |
·β-半乳糖苷酶的分离纯化 | 第34-38页 |
·硫酸铵分级沉淀β-半乳糖苷酶 | 第34-35页 |
·热处理 | 第35页 |
·DEAE 离子交换层析 | 第35-36页 |
·Superdex 200 凝胶过滤层析 | 第36-37页 |
·SDS-PAGE 电泳鉴定分子量 | 第37页 |
·β-半乳糖苷酶分离纯化各步骤总结 | 第37-38页 |
·β-半乳糖苷酶酶学性质的研究 | 第38-44页 |
·温度对酶活力及稳定性的影响 | 第38-40页 |
·pH 对酶活力及稳定性的影响 | 第40-41页 |
·金属离子对酶活的影响 | 第41-42页 |
·乳糖水解产物对酶活的影响 | 第42-43页 |
·β-半乳糖苷酶的反应动力学常数 | 第43-44页 |
·低聚半乳糖合成条件的研究 | 第44-50页 |
·缓冲溶液对低聚半乳糖合成的影响 | 第44-46页 |
·起始乳糖浓度对低聚半乳糖合成的影响 | 第46-47页 |
·加酶量对低聚半乳糖合成的影响 | 第47页 |
·反应温度对低聚半乳糖合成的影响 | 第47-48页 |
·pH 对低聚半乳糖合成的影响 | 第48-49页 |
·低聚半乳糖合成时间进程曲线 | 第49-50页 |
主要结论与展望 | 第50-52页 |
主要结论 | 第50页 |
展望 | 第50-52页 |
致谢 | 第52-53页 |
参考文献 | 第53-58页 |
附录一:商品化低聚半乳糖的组成、生产商和所使用的酶源 | 第58-59页 |
附录二:作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第59页 |