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β-半乳糖苷酶菌株筛选、酶的分离纯化和性质及酶法合成低聚半乳糖的研究

摘要第1-5页
Abstract第5-9页
1 绪论第9-16页
   ·益生元第9页
   ·低聚半乳糖第9-12页
     ·低聚半乳糖的健康功效第10-11页
     ·低聚半乳糖的市场和应用第11-12页
   ·低聚半乳糖的制备第12页
   ·β-半乳糖苷酶体系及来源第12-13页
   ·β-半乳糖苷酶的反应机制第13-14页
   ·课题的研究背景及意义第14-15页
   ·本课题的主要研究内容第15-16页
2 实验材料与方法第16-23页
   ·材料和试剂第16页
     ·实验材料第16页
     ·主要试剂第16页
     ·实验仪器设备第16页
   ·实验方法第16-23页
     ·β-半乳糖苷酶产生菌的筛选及鉴定第16-18页
     ·粗酶液的制备第18页
     ·β-半乳糖苷酶酶活测定第18页
     ·低聚半乳糖的检测方法第18-19页
     ·种子培养生长曲线第19页
     ·菌体生物量测定第19页
     ·培养基优化单因素实验第19页
     ·发酵培养曲线第19页
     ·β-半乳糖苷酶的分离纯化第19-21页
     ·蛋白质浓度的测定第21页
     ·β-半乳糖苷酶酶学性质的研究第21-22页
     ·低聚半乳糖合成条件的确定第22-23页
3 结果与讨论第23-50页
   ·产β-半乳糖苷酶菌株筛选及鉴定第23-28页
     ·菌种初筛第23页
     ·菌种复筛第23-24页
     ·细胞的形态观察及生理生化特征第24-25页
     ·SK 22.001 的 16S rRNA 序列测定第25页
     ·酶反应产物的 HPLC 和 LC-MS 分析第25-28页
   ·发酵产酶培养基优化第28-34页
     ·种子生长曲线的测定第28-29页
     ·培养基成分对 SK 22.001 产β-半乳糖苷酶的影响第29-31页
     ·培养条件对 SK 22.001 产β-半乳糖苷酶的影响第31-34页
   ·β-半乳糖苷酶的分离纯化第34-38页
     ·硫酸铵分级沉淀β-半乳糖苷酶第34-35页
     ·热处理第35页
     ·DEAE 离子交换层析第35-36页
     ·Superdex 200 凝胶过滤层析第36-37页
     ·SDS-PAGE 电泳鉴定分子量第37页
     ·β-半乳糖苷酶分离纯化各步骤总结第37-38页
   ·β-半乳糖苷酶酶学性质的研究第38-44页
     ·温度对酶活力及稳定性的影响第38-40页
     ·pH 对酶活力及稳定性的影响第40-41页
     ·金属离子对酶活的影响第41-42页
     ·乳糖水解产物对酶活的影响第42-43页
     ·β-半乳糖苷酶的反应动力学常数第43-44页
   ·低聚半乳糖合成条件的研究第44-50页
     ·缓冲溶液对低聚半乳糖合成的影响第44-46页
     ·起始乳糖浓度对低聚半乳糖合成的影响第46-47页
     ·加酶量对低聚半乳糖合成的影响第47页
     ·反应温度对低聚半乳糖合成的影响第47-48页
     ·pH 对低聚半乳糖合成的影响第48-49页
     ·低聚半乳糖合成时间进程曲线第49-50页
主要结论与展望第50-52页
 主要结论第50页
 展望第50-52页
致谢第52-53页
参考文献第53-58页
附录一:商品化低聚半乳糖的组成、生产商和所使用的酶源第58-59页
附录二:作者在攻读硕士学位期间发表的论文第59页

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